Smartline Autosampler 3900 Manual / Handbuch V 1508 03/2007

Smartline Autosampler 3900 

Manual / Handbuch 

V 1508 03/2007 

Wissenschaftliche Gerätebau 

Dr. Ing. Herbert Knauer GmbH 

Hegauer Weg 38 

D - 14163 Berlin, Germany 

Tel.: +49 (0)30 809 727 0 

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CONTENTS 

Using this Manual 5 

Conventions in this Manual 5 

Quick Start AS 3900 5 

Programming Chart 10 

About AS 3900 11 

Instrument Description 13 

Injection Principle 14 

Full loop injections 15 

Partial loop fill injections 16 

µl Pick-up injections 18 

Installation 20 

Unpacking 20 

Location of AS 3900 21 

Power connections 21 

Fluid connections 22 

HPLC connections 23 

Waste tubing 23 

Wash solvent and System rinse 23 

Syringe 24 

Preparation of vials 24 

Vial dimensions 24 

Filling and sealing the vials 26 

Loading the sample tray 27 

Control I/O connections. 27 

Contact closure output connector (P1): 27 

TTL input connector (P2): 27 

Multi Link Connector 29 

Operation 30 

Typographic convention 30 

How to use the keyboard 30 

Hard function keys 31 

Direct functions 31 

Direct Control functions: 32 

32 

System Settings 34 

General System Settings 35 

Method System Settings 36 

Tray Settings 36 

I/O configuration 37 

Serial Communication 37 

Prep Mode System Settings 37 

Method programming 38 

Injection program 38 

Wash program 39 

Timed events program 40 

Mix program 42 

Programming the Run sequence; Series 43 

Running 45 

Start and Stop 45 

Remote control 45 

Priority sample 46 

Programming during Run 47

2 

Maintenance 47 

Injection valve 47 

Replacing the injection valve 47 

Valco Cheminert ® Module C2 Valve 48 

Operating Instructions for Rheodyne Model 7739 Valve 49 

Operating Instructions for Rheodyne Model 9740 Valve 50 

Needle and tubing 52 

Sample needle 54 

Air needle replacement 55 

Sample needle penetration depth 55 

Syringe 55 

Troubleshooting 57 

Start up problems 57 

Analytical problems 58 

Quick check! 58 

No injection 59 

Bad reproducibility 60 

APPENDIX A: List of Accessories 61 

APPENDIX B: Error Codes 63 

APPENDIX C: Test Procedure 65 

APPENDIX D: AS 3900, Preparative 73 

Specifications AS 3900, prep 73 

Installation AS 3900, prep 74 

Injecting with the AS 3900, prep 75 

Firmware replacement 75 

Technical Data 77 

Declaration of conformity 152 

Guarantee statement 153 

INDEX 154

INHALT 

Hinweise zum Gebrauch des Handbuchs 78 

Konventionen in diesem Handbuch 78 

Schnellstart des AS 3900 79 

Programmübersicht 84 

AS 3900, allgemeine Beschreibung 85 

Instrumentbeschreibung 87 

Injektionsprinzip 88 

Vollschleifeninjektion 89 

Partielle Schleifenfüllung 91 

µl Pick-up Injektionen 92 


Auspacken 94 

Aufstellung des AS 3900 95 

Netzanschluss 95 

Kapillar- und Schlauchanschlüsse 96 

HPLC Kapillaranschlüsse 97 

Abfallleitungen 97 

Waschlösung und Systemspülung 97 

Spritze 98 

Vorbereitung der Vials 98 

Vialdimensionen 98 

Füllen und Verschließen der Vials 100 

Beschickung des Probentellers 101 

Steueranschlüsse I/O 101 

Kurzschlussausgangsanschluss (P1): 101 

TTL Eingangsanschluss (P2) 101 

Multi Link Anschlüsse 103 

Betrieb 104 

Typographische Festlegungen 104 

Benutzung der Tastatur 104 

Feste Funktionstasten 105 

Direktfunktionen 105 

Direkte Steuerfunktionen: 106 

Systemeinstellungen 108 

Allgemeine Einstellungen 109 

Methodeneinstellungen 110 

Probentellereinstellungen 110 

I/O Konfiguration 111 

Serielle Kommunikation 111 

Prep-Modus Einstellungen 111 

Methodenprogrammierung 112 

Injektionsprogramm 113 

Waschprogramm 114 

Ereignisprogramm (Timed events program) 114 

Mischprogramm 116 

Programmierung der Runsequenz; Serie 117 

Betrieb 119 

Start und Stopp 119 

Fernsteuerung 120 

Probenpriorität 120 

Programmierung während des Laufs 121 

3

4 

Wartung 121 

Injektionsventil 121 

Austausch des Injektionsventils 121 

Valco Cheminert ® Module C2 Ventil 122 

Bedienungsanleitung für das Rheodyne Ventil Modell 7739 123 

Bedienungsanleitung für das Rheodyne Ventil 9740 125 

Nadel und Schlauchverbindung 126 

Probennadel 128 

Luftnadelaustausch 129 

Eindringtiefe der Probennadel 129 

Spritzenwechsel 129 


Startprobleme 131 

Analytische Probleme 132 

Schnelltest 132 

Keine Injektion 133 

Schlechte Reproduzierbarkeit 134 

ANHANG A: Zubehör 135 

ANHANG B: Fehlermeldungen 137 

ANHANG C: Test Prozeduren 139 

ANHANG D: AS 3900, Prep 147 

Spezifikationen des AS 3900, prep 147 

Installation des AS 3900, prep 148 

Injektionen mit dem AS 3900, prep 148 

Firmwareaustausch 149 

Technische Daten 151 

Gewährleistungsbedingungen 152 

Konformitätserklärung 153 

INDEX 156

Using this Manual 5 

Using this Manual 

Conventions in this Manual 

Special Warnings are indicated by the marginal warning sign and 

printed in bold letters. 

The marginal lamp symbol indicates helpful advice. 

Important Hints are marked by the marginal hand symbol. 

Arrows in an outlined form like this example used in block diagrams 

indicate an automatic program run and change to the next line without the 

necessity of manual interventions. 

Arrows like this, used in block diagrams, indicate that the user is asked to 

press the corresponding arrow keys 

� � � � The triangles symbolize the use of corresponding arrow keys. 

Quick Start AS 3900 

This section of the manual is written, to make a quick start with your 

autosampler AS 3900. Step by step from installation through running 

complete analysis. It makes AS 3900 your companion in the lab in a 

minimum of time. 

Installation 

(For more detailed information, See page 20 of this manual) 

• Allow the AS 3900 to adopt ambient temperature for at least one 

hour 

• Check AS 3900 for visual damages due to transport, if this is the 

case, please contact your distributor immediately. 

• Remove the safety screw on the right-hand side of the front cover. 

Keep the keyboard front cover closed during operation. 

• Check fuses and voltage settings on the rear side of the 

instrument. 

• Connect the power cable

6 Quick Start AS 3900 

• After turning "ON" the power, the Ready screen appears displaying 

the firmware revision number. 

• Connect the drain tubing to the wash outlet on the lower front side 

of the instrument. 

• Fill the wash solvent bottle with distilled water/ 2-Propanol (80/20 

v/v%) or mobile phase. Only water/organic solvents should be 

used. Do not use any crystalline or buffer solutions; these may 

block the system and cause severe damages. To avoid air bubbles 

in the syringe degas the wash solvent. 

• Fill the wash solvent tubing, syringe and buffer tubing by washing 

the system 2 or 3 times. This is done by pressing the soft 

function key from the Ready screen. Check if there are some air 

bubbles trapped in the syringe, they can be removed by gently 

ticking to the syringe. 

• Connect your HPLC pump to port 1 of the injection valve and the 

column (or capillary) to port 6 of the injection valve. Check for 

leakage and let the system equilibrate for at least 5 minutes. 

System settings (See page 34 of this manual) 

Normally these settings are correctly installed, to check and set these 

(standard) settings, proceed as follows: 

Press keys: Description: 

[System] Enter the System Settings 

Enter the General Settings 

[0100] [Enter] Volume of installed loop: 100 µl. 

[015] [Enter] Volume of tubing needle ↔ valve:015 µl 

[Enter] Syringe volume: 250 µl 

[Enter] Set Syringe speed to Normal. 

[Enter] Skip missing vials. 

[Enter] Air segment: use air segment 

[Enter] Headspace pressure: On 

Press [Escape] twice to go back to the Ready screen 

Example 1: Performing a 10 µl partial loop fill injection from vial number 1. 

Performing injection routines is easy with AS 3900. First you define a 

method such as the injection, mix or wash method. These methods are 

stored in battery back up. Subsequently a Run sequence or Series can 

be programmed in which those methods are linked to the Series of vials. 

AS 3900 will eventually execute those Series. 

Programming the method (See page 38 of this manual) 

Injection Program: 


[Methods] [1] [Enter] Enter Method number 1. 

Selecting partial loop fill injection 

[Enter] 

program 

[30] [Enter] Flush volume: e.g. 30 µl 

[1] [Enter] Number of injections per vial: 1 

[10] [Enter] Injection volume: 10 µl 

[100] [Enter] Enter the analysis time e.g. 1 minute 

Press [Escape] once to go up one level. 

Wash Program: 


Selecting wash program 

Disable the wash 

Press [Escape] three times to go back to the Ready screen.


Programming the Series (See page 43 of this manual) 


[Series] [1] [Enter] Enter Series number 1. 

[1] [Enter] Enter Method number:1 

[1] [Enter] Enter First sample vial: 01 

[1] [Enter] Enter Last sample vial: 01 

Press [Escape] (twice) to go back to the Ready screen 

Running the Series (See page 45 of this manual) 

Put a sample vial in position 1. (If you can’t reach position 1, turn the tray 

manually). 


[Start/Stop] 

[1] [Enter] Start at Series number:1 

[1] [Enter] Stop after Series number: 01 

If you press AS 3900 will start searching for vial 1 and perform 

a 10 µl injection. 

EXAMPLE 2: Performing three 10 µl injections from one vial without sample loss 

using the µl Pick-up injection routine, followed by a wash routine 

between each injection. 

If the Air segment is set ON in System Settings, a small air segment 

will also be injected into your HPLC system (For more detailed 

information, See page 45 of this manual). 

For switching OFF the air segment enter the System Settings and change 

the setting for the air segment: from YES to NO. 

This is done by pressing 

[System] [Enter] [Enter] [Enter] [Enter] [Enter] 

[Escape] [Escape] 


Injection program: 



 

[Enter] 

Selecting µl pick-up injection program 





Wash Program: 


Selecting wash program 

[ENTER} Perform a wash after each injection 

[1] [Enter] Enter the number of syringe volumes to be 

used for washing, e.g. 1 syringe volume. 

Press [Escape] three times to go back to the Ready screen. 



[Series] [1] [Enter] Enter Series number 1.

8 Quick Start AS 3900 







Put a sample vial in position 1 and a vial with transport solvent (mobile 

phase) in position 85. 

Be sure the transport vial is filled correctly before starting a new 

Series. 


[Start/Stop] 



If you press AS 3900 will start searching for the transport vial 

and perform 3 injections of 10 µl. After every injection the needle system 

will be washed with 1 syringe volume. 

EXAMPLE 3: Performing a 1:10 dilution followed by a 10 µl partial loop fill 

injection 

The mix method will perform the following: 

Transfer 360 µl from Reagent A to the destination vial, add 40 µl sample, 

mix 3 times with 250 µl and subsequently inject 10 µl. 

From the Ready screen: 


Injection Program: 



Selecting partial loop fill injection program 

[Enter] 

[30] [Enter] Flush volume: e.g. 30 µl 





Wash Program: 


Selecting Wash program 

Disable the wash 


Mix Program: (See page 42 of this manual) 


Selecting Mix program 

Confirm the use of the Mix program 

 

[180] [Enter] 

[Enter] 

 

[Enter] 

Insert the first Mix step: 

Add 180 µl Reagent–A to the Destination 

vial. 

Insert the second Mix step:



[180] [Enter] 

[Enter] 

 

[Enter] 

 

[40] [Enter] 

[Enter] 

 

[Enter] 

 

[3] [Enter] 

[250] [Enter] 

Add another 180 µl Reagent–A to the 

Destination vial. 

Insert the third Mix step: 

Add 40 µl from the Sample vial to the 

Destination vial. 

Insert the fourth Mix step: 

Mix the contents of the Destination vial 3 

times with a volume of 250 µl 

Press [Escape] three times to go back to the Ready screen 



[Series] [1] [Enter] Enter Series number 1. 




[2] [Enter] Enter First destination vial: 02 



Put a sample vial in position 1, an empty sealed destination vial in 

position 2 and a filled reagent vial in position 86. Be sure the reagent vial 

is filled correctly before starting a new Series. (If you can’t reach one of 

the tray positions, turn the tray manually). 


[Start/Stop] 



If you press AS 3900 will start searching for vial 86 and 

transport 180 µl to the destination vial twice, subsequently 40 µl of 

sample will be added and after mixing 3 times a 10 µl injection will be 

performed.

10 Programming Chart 

Programming Chart 

[System] 

[Methods] 

[Series] 

[Start/Stop] 

[Priority] 

[Hold/Cont.] 

Ready screen 

 

Perform 

standard 

wash 

Maintenance 

functions. 

System Settings 

1 

Copy 

methods 

Erase 

methods 

Midas 

logbook 

Serial 

communication 

protocol 

Control 

column oven 

temperature 

Control 

sample tray 

cooling 

 

Loop volume 

Needle volume 

Syringe volume 

Syringe speed 

Skip missing vials 

Air segment 

Headspace pressure 

Use calibration 

vials 

Method programming 

Tray type Inject marker pulse length 

Input edge next injection 

Freeze input active 

Reset outputs after last 

Series 

Service 

mode 

Device identifier Select Prep mode 2 

 

Injection type: 

 

Flush volume 

No injections/vial 

Analysis time 

Flush volume 


Injection volume 

Analysis time 

Method number 

First sample vial 

Last sample vial 

Use calibration vials 3 

First calibration vial 

Last calibration vial 

Vials between calibration 

First destination vial 4 

First Series 

Last Series 

 

Sample vial 

Hold the analysis time of the Midas 

Fig. 1 Programming chart 



Analysis time 

Wash volume Timed events program: Mix program: 

Wash between: 

- Series 

- Vials 

- Series 

- 4 x AUX-1 

- 4 x AUX-2 

- INITIAL OVEN SETPOINT 

- 2 x OVEN SETPOINT 

- END TIME 

1. Available when the optional tray cooling is installed. 

2. When selecting the Prep mode, some system settings are no longer programmable, but set to a fixed value. 

3. Depends on the System Settings. 

4. In case Destination vials are used in the mix of the method. 

- Add 

- Mix 

- Wait

About AS 3900 11 

About AS 3900 

AS 3900 has been designed to meet the challenge of the modern 

analytical laboratory: robust, cost-effective and easy to implement. 

Column temperature control and sample cooling are available for 

consistent results. High-resolution syringe control guarantees superior 

precision for injection and reagent addition. And, for quick service, the 

entire injection valve can be replaced in seconds! The use of these and 

many more features is described in this manual to help you exploit the full 

potential of AS 3900. 

PASA, a robust injection concept. 

Loop injection with Pressure Assisted Sample Aspiration (PASA) is a 

proven concept that combines high precision with simplicity and reliability. 

No moving around with the sample needle. Reduced risk for bubbles in 

the sample line. No needle port that wears and contaminates. There is 

only intelligent valve switching and highly accurate syringe control. Yet, 

three injection modes can be selected: full loop, partial loop filling and µl 

Pick-up for maximum precision, maximum flexibility and zero sample 

loss. 

Fig. 2 The PASA injection concept. 

Air pressure

12 About AS 3900 

Side-port needle: a good point! 

The strong side-port needle combines the optimum point style for piercing 

with a minimum risk of blockage by septum particles. For small sample 

volumes, a spring-loaded needle is available for maximum sample 

aspiration independent of variations in vial dimensions. 

Column oven for consistent results. 

A column oven is an integral part of AS 3900, because constant column 

temperature is important for long term stability of a chromatographic 

separation and may be required by GLP directives. 

Integrated sample cooling option. 

Thermo-electric sample cooling is available as a fully integrated option. 

No external device is required and the efficient cooling concept does not 

restrict access to the sample tray during operation. 

Reagent addition made simple. 

Internal Standard addition, sample dilution or derivatization can be 

programmed in a very simple manner. A single-stage derivatization of a 

sample in a separate (destination) vial requires no more than 4 program 

lines. Multi-reagent addition is also possible: two large volume reagent 

vials are available on the sample tray. 

PC-based control. 

For communication with external computers, a serial interface and 

Smartline communication protocol are standard. A Microsoft® Windows 

based software package for AS 3900 control from a PC greatly improves 

operation and programming convenience and extends programming 

capabilities. A printout of all relevant system parameters is another 

valuable plus when using PC control. The Microsoft® Windows 

package will become available by the end of 1996. 

Service friendly design. 

Low instrument down time is accomplished by a high mean time between 

failure and quick instrument service. Special attention has been paid to 

these aspects of the concept, as is illustrated by the injection valve: AS 

3900 will alert you in case the lifetime of the seal is exceeded or if the 

switching torque becomes too high. This allows preventive maintenance 

before injection performance degrades. And if necessary, the entire 

injection valve can be replaced in seconds with the unique Quick-fit valve 

mounting mechanism.

Instrument Description 13 

Instrument Description 

8 

10 

9 

7 

12 

11 

Fig. 3 autosampler AS 3900 exploded view. 

13 

1. Needle arm. 

2. Injection valve. 

3. Oven compartment. 

4. Tubing guide. 

5. Wash position. 

6. Position for transport solvent 

and reagent vials. 

6 

5 

7. Wash and waste drain. 

8. Condensed water and 

leakage drain 

9. Tray fixation knob. 

10. Sample tray. 

11. Syringe dispenser. 

12. Keyboard. 

13. Buffer tubing. 

Placing the sample tray in the AS 3900: 

• Place the sample tray in the AS 3900 and rotate it till 

sinks into the slot, only one position possible. 

• Turn the tray fixation knob (9) clock-wise to fixate the 

tray. 

• The AS 3900 is now ready for use. 

1 

4 

3 

2

14 Injection Principle 

1. P2- I/O connector; Inputs, see page 27. 

2. P1- I/O connector; Relays outputs. 

3. Mains switch. 

4. Mains input. 

5. Fuses and voltage selector. 

6. CE-mark. 

7. RS-232 communication interface connector. 

8. Fan, only when tray-cooling option is installed. 

Fig. 4 Rear side of the autosampler AS 3900. 

Injection Principle 

A unique sequence of valve switching and syringe dispenser controlled 

sample withdrawal enables the AS 3900 to inject sample volumes in a 

range from a few microliters to milliliters in a simple and reproducible 

manner. 

Therefore three different methods for injection can be selected: 

• Full loop: The sample loop is completely (quantitatively) 

filled with sample resulting in extremely good 

reproducibility. 

• Partial loop fill: The sample loop is partially filled with sample; 

low sample loss and programmable injection 

volumes. 

• µl pick-up: After aspiration from the vial the sample volume 

is transported into the loop with transport liquid 

(mobile phase) from another vial; no sample loss. 

S1 

ON DIP 

S2 

ON DIP 

OUT IN


The AS 3900 uses a syringe to aspirate the sample from a vial into the 

sample loop. To prevent contamination of the syringe the AS 3900 is 

equipped with a buffer tubing between the syringe and the injection valve. 

The wash solvent is used to remove the sample from the buffer tubing 

and sample needle and rinse the buffer tubing and sample needle. 

Full loop injections 

The switching sequence for a full loop injection is schematically shown in 

the following figures: 

Fig. 5 Full loop injection: initial situation. 

Fig. 6 Full loop injection: flushing sample lines and needle. 

Fig. 7 Full loop injection: switch injection valve to LOAD. 

The Initial situation: the injection 

valve is in the INJECT position. The 

sample needle with air needle has 

entered the vial. The headspace 

pressure, applied through the outer 

air needle, ensures that no air or 

vapour bubbles are formed during 

sample aspiration. 

The syringe dispenser aspirates the 

“flush volume” from the sample vial 

to fill the sample line with sample 

and remove wash solvent. 

The injection valve is switched into 

the LOAD position, placing a distinct 

sample front at the inlet of the 

sample loop. 

The sample loop is quantitatively 

filled by transporting a number of 

times the loop volume through the 

loop, depending on the volume of the 

loop. 

3x loop volumes 

for loops 500 µl


Fig. 8 Full loop injection: filling the sample loop. 

Fig. 9 Full loop injection: injecting sample. 

The injection valve switches into the 

INJECT position. The sample loop is 

now part of the HPLC mobile phase 

flow path: sample is transported to 

the column. The analysis starts. 

If one injection is to be made out of each vial or a wash routine has to be 

performed after every injection: the needle withdraws from the vial 

directly after the injection and, if programmed, directly performs a wash. 

After the analysis time a new sequence is started. 

The next injection sequence will start with a flush of 50% of the 

programmed flush volume, in case an injection from the same vial and no 

wash routine is programmed. Otherwise it will start with a flush of the 

programmed flush volume. If the withdrawal of sample for the next 

injection will exceed the total volume of the sample buffer tubing, the 

buffer tubing is rinsed before the next injection. The next injection will 

start with the programmed flush. 

Air segment 

An air segment can be used to reduce the amount of flush volume. This 

air segment is at the front of the flush volume and will not be injected and 

therefore will not influence the injection. The air segment may be selected 

in the system settings (ON/OFF, See page 34). 

With a standard needle the flush volumes must be minimal 30 µl for 

injections with air segment and 35 µl for injections without air segment. If 

the samples are highly viscous it may be necessary to program larger 

flush volumes and reduce the syringe speed for better performance. 

Fig. 10 Situation after filling the loop in case of Full loop injections 

with air segment (A) or without air segment (B) 

Partial loop fill injections 

The switching sequence for a partial loop fill injection is schematically 

shown in the following figures:


Fig. 11 Partial loop fill injection: initial situation. 

The Initial situation: the injection 

valve is in the INJECT position. The 

sample needle with air needle has 

entered the vial. The headspace 

pressure, applied through the outer 

air needle, ensures that no air or 

vapour bubbles are formed during 

sample aspiration. 

The syringe dispenser aspirates the 

“flush volume” from the sample vial 

to fill the sample line with sample 

and remove wash solvent. 

Fig. 12 Partial loop fill injection: flushing sample lines and needle. 

The injection valve is switched into the 

LOAD position, placing a distinct 

sample front at the inlet of the sample 

loop. 

Fig. 13 Partial loop fill injection: switch injection valve to LOAD. 

Fig. 14 Partial loop fill injection: filling the sample loop. 

The programmed injection volume is 

now aspirated into the sample loop.


Fig. 15 Partial loop fill injection: injecting sample. 




flow path: sample is transported to the 

column. The analysis starts. 

The next injection sequence will start with a flush of 50% of the 

programmed flush volume, in case an injection from the same vial and no 

wash routine is programmed. Otherwise it will start with a flush of the 

programmed flush volume. If the withdrawal of sample for the next 

injection will exceed the total volume of the sample buffer tubing, the 

buffer tubing is rinsed before the next injection. The next injection will 

start with the programmed flush. 

Air segment 

An air segment can be used to reduce the amount of flush volume. This 

air segment is at the front of the flush volume and will not be injected. 

The air segment can be selected in system settings (ON/OFF, See page 

34). 

With a standard needle the flush volumes must be minimal 30 µl for 

injections with air segment and 35 µl for injections without air segment. If 

the samples are highly viscous it may be necessary to program larger 

flush volumes and reduce the syringe speed for better performance. 

Fig. 16 Situation after filling the loop in case of Partial loop fill injections with (A) 

or without air segment (B) 

µl Pick-up injections 

The switching sequence for a µl pick-up injection is schematically shown 

in the following figures: 

The Initial situation: the injection valve 

is in the INJECT position. The sample 

needle has entered the vial of 

transport liquid (mobile phase, this to 

avoid disturbance of the 

chromatogram with an additional peak 

of the transport solvent). 

Fig. 17 µl pick-up injection: initial situation.


For the first injection, after a wash or 

after emptying of the buffer tubing. 

The syringe dispenser aspirates 

transport liquids from the transport vial 

to fill the sample line with transport 

liquid and remove wash solvents. 

Fig. 18 µl pick-up injection: filling sample lines with transport liquid. 

The needle moves from the transport 

vial to the sample vial. The injection 

valve is switched into the LOAD 

position. 

Fig. 19 µl pick-up injection: go to sample vial and switch injection valve to LOAD. 

Fig. 20 µl pick-up injection: filling the sample loop. 

The programmed injection volume is 

aspirated from the sample vial. 

The sample needle moves back to the 

transport vial. 

The sample is quantitatively 

transported into the loop, with 

transport liquid (mobile phase) from 

the transport vial. 

Fig. 21 µl pick-up injection: transporting sample into the sample loop. 




flow path: sample is transported to the 

column. The analysis starts.

20 Installation 

Installation 

Fig. 22 : µl pick-up injection: injecting sample. 

For the next sequence the first withdrawal of transport solvent is omitted, 

unless a wash routine is performed or the AS 3900 has emptied the 

buffer tubing into the waste. In those cases the sequence is completely 

repeated. 

Air segment 

If an air segment has been programmed, it appears at the front of the first 

plug of transport liquid and at the front of every sample plug. An air 

segment can be programmed in the system settings (See page 34). 

In the µl pick-up mode, the air segment at the front of the sample 

plug is injected into the HPLC system. 

Fig. 23 Situation after filling the loop in case of µl pick-up injections 

with air segment (A) or without air segment (B) 

Unpacking 

In case of µl pick-up injections, there will be no air pressure 

(headspace pressure) on the vials, to avoid sample errors due to air 

expansion during vial exchange from the sample vial to the 

transport solvent vial. 

Inspect the AS 3900 for indications of damage. Damage that occurs to 

the AS 3900 in transit, indicated by damaged containers, is the 

responsibility of the carrier and should be reported to the carrier 

immediately. Shipping containers should be inspected by the carrier if a 

claim is filed. 

For contents of shipping containers see the packing list in container. 

Before using the AS 3900 allow the instrument to acclimatise for a 

period of 1 hour. 

It is recommended to store the shipping container of the AS 3900. It has 

to be used if it should be necessary to ship the AS 3900 for service 

purposes. 

Lift the AS 3900 as shown below in Fig. 24.


Fig. 24 AS 3900 lift instructions 

Lift the AS 3900 with both hands under the instrument or with one 

hand under the front and the other hand grasping the rear top of the 

AS 3900. 

Do NOT lift the AS 3900 at the front cover of the autosampler. 

Location of AS 3900 

The AS 3900 needs approximately 30 cm (12 inches) of bench space and 

one power supply (230 VAC or 115 VAC, 50/60 Hz). 

The best place to put your AS 3900 is at the left-hand side of your HPLC 

system, next to your HPLC pump and detector. From the right-hand side 

you have the shortest connection to the injection valve of the AS 3900. 

Be sure that none of the ventilation holes are blocked. Blockage of the 

ventilation holes can cause malfunctioning of the AS 3900 autosampler or 

even damage the electronics inside. 

Do not install the AS 3900 in areas subject to excessive dust, direct 

sunlight or shocks and do not place it near any other source of heat, this 

will disturb the cooling of the tray when installed. 

Power connections 

Before plugging in the power cable, check voltage setting of the AS 3900 

at the input socket on the rear-panel. Make sure that the voltage setting is 

identical with the voltage of your local power supply; use only a supply 

appliance with protective grounding. 

If the indicated voltage is not correct select the proper voltage by 

removing, inverting, and then re–entering the voltage selector-cartridge. 

Check if the right fuses are installed, if not replace them with the right 

fuses. 

All fuses must be UL listed and CSA certified! 

For 115 VAC ±15%, use two 5 AT-fuses (slow). 

For 230 VAC ±15%, use two 2.5 AT-fuses (slow).


Fluid connections 

RISK OF FIRE, REPLACE FUSES AS MARKED. 

When the voltage selection and fuses are correct for your power source, 

plug in the power cable. 

The AS 3900 is factory installed with a 250 µl syringe, a 100 µl loop, a 

500 µl buffer tubing and a stainless steel sample needle. 

A schematic presentation of all parts that have contact with any kind of 

fluid is shown below. This sticker can be found on the inside of the front 

cover. 

To get access to the fluidics, it is necessary to open the front cover of the 

AS 3900, therefore remove the screw on the right-hand side of the AS 

3900 front cover. 

See Table 1 for the dimension of the standard installed tubing. 

To obtain an optimal performance of the AS 3900, a correct combination 

of syringe, loop and buffer tubing should be installed, see also section 

Needle and tubing on page 52. 

Fig. 25 Fluid connections of the AS 3900 (sticker). 

Table 1: Standard installed tubing of the AS 3900. 

Tubing Material and dimensions Label 

Standard sample 

needle and tubing. 

Buffer tubing from 

high-pressure valve to 

syringe valve. 

Tubing syringe valve 

to wash solvent bottle. 

Tubing syringe valve 

to waste. 

SS tubing; 70 mm x 0.65 mm OD x 

0.25 mm ID 

Tefzel tubing; 155 mm x 1 /16” OD x 

0.25 mm ID 

PTFE tubing; 640 mm x 1 /16” OD x 

1.0 mm ID 


1.0 mm ID 


1.6 mm ID 

15 µl 

500 µl


HPLC connections 

To ensure reproducible injections the following connections to your HPLC 

system should be made: 

Connect the HPLC pump to port 1 of the injection valve. 

Connect the HPLC column to port 6 of the injection valve. 

The instrument has been flushed with isopropanol: make sure that the 

mobile phase of your HPLC system is miscible with Isopropanol. If not 

start up with an intermediate solvent as mobile phase (disconnect the 

HPLC column) 

It's essential that the contents of the sample loop are injected in back 

flush onto the column, therefore: Do not exchange column and pump 

connections at the injection valve. 

Waste tubing 

General waste: (See Fig. 3, pos. 7) 

Connect the drain tubing (in the ship kit of the AS 3900) to the right-hand 

drain hose connector of the AS 3900 and put it in a bottle, which is placed 

on the floor. Through this drain all the liquid dispensed into the wash 

position, is removed. 

Sample, which is not injected, is also removed through this tubing. 

Syringe waste: (See Fig. 25) 

Place the syringe waste tubing into a small bottle next to the AS 3900. If 

no injection volumes are programmed that are larger than the buffer 

tubing can contain, the syringe waste will only be wash solvent. 

Condense water and leakage drain: (See Fig. 3, pos. 8) 

Through the left-hand hose connector all leakage solvents and 

condensed water, in case a Peltier cool option is installed, is drained. 

If the optional Peltier tray cooling is installed, it is advisable to connect 

this hose connector (in the ship kit of the AS 3900) to a waste container 

on the floor. 

Be sure that the drain and waste tubing are not twisted and thereby 

obstructing the flow path. 

Wash solvent and System rinse 

Use a clean bottle for the wash solvent and place it at the left-hand side 

of the AS 3900. 

It is recommended to use a mixture of distilled water / isopropanol 

(80/20 v /v%) or mobile phase as wash solvent. 

Before using the wash solvent, degas the solvent with Helium or an 

ultrasonic bath. 

Do not use salts or buffer solutions; crystals may block or damage 

the system. 

To fill the wash solvent tubing use the following procedure: 

• Put the wash solvent tubing in the filled wash solvent bottle. 

• Press to go to the AS 3900 maintenance 

functions. 

• Fill the tubing using the AS 3900 soft-function keys 

and .


- With a syringe volume of wash solvent is aspirated 

from the wash solvent bottle and the wash solvent tubing is 

filled. 

- With the syringe contents will be dispensed to 

the syringe waste. 

• Repeat this action until the wash solvent tubing and the syringe are 

completely filled. 

• Press [Escape] to leave the maintenance screen. 

After the wash solvent tubing and the syringe are filled, press 

to perform a standard wash routine. All tubing connected to the syringe 

valve will be rinsed with wash solvent. 

Syringe 

The AS 3900 is factory equipped with a 250 µl syringe, but can also be 

equipped with a 1000 µl syringe, See page 55 how to replace the syringe. 

The AS 3900 will give the best results if all air is removed from the 

syringe. Use to remove air from the syringe, if this is not 

satisfactory, See page 23 for more tips on removing air. 

Preparation of vials 

Vial dimensions 

The AS 3900 is standard equipped with a tray which can contain 84 

standard sample and three large volume vials for reagents and transport 

liquid. 

Vials used should meet the following dimensions: 

Maximum vial height, including cap: 47 mm 

Minimum vial height, including cap: 32 mm 

Maximum vial diameter: 

Standard sample vial: 12 mm 

Reagent / transport liquid vials: 22 mm 

Large sample volume vials: 22 mm 

The following section contains examples of Chromacol vials witch can be 

used in the AS 3900. See appendix A, List of accessories, for the 

corresponding article numbers for the vials, seals and caps. 

Chromacol standard sample vials 

The following Chromacol vials can be used in the AS 3900. For each vial 

the Chromacol reference number is given. 

Fig. 26 Standard sample vials.


Fig. 27 Conical vials with support. 

Fig. 28 Plastic vials. 

To reduce the volume of standard vials use a Chromacol insert (02–MTV, 

02–MTVWG or 03–MTV) in combination with the appropriate vial and 

support sleeve or spring. 

Fig. 29 Standard vial with insert. 

Chromacol 2.5-CV vials 

It is possible to use the Chromacol 2.5-CV vials in the AS 3900. 

When used, this vial type must be programmed in the System Settings, 

see page 34. 

AS 3900 uses two aspiration heights to aspirate liquid from the 2.5- 

CV vials. Therefore the vials need to be full, when AS 3900 is 

started. 

When a vial is not full the AS 3900 might aspirate air! 

Chromacol reagent and transport liquid vial 

The following Chromacol vial can be used for reagents and transport 

liquid; this vial can also be used in the optional LSV tray. 

Fig. 30 Reagent and transport liquid vial.


Do not use the 10-CV vials without being capped. 

The AS 3900 vial sensor will NOT detect uncapped vials! 

Only use the following seal in combination with the 10-CV vials: 

Chromacol: 20-ST101 

together with one of the following caps: 

Chromacol: 20-ACB (Blank aluminium cap 

20-MCB (Blank tinplate cap) 

AS 3900 uses two aspiration heights to aspirate liquid from the 10- 

CV vials. Therefore the vials need to be full, when AS 3900 is 

started. 

When a vial is not full the AS 3900 might aspirate air! 

Eppendorf micro centrifuge tubes 

Eppendorf micro centrifuge tubes may be used instead of the standard 

vials. 

To avoid cross-contamination prevent the air needle to make contact with 

the sample. 

Fig. 31 Eppendorf micro centrifuge tubes with support sleeve. 

When using Eppendorf micro centrifuge tubes in the AS 3900 do not 

leave open spaces on the tray. The vial detection system may not 

always detect a missing tube because of the shape of the tubes. 

Filling and sealing the vials 

The standard vials, as well as the conical vials, can best be filled by 

means of a narrow–end pipette to allow air to escape when filling the vial. 

Do not fill vials to the edge! In that case sample will be forced into the air 

needle, risking extra cross-contamination of samples and fouling of the 

needle pair. 

It is important that the seal is airtight, to maintain a pressure on the vial 

for air bubble prevention and to prevent evaporation of volatile samples. 

When using uncapped vials, the performance of the injections may 

not meet the specifications anymore (precision). 

Do not re-use a sample vial frequently without replacing its cap or 

septum. 

Check seal after crimping: if the cap can be turned easily, the seal is not 

airtight (re-adjust hand–crimper).


Loading the sample tray 

Place vial in the tray and link them to methods in the Series, See page 

43. 

To get access the tray can be rotated manually when AS 3900 is not 

running. 

Control I/O connections. 

The AS 3900 has standard three I/O connectors: 

• RS232 connector for serial communication using the Smartline 

protocol, see section I/O configuration on page 37. 

• Contact closures output connector (P1) 

• TTL input connector (P2) 

The manufacturer will not accept any liability for damages directly 

or indirectly caused by connecting this machine to instruments 

which do not meet relevant safety standard! 

Contact closure output connector (P1): 

Table 2: Connector P1: Contact closure outputs. 

Pin no: Description: 

1 Inject marker 1 Normally open 

2 Inject marker 1 Common 

3 Inject marker 1 Normally closed 

4 Auxiliary 1 Normally open 

5 Auxiliary 1 Common 

6 Auxiliary 1 Normally closed 




10 Alarm output Normally open 

11 Alarm output Common 

12 Alarm output Normally closed 




V MAX = 28 V DC / V AC , I MAX = 0.25 A 

An Inject marker output (1 and 2) will be generated when the injection 

valve switches from LOAD to INJECT. 

The Alarm Output will be activated whenever an error occurs, see 

appendix B for a description of the error codes of the AS 3900.. 

Fig. 32 Contact closure output 

TTL input connector (P2): 

This connector is an active high or active low TTL input, user definable in 

the System Settings. The Next Injection Input can be used when the AS 

3900 works in Remote Control. The Freeze Input and Stop Input can 

be used to control the AS 3900 by other devices.


Table 3: Connector P2: TTL inputs. 

Fig. 33 TTL Input 

Pin no: Description: 

1 Next Inject Input 

2 Signal Ground 

3 Freeze Input 

4 Stop Input 

5-9 Signal Ground 

Autosampler Autosampler 

Next Injection Input: 

This input will start the next injection sequence when the AS 3900 is 

started in Remote Control. After finishing the injection sequence the AS 

3900 will wait for the Next Injection Input. 

From the Ready screen a Next Injection Input will start the latest 

programmed Series. In this case the AS 3900 will not wait for the Next 

Injection Input before continuing with the next injection. The AS 3900 

will execute the complete Run as if it was started with the [Start/Stop] 

key. 

Freeze input: 

The AS 3900 will freeze the analysis time for the time this input is active. 

If the Freeze Input is activated while the analysis time is not running, the 

AS 3900 will perform all programmed pre-injection sample handling (mix 

method and sample loop). But the AS 3900 will wait with injecting the 

sample until the Freeze Input is no longer active. 

Stop Input: 

With this input the run of the AS 3900 is immediately aborted and return 

to the Ready screen. In case the AS 3900 is in Remote Control, the Run 

of the AS 3900 is immediately aborted but the AS 3900 remains in 

Remote Control and can not be re-started with a Next Injection Input, 

see also section Remote control on page 45.


Multi Link Connector 

The MultiLink connector is used to make the AS 3900 communicate with 

software packages like ChromGate ® and EuroChrom ® . 

S1 

ON DIP 

S2 

ON DIP 

OUT IN 

Fig. 34 MultiLink board 

Set the dipswitch S1 and S2 as follows to let the communication work 

probably: 

S1 1 2 3 4 

ON 

OFF 

S2 1 2 3 4 

Port Description 

S1: OUT to next device 

S2: IN to PC or previous device 

Connections for 9 pin connector: 

ON 

OFF 

pin 2 TD Transmitted data to the computer. 

pin 3 RD Received data from the computer. 

pin 5 SG 

Signal ground (Also indicated as GND in 

some devices)

30 Operation 

Operation 

Typographic convention 

KEYBOARD KEYS: 

Hard function 

keys: 

Soft function 

keys: 

Function keys are printed in the text between 

square brackets. 

[Start/Stop], [Hold/Cont.], [Priority], [Series], 

[Methods], [System], [Escape], [Menu], 

[Clear] and [Enter]. 

Soft function keys are printed in the text 

between pointed brackets. Example: 

, . 

DISPLAY: 

In the text a display is represented as follows: 

How to use the keyboard 

Fig. 35 Keyboard of the AS 3900. 

[MENU] 

READY (X.XX) OVEN:30°C 

TRAY:10°C 

 

The keyboard comprises 24 keys, which can be divided into three major 

groups: 

1. Numeric keys: 0 to 9, the [Clear] key (CL) to erase a value and 

the [Enter] key (E) to enter a value. 

2. Hard function keys: Three keys to start and control the AS 3900 

during the run; [Start/Stop], [Hold/Cont.], [Priority]. Four keys to 

program the AS 3900; [Series], [Methods], [Menu], [System]. 

And the [Escape] key to leave programming or to go to a previous 

level or return to the Ready screen (“Main” screen). 

3. Soft function keys: Keys, which have different functions, 

depending on the status of the AS 3900 as indicated on the lower 

display line.

Operation 31 

Hard function keys 

Direct functions 

Keyboard 

function 

Description 

[Start/Stop] Start and stop automatic processing. 

[Hold/Cont.] Hold or continue the countdown of the analysis 

time. The analysis time is extended with the time 

that Hold is active. 

[Priority] Interrupt a sample run to process an emergency 

sample prior to the next sample of the 

programmed sample Series. 

After the priority sample the sample run is 

continued. 

[Series] Enter the Series programming mode. In the 

Series, vials are linked to methods. 

[Methods] Enter the Methods programming mode. 

[Menu] The [Menu] key is only active when "[Menu]" 

appears in the right top corner of the display. In 

that case there are more than four soft function 

keys available. With the [Menu] key it is 

possible to toggle between the soft function 

keys. 

[System] Enter the System Settings programming mode. 

In the system settings the configuration of the 

AS 3900 is defined. 

[Escape] Return to the previous programming level when 

you are in programming mode, the programmed 

parameters are checked and stored in battery 

backup memory. 

[CL] Clear; Removes the actual value of the active 

programmable parameter. In some cases the 

value NONE will be displayed. 

[E] Enter; Store and check all values in a screen. If 

all values are valid the next programming screen 

will be displayed. 

0 - 9 Numeric keys; used to enter values for 

programming parameters. The values are stored 

when going to the next parameter with [Enter] 

or when leaving a programming mode with 

[Escape]. 

After power up, the AS 3900 will run an initiation routine in which it 

performs a self-test and everything is set to its default positions. 

After that the AS 3900 will return with the Ready screen: 

[Menu]: 

[MENU] 


TRAY:10°C 

 

[MENU] 

READY (X.XX) OVEN:--°C 

TRAY:--°C 

32 Operation 

In the Ready screen the AS 3900 will display at the bottom line the soft 

functions which can be used from this screen. With the [Menu] key it is 

possible to toggle between the screens. 

At the right-hand side of the screen one or two temperatures are shown, 

the oven temperature and the tray temperature, when this option is 

installed. 

Direct Control functions: 

 

Activates the manual wash of the AS 3900. All tubing, the needle and the 

syringe will be rinsed. 

 

The maintenance screens will provide three functions to control the 

needle arm, the syringe and the injection valve. 

 

This function is build-in to facilitate the replacement of the sample needle, 

air needle and valve. See also section Sample needle replacement on 

page 54, for detailed information. 

Press to move the needle arm horizontally above the inner 

sample ring. When the needle arm reaches the front position. It will return 

to its home position by pressing . 

 

This function facilitates the exchange of syringes and filling of the wash 

solvent tubing. See also section Syringe on page 55, for detailed 

information. 

Press to move the syringe to its end position, thereby 

aspirating wash solvent into the tubing and syringe. It stops from where it 

will return to its home position by pressing , thereby 

dispensing the wash solvent to waste. 

After changing a syringe all tubing can be rinsed using as 

described above. 

 

With this function the injection valve can be switched. 

Press to switch the valve from INJECT to LOAD. 

When the valve is in the LOAD position it can be switched back to 

INJECT by pressing . 

It is not possible to leave this function when the valve is in the LOAD 

position, first switch back by pressing and then press 

[Escape]. 

To leave the maintenance screen and return to the Ready screen press 

[Escape]. 

 

After pressing the AS 3900 enters the serial communication 

mode. From this mode the AS 3900 can be controlled from a personal 

computer using the RS232 interface and the Smartline application 

software. Refer to the Smartline manual for operating instructions. This 

manual is available on request as a separate document.

Operation 33 

SERIAL MODE 

 

After entering the serial mode only the following two soft function keys 

are available on the AS 3900 (the other keys are disabled): 

The AS 3900 will immediately stop the run 

and leave the serial communication mode 

and initialize. 

The AS 3900 will leave the serial 

communication mode and return to the 

Ready screen. The AS 3900 can be operated 

from the keyboard again. 

This soft-function key is NOT active when the 

AS 3900 is Running in the serial 

communication mode 

After pressing the soft function key, perform a wash 

routine to ensure that all tubing are rinsed. 

 

After pressing the AS 3900 enters the temperature control 

screen for the column thermostat and the sample tray cooling (optional). 

PROGRAMMING TEMPERATURE SETTINGS 

 

To program the column oven temperature press : 

PROGRAMMING OVEN SETTINGS 

OVEN: OFF SETPOINT: 20°C 

 

Turn the column oven on by pressing and program the new set 

point. After pressing [Enter] the new oven set point will be activated and 

the AS 3900 returns to the first temperature-programming screen. 

Although it is possible to program set points from 0°C to 60°C, the 

AS 3900 oven can only control the temperature at ambient 

temperature + 5°C and up. 

If the oven is set ON from the Ready screen (See page 33). The oven 

will be switched OFF if NO initial oven set point is programmed. 

If the oven is OFF and an initial set point is programmed, the oven 

will be activated. AS 3900 will wait before continuing with the Series 

until the initial set point ± 2 °C is reached. 

If the optional tray cooling is installed, it can be programmed after 

pressing : 

PROGRAMMING COOL SETTINGS 

COOLING: OFF SETPOINT: 04°C 

34 Operation 

Turn the tray cooling on by pressing and program the new set 

point. After pressing [Enter] the new tray cooling set point will be 

activated and the AS 3900 returns to the first temperature-programming 

screen. 

Temperature range tray cooling: 4°C - 15°C 

Maximum cool capacity: 20°C below ambient temperature 

After all values are programmed press [Escape] to return to the Ready 

screen. 

 

After pressing the AS 3900 offers three Utility soft functions: 

Copy a method. 

Erase a method. 

AS 3900 logbook, containing information on 

the number of switching of the injection valve 

and the syringe valve and on the number of 

movements of the syringe dispenser. 

 

The service mode of the AS 3900 can be entered after pressing 

and entering the service entry-code. This code is only 

known to authorized service personnel. 


After pressing [System] the AS 3900 enters the System Settings, where 

all system variables of the AS 3900 can be set. 

[Menu] 

SYSTEM SETTINGS [MENU] 

SELECT SETTINGS TO DEFINE 

 



TRAY:10°C 

 

The System Settings are divided in five sub-sections: to enter a subsection, 

press the corresponding soft function key. To step through a subsection 

press the [Enter] key. 

After all values are defined correctly within a sub-section, return the menu 

screen of the System Settings by pressing [Escape]. Return to the 

Ready screen by pressing [Escape] one more time. The values are 

stored in battery back up memory. 

The following sections show the programmable system settings, with their 

ranges.

Operation 35 

General System Settings 

Press : 

GENERAL 

SYSTEM 

SETTINGS 

Volume of 

installed 

loop: 

Volume of 

tubing 

needle -> 

valve: 

Syringe 

volume: 

Syringe 

speed: 

Skip missing 

vials: 

Range 

Comment 

0-5000 µl The volume of the installed loop. 

The AS 3900 uses this value for 

calculations of injection volumes. 

0-999 µl The volume of the tubing and needle 

connected to the injection valve. 

The AS 3900 uses this value for 

calculations of flush and transport 

volumes. 

The volume of the installed syringe. 

 

 

 

 

 

 

Air segment: 

 

Headspace 

pressure: 

 

 

The aspirating and dispensing 

speed are programmable in three 

steps: 

NORMAL for samples with a 

viscosity almost equal to the 

viscosity of water. 

LOW for samples with a higher 

viscosity and HIGH for samples with 

a lower viscosity compared to water. 

(See Table 4: Syringe speed.). 

Define if the AS 3900 has to stop if a 

vial is not found or continue with the 

next programmed vial. 

Program to stop the AS 3900 

in case a vial is not found. 

Inject a sample with or without an air 

segment between the sample and 

the wash solvent. If the air segment 

is ON (YES) the AS 3900 will draw 

an air segment of 5 µl before the 

flush volume prior to an injection. 

The air segment will not be injected 

in the analytical system. 

In case of µl pick-up the sample will 

be preceded by an air segment, 

which will be injected in the 

analytical system. (see page 18) 

The AS 3900 normally uses 

headspace pressure in combination 

with the syringe to transport sample 

in to the loop. If, for some reason, no 

headspace pressure is allowed, it 

can be switched OFF (NO). The 

compressor will always be used in 

the wash position of the AS 3900. 

The accuracy and reproducibility of 

the AS 3900 can decrease when NO 

headspace pressure is used.

36 Operation 

Table 4: Syringe speed. 

250 µl syringe 1000 µl syringe 

Syringe speed: Aspirate Dispense Aspirate Dispense 

LOW 0.31 ml/min 3.4 ml/min 1.25 ml/min 5.5 ml/min 

NORMAL 0.62 ml/min 3.4 ml/min 2.50 ml/min 5.5 ml/min 

HIGH 0.94 ml/min 3.4 ml/min 3.75 ml/min 5.5 ml/min 

Wash syringe 

speed: 

Method System Settings 

Press : 

METHOD 

SYSTEM 

SETTINGS 


vials: 

Tray Settings 

Press : 

TRAY 

SETTINGS 

Range 

3.4 ml/min 

 

 

Comment 

Range Comment 

13.7 ml/min 

Determine if calibration vials 

can be used in Series. 

Tray type: Standard tray with 84 vials, 1.5 

ml and 3 vials of 10 ml for 

special use. 

Vials 85-87, will be used for 

transport solvent for the µl pickup 

injections. 

When the use of mix item is 

enabled in the System Setting 

the three 10 ml vials will be used 

as follows: 

vial 85: 

vial 86: 

vial 87: 

transport solvent 

Reagent A 

Reagent B 

Tray type: Tray with 96 vials of 1.5 ml. 

Tray type: Tray with 24 vials of 10 ml. 

Vial type: 

Standard vials are used. 

(only when Only 2.5 ml vials are used. 

or 

(Chromacol 2.5-CV, 12 X 40 

is 

selected) 

mm) 

Only with the standard tray it is possible to perform a mix 

and to use the µl pick-up injection mode. 

With the other two trays both, the mix and the µl pick-up injection 

mode will automatically be disabled. 

If 2.5 ml vials are used be sure to fill the vials completely before 

starting a RUN. AS 3900.

Operation 37 

I/O configuration 

Press : 

I/O CONFI- 

GURATION 

Injection 

marker pulse 

length: 

Input edge 

next injection: 

Freeze input 

active: 

Reset outputs 

after last 

Series: 

Range Comment See also section Vial 

dimensions on page 24. 

0.0 - 2.0 sec. Define the length of the inject 

marker pulse. Normally 1.0 sec. 

 

 

 

 

 

 

Define the edge sensitivity of 

the next injection input. 

Define the level to activate the 

freeze function. 

Define if the outputs should be 

reset to the default settings after 

finishing the last Series. 

If the freeze input is set HIGH, the time base will freeze if the input is 

not connected to another device. 

Consequently: the AS 3900 will not start! 

Serial Communication 

Press : 

SERIAL 

COMMUNICATION 

Range Comment 

Device identifier: 60-69 Device identifier used by the 

Smartline protocol 

Prep Mode System Settings 

Press : 

PREP SYSTEM 

SETTINGS 

Use Prep Mode: 

 

Range Comment 

Define if the AS 3900 is a 

standard autosampler, or a Prep 

mode autosampler. 

When choosing for the Prep Mode, some System Settings are no 

longer programmable, but set to a fixed value. See also appendix E. 

In the Prep Mode the mix, the full loop and µl pick-up injection 

mode, will automatically be disabled. 

In the Prep Mode not all of the System Settings are programmable, see 

table below for an overview. 

Table 5: Fixed System Settings in Prep Mode. 

General System Settings 

Volume of the installed loop 10000 µl 

Syringe volume 2500 µl 

Air segment 

Method System Settings 

 

Use of calibration vials 

Tray System settings 

 

Tray type

38 Operation 

For information how to install the Prep option to a standard AS 3900 see 

appendix E. 

Injection volumes Prep AS 

Ensure that the programmed injection volume does not exceed the 

50% of the loop volume, otherwise the reproducibility and accuracy 

of the injection can not be guaranteed. 


The AS 3900 offers nine programmable methods. 

Depending on your needs a method may comprise: 

• Injection program Containing information on the type of the 

injection with the flush volume, injection 

volume, number of injections per vial and 

the analysis time. 

• Wash program Containing information on the wash of the 

AS 3900. 

• Mix program Containing information on the sample 

handling of the sample prior to the injection. 

• Timed events program Containing information on the auxiliaries and 

the temperature of the column oven during 

the analysis of the sample. 

A method is any combination of the above and is saved as combination 

under its method number. 

To enter the method programming mode press [Method]. 

After entering the method number the AS 3900 will return with the main 

screen of method programming: 

PROGRAMMING METHOD NUMBER: 1 (I W M T) 

SELECT SECTION TO PROGRAM 

 

From this screen the different sections can be programmed after pressing 

the corresponding soft function key. 

Existing programs in this method are displayed between brackets on the 

first line; I for the injection program, W for the wash program, M for the 

mix program and T for the timed events program. 

After programming the method press [Escape] to leave the method 

programming. 

The methods are stored in battery backup memory. 

Injection program 

After pressing the AS 3900 returns with the main screen 

of injection programming. 

METHOD NUMBER: 1 SECTION: INJECTION 

INJECTION MODE: PARTIAL LOOPFILL 

Operation 39 

Select the mode of injection to be used or select if no injection 

is required in this method, see chapter Injection Principle for an 

explanation of the different injection principles. 

Full loop injection mode, See page 15 

Partial loop fill injection mode, See page 16 

µl Pick-up injection mode, See page 18 

No injection program in this method. 

Depending on the injection mode selected the AS 3900 will ask for a 

Series of parameters: 

Parameter: Range: 

Flush 

volume: 

Number of 

injections 

per vial: 

Injection 

volume: 

Analysis 

time: 

0-9999 µl The amount of sample used to fill the 

needle plus tubing connection to the 

injection valve (not the loop-fill 

volume). Only for full loop and partial 

loop fill injections. 

1-9 Number of injections taken from the 

same vial. 

0-2500 µl Only for partial loop fill and µl pick-up 

injections 

Max. 9:59:59 Analysis time starting at the moment 

of switching the injection valve from 

LOAD to INJECT. 

Flush volumes smaller than twice the volume of the needle plus 

tubing between needle and injection valve may result in a decrease 

of performance! 

The maximum programmable injection volumes are: 

Full loop: Not programmable, is equal to the loop volume 

but needs more sample to fill the loop completely: 

3 x loop volume for loops 500 µl 

Partial loop 

fill: 

50% of the programmed loop volumes. 

µl pick-up: Max. injection volume = 1⁄2 x loop volume - 11⁄2 x 

needle tubing 

After all parameters are programmed, return to the main screen of 

method programming by pressing [Escape]. 

Wash program 

After pressing the AS 3900 returns with the main screen of 

wash program. 

METHOD NUMBER: 1 SECTION: WASH 

WASH BETWEEN: INJECTION 

40 Operation 

A wash comprises two parameters: 

Parameter: Range: 

Wash 

between: 

Number of 

syringe 

volumes: 

Wash the needle and tubing directly 

after every injection. 


after every vial. 


after every Series. 

Remove the wash item from the 

method. 

0-9 Wash volume in number of syringe 

volumes. 

If the wash program is the only program used in a method, program 

a wash between Series, otherwise the Series with this method will not 

be executed! 



Timed events program 

After pressing the AS 3900 will ask if the timed events 

program must be used in this method if is pressed AS 3900 

returns with the first screen of timed events programming. 

If is pressed the timed events program is not used in this 

method and the AS 3900 returns to the previous screen. The content 

of the timed events program is NOT removed and will be available if 

the next time is pressed. 

METHOD NUMBER: 1 SECTION: TIMED EVENTS 

1. AUX-1 ON AT TIME: 0:00:00 

 

The timed events program is a list of 20 programmable events to control 

other devices via the two auxiliaries (contact closures) or to activate a 

new oven set point. Each event can be programmed on a time base, 

which starts at the moment of injection. 

Press [Clear] to remove the programmed time, the display will show the 

value: NONE. 

A complete list is shown in Table 6, to step through the list use the 

[ENTER] key or one of the soft function keys to step direct to the first line 

of an other section.

Operation 41 

Table 6: Timed events programming lines as they appear on screen. 

1. AUX-1 ON AT TIME: 0:00:00 

1. AUX-1 OFF AT TIME: 0:00:00 

2. AUX-1 ON AT TIME: 0:00:00 


3. AUX-1 ON AT TIME: 0:00:00 


4. AUX-1 ON AT TIME: 0:00:00 


1. AUX-2 ON AT TIME: 0:00:00 


2. AUX-2 ON AT TIME: 0:00:00 


3. AUX-2 ON AT TIME: 0:00:00 


4. AUX-2 ON AT TIME: 0:00:00 


INITIAL OVEN SETPOINT: 00°C 

1. OVEN SETPOINT: 00°C AT TIME: 0:00:00 


END OF TIMED EVENTS AT: 0:00:00 

Although it is possible to program set points from 0°C to 60°C, the 

AS 3900 oven can only control the temperature at ambient 

temperature + 5°C and up. 

If the oven is set ON from the Ready screen (See page 33). The oven 

will be switched OFF if NO initial oven set point is programmed. 

If the oven is OFF and an initial set point is programmed, the oven 

will be activated. AS 3900 will wait before continuing with the Series 

until the initial set point ± 2 °C is reached. 

After the Series the oven will be turned OFF again if the end of the 

last Series is encountered or the next Series does not contain an 

initial set point 

If NO initial set point is programmed the lines with additional set 

point changes will not be displayed. 

If the END time exceeds the programmed analysis time, this END 

time overrules the analysis time. 

The next injection will be started as soon as the timed events 

program has finished! 

It is possible to program events after the END time, but these events 

are not executed during the RUN. 


method programming by pressing [Escape].

42 Operation 

Mix program 

After pressing the AS 3900 will ask if the mix program must be 

used in this method if is pressed AS 3900 returns with the first 

screen of the mix programming. 

If is pressed the mix program is not used in this method and 

the AS 3900 returns to the previous screen. The content of the mix 

program is NOT removed and will be available if the next time 

is pressed. 

METHOD NUMBER: 1 SECTION: MIX LINE:01 

END OF MIX 

 

The mix method can contain a maximum of 15 programmable lines 

(including the END OF MIX). 

To scroll through the program steps use the and soft 

function keys. 

Press to delete the displayed step. 

Press [Enter] to edit the displayed step. 

Press to insert a step before the displayed step. 

METHOD NUMBER: 1 SECTION: MIX STEP:01 

SELECT ACTION: 

 

Three action types can be programmed , and 

: xxx µl from 

 

 

 

to 

 

Aspirate a programmed amount of xxx µl (max. = the syringe volume) 

from the sample vial, , a reagent vial, or 

or from the wash solvent bottle, , and dispense it 

into the sample vial, , or the destination vial, 

. 

To prevent cross contamination the AS 3900 will aspirate an 

additional volume of 25% of the programmed volume to flush the 

tubing and needle. 

The aspirate and dispense speed depends on the selected syringe 

and syringe speeds; programmed in the System Settings, See page 

34. 

If the mix is programmed the reagents and transport solvent are 

positioned on the following places on the tray: 

Transport solvent: vial 85 

Reagent A: vial 86 

Reagent B: vial 87

Operation 43 

Example: If the mix is programmed the reagents and transport solvent are 

positioned on the following places on the tray: 

ADD 200 µl from Reagent A to Destination. 

This will result in the following actions: 

Aspirate an air segment of 5 µl, to separate the wash solvent in the buffer 

tubing from Reagent A. 

Aspirate 50 µl Reagent A; to flush the tubing and needle. 

Unload the syringe to the syringe-waste position. 

Aspirate 200 µl Reagent A and dispense it to the destination vial. 

Rinse buffer tubing and needle with wash solvent. 

: x times with xxx µl 

Program a mix step: aspirate and dispense a number (x) of times a 

programmed amount (xxx µl) from the destination vial. If no destination 

vial is used the mix is performed in the sample vial. 

Example: MIX 3 times with 250 µl. 

This will result in the following actions: 

Aspirate an air segment of 50 µl, to separate the wash solvent in the 

buffer tubing from solvent to be mixed. 

Unload the syringe to the syringe-waste position. 

Aspirate 250 µl the solvent and dispense it back into the vial. 

Repeat the last action two times. 

Rinse buffer tubing and needle with wash solvent. 

: x:xx:xx 

Wait a programmed period of time before continuing with the next step 

(reaction time). 



Programming the Run sequence; Series 

In a Series or Run sequence, methods are linked to vials. 

To enter Series programming press [Series]. 

PROGRAMMING SERIES 

SERIES NUMBER: 1 

Key in a number (1-9) and press [Enter]. 

The first parameter of a Series is a method number. Depending on the 

contents of this method and the System Settings the AS 3900 will return 

with a number of questions. Press [Enter] to step through the questions. 

Each time a value has to be entered key in a number (1-9) or press 

[Clear] or 0 to select NONE and press [Enter] to go to the next screen. 

• Method number: 1-9 or NONE 

The value can be used for empty Series, when 

programmed; the Series will be skipped during the Run of the AS 

3900. This is an easy way to remove a Series or leave the possibility 

to add Series during the Run, See page 47.

44 Operation 

Should a method consist of only the wash and/or a timed events 

program, no more questions will be asked. 

When the use of calibration vials is enabled in the System Settings (See 

page 34) and the method does not contain a mix, the AS 3900 will ask 

the following questions: 

Use calibration vials (see Fig. 36) 

: • First calibration vial: 

• Last calibration vial: 

• No of samples between calibrations 

The range of sample vials is: 

• Last sample vial 


When the method contains a mix item in which destination vials are used, 

the AS 3900 will ask for the first position of the destination vials. The last 

destination vial is calculated based on the sample vial range: 

• First destination vial: 

Fig. 36: Run sequence with 3 calibration vials between every 5 vials (First 

calibration vial: 1, last calibration vial: 3 and number of samples between 

calibrations: 5). 

Sample vials and destination vials must be placed sequentially. 

Sample vial and destination vial ranges must not overlap. 

After all parameters are programmed return to the Series programming 

screen by pressing [Escape], where an other Series can be 

programmed. If all Series are programmed, return to the Ready screen 

by pressing [Escape]. 

Series are not stored in battery backup memory. 

After switching ON the Series are empty (method: ).

Operation 45 

Running 

Start and Stop 

To start a Run of the AS 3900 press [Start/Stop] at the Ready screen. 

The AS 3900 will ask for the Series number to start with and the last 

Series number. 

Enter each number and press [Enter] to step to the next screen. 

EXECUTE SERIES 1 

 

AS 3900 can be started directly by pressing or in Remote 

Control by pressing , See page 45. 

If a Mix or µl Pick-up injection method is used in any Series be sure 

the transport liquid vials and/or reagent vials are filled completely. 

If not the AS 3900 might aspirate air into the loop (See also page 25). 

To return to the Ready screen without starting the AS 3900, press 

[Escape]. 

During the Run the AS 3900 shows the following information: 

STATUS: RUNNING TIME: 0:00:00 

SERIES:01 SAMPLE:01 INJ: 1/1 OVEN:--°C 

METHOD:01 TRAY:--°C 

AUX: 12 

The first line shows the status and the elapsed analysis time. 

The second line shows the Series number, the sample vial number, the 

current injection number, the total number of injections and the actual 

oven temperature; “- -“ indicates the oven is OFF. 

The third line shows the method number of the current used method, this 

will also be the method used when a priority sample is programmed, See 

page 46. When the tray cooling is installed the actual tray cooling 

temperature is displayed; “- -“ indicates the tray cooling is OFF. 

The fourth line shows information on the auxiliaries, when timed events 

are programmed in a method. When the number is displayed behind 

“AUX:” this indicates that the auxiliary is active. 

Series are always executed in numerical order! 

Empty Series will be skipped! 

Pressing [Start/Stop] can stop the Run. The AS 3900 will execute a 

shutdown sequence by removing the entire sample from the buffer tubing 

and performing a standard wash routine. 

Remote control 

After programming the range of Series to be run, as described in the 

previous section press to start the AS 3900 in Remote 

Control mode, 

The AS 3900 will now operate as slave of another device and can be 

controlled with the Next Injection Input.

46 Operation 

With the Next Injection Input AS 3900 will start the next injection in the 

Series. If the Series was completed, it starts the next injection from the 

next Series, until all Series have been completed. 

During the Run, AS 3900 shows the following information: 




r AUX: 12 

A blinking “r” in the lower left corner of the Run screen, indicates the AS 

3900 is running in Remote Control mode. 

After completion of all Series the AS 3900 will display the following 

screen: 

SERIES COMPLETED VIA REMOTE CONTROL 

To return to the Ready screen press [Escape]. From the Ready screen 

the AS 3900 can be re-started by pressing the [Start/Stop] key. 

As long as the previous screen is displayed, it is not possible to restart 

the AS 3900 with a Next Injection Input. 

Priority sample 

For an emergency sample, AS 3900 offers the possibility to analyze it 

immediately without stopping the current Run. 

Press [Priority], to enter the priority-programming mode. 

Enter the position of the priority sample. 

PROGRAMMING PRIORITY 

PRIORITY SAMPLE: 12 

Return to the Run screen by pressing [Escape], the priority sample will 

be processed after the current sample has finished, with the method, 

which is running at the moment of entering the vial number. 

To indicate the priority sample has been activated, a blinking “p” is 

displayed in the Run screen. 




p AUX: 12 

As long as the “p” is blinking it is possible to change or remove the 

priority sample. 

The priority mode is only available during the execution of a Series 

with a method, which does NOT contain a Mix.


Maintenance 

If calibration vials are used in the current Series, the priority sample 

is included in the calibration interval! 

Programming during Run 

During Run of the AS 3900 it is possible to program Series and Methods: 

Press [Series] or [Methods]. 

The programming possibilities are the same as described in sections 

Method programming and Programming the Run sequence; Series. 

If a Series or Method is changed, the new values are active for 

Series after the current Series. 

The current Series is NOT affected by changes. 

It is not possible to add Series to the Run, but you can program empty 

Series between the first and last Series in a Run. As long as the empty 

Series have not been executed, they can be (re-) programmed. In this 

way Series with vials can be added later to the Run. 

Injection valve 

AS 3900 is equipped with a Valco or Rheodyne valve with quick connect 

mounting, or with the biocompatible valve with quick connect mounting. 

The next section describes how to exchange the valve assembly and 

contains the Valco Technical Note 810: “Cheminert ® Module C2 Cleaning 

and Rotor Replacement”, the Rheodyne “Operating Instructions for Model 

7739 Valve” and “Operating Instructions for Model 9740 Valve”. 

Replacing the injection valve 

The AS 3900 is equipped with quick connect mounting to simplify the 

exchange of valves. 

To remove the valve proceed as follows (see Fig. 37): 

A 

Fig. 37: Valve removal procedure 

A 

• Disconnect all tubing from the valve. Only the loop can stay in 

place. 

• Place the needle arm in the front position, press 

, see section Direct functions on 

page 31. 

• Push the pushers A backward to release the valve.

48 Maintenance 

• Pull the valve out of the instrument while turning the valve counterclockwise. 

Fig. 38: Re-inserting the valve 

To re-insert the valve proceed as follows (see Fig. 38): 

• Hold the valve for the mounting with the port 1 position facing to 

the top. 

• Push the valve into the mounting and turn the valve clockwise till it 

clicks in the fitting. 

• Re-connect all tubing to the valve facing to the top. 

• Insure that the valve is in the INJECT position. Switching the 

AS 3900 OFF and ON can do this, all Series will be reset. 

• Perform a standard wash. 

Valco Cheminert ® Module C2 Valve 

Cleaning and Rotor Replacement 

(Technical Note 810, Valco Instrument Co. Inc.) 

Cleaning a valve can often be accomplished by flushing all lines with 

appropriate solvents. 

Do not disassemble the valve unless system malfunction is 

definitely isolated to the valve 

Disassembly 

See Fig. 39, exploded view. 

DRIVER 

Fig. 39: Exploded view of the valve. 

ROTOR 

CAP


• Use a 9/16 hex driver to remove the socket head screws, which 

secure the cap on the valve. 

• To insure that the sealing surface of the cap is not damaged, rest it 

on the outer face. Or, if the tubing is still connected, leave it 

suspended by the tubing. 

• With your fingers or small tool, gently pry the rotor away from the 

driver. 

• Examine the rotor sealing surface for scratches. If scratches are 

visible to the naked eye, the rotor must be replaced. If no scratches 

are visible, clean all the parts thoroughly with an appropriate 

solvent, taking care that no surfaces get scratched. (The most 

common problem in HPLC is the formation of buffer crystals, which 

are usually water-soluble) It is not necessary to dry the rotor. 

Reassembly 

• Replace the rotor in the driver, making sure that the rotor sealing 

surface with its engraved flow passages is facing out. The pattern 

is asymmetrical to prevent improper placement. 

• Replace the cap. Insert the two socket head screws and tighten 

them gently until both are snug. Do not over-tighten them - the 

screws simply hold the assembly together and do not affect sealing 

force, which is automatically set as the screws close the cap 

against the valve body. 

• Test the valve by pressurizing the system. If it doesn’t hold 

pressure, the valve should be returned to Valco for repair. 

Operating Instructions for Rheodyne Model 7739 Valve 

Copy of Rheodyne Operating Instructions paper. 

Description 

Model 7739 is a two-position, six port stainless steel valve. Fig. 40 shows 

the flow diagram of the valve. The six small circles represent the ports in 

the valve stator. The slots are the connecting passages in the rotor seal. 

Rotation of the valve 60° switches the valve from one position to another. 

Fig. 40: Flow diagram of Model 7739 as viewed from stator Specifications 

Specifications 

• Maximum temperature is 100°C. 

• The valve is set to hold 345 bar (5000 psi). 

• The wetted surfaces are stainless steel and an inert polymer. 

Maintenance 

With normal use the valve will give many tens of thousands of cycles 

without trouble. The main cause of early failure, which is seen as a leak 

in the valve, is abrasive particles in the sample and/or mobile phase, 

which can scratch the rotor seal.


Following is the procedure for changing the rotor seal and isolation seal. 

Refer to Fig. 41 and proceed: 

Shaft Assembly 

Body 

Rotor Pins 

Isolation Seal 

Rotor Seal 

Stator Ring 

Stator 

Location Pin 

Stator 

Stator Screws 

Fig. 41: Exploded view of Model 7739 

• Remove the three stator screws with the 9/16” hex key. 

• Remove the stator and stator ring from the valve body. 

• Pull the rotor seal off the pins. 

• Remove the isolation seal. 

• Mount the new isolation seal with the spring side facing away from 

the rotor seal. 

• Mount the new rotor seal. The three pins on the shaft assembly fit 

into the mating holes in the rotor seal only one way. Mount the seal 

with the grooves facing the stator. 

• Replace the stator ring so that the body locating pin in the stator 

ring enters the mating hole in the body. 

• Mount the stator on the valve so the stator locating pin in the stator 

ring enters the mating hole in the stator. 

• Replace the three stator screws. Tighten each an equal amount 

until the screws are tight. 

Operating Instructions for Rheodyne Model 9740 Valve 

Copy of Rheodyne Operating Instructions paper. 

Description 

Model 9740 is a two-position, six port PEEK valve. Fig. 42 shows the flow 

diagram of the valve. The six small circles represent the ports in the valve


stator. The slots are the connecting passages in the rotor seal. Rotation 

of the valve 60°switches the valve from one position to another. 

Fig. 42: Flow diagram of model 9740 as viewed from stator 

Specifications 

• Maximum temperature is 50°C. 

• The valve is set to hold 345 bar (5000 psi). 

• The wetted surfaces are PEEK alumina ceramic, and an inert 

polymer. 

Important Safety Notices Caution: 

Use only plastic ferrules in the stator ports. Metal ferrules can cause 

irreparable damage to the plastic stator. 

Maintenance 

With normal use the valve will give many tens of thousands of cycles 

without trouble. The main cause of early failure, which is seen as a leak 

in the valve, is abrasive particles in the sample and/or mobile phase, 

which can scratch the rotor seal. 

Following is the procedure for changing the rotor seal, stator face 

assembly, and isolation seal. Refer to Fig. 43 and proceed: 

• Remove the three stator screws with a 9/64 inch hex key. 

• Remove the stator, stator face assembly and stator ring from the 

valve body. 

• Pull the rotor seal off the pins. 

• Remove the isolation seal. 

• Mount the new isolation seal with the spring side facing away from 

the rotor seal. 

• Mount the new rotor seal. The three pins on the shaft assembly fit 

into the mating holes in the rotor seal only one way. Mount the seal 

with the grooves facing the stator. 

• Replace the stator ring so that the body locating pin in the stator 

ring enters the mating hole in the body. 

• Put the new stator face assembly on the stator. The three pins on 

the assembly fit the mating holes in the stator only one way. 

• Mount the stator and stator face assembly on the valve so the 

stator locating pin in the stator ring enters the mating hole in the 

stator. 

• Replace the three stator screws. Tighten each an equal amount 

until the screws are tight.


Body 



Rotor Seal 

Body Location Pin 

Stator Ring 

Stator Location Pin 

Stator Face 

Assembly 

Stator 

Stator Support 

Ring 

Stator Screws (3) 

Fig. 43: Exploded view of Model 9740. 

Needle and tubing 

Two sizes of syringes are available for the dispenser: 

250 and 1000 µl 

The 250 µl syringe is the standard syringe; combined with the standard 

500 µl buffer and the standard 100 µl sample loop, the following injection 

volume range is available for the various injection modes: 

• Full loop: 100 µl 

• Partial loop fill: 1 - 50 µl 

• µl pick-up: 1 - 27 µl 

The maximum injection volumes are calculated with the following 

formulas: 

• Full loop: injection volume = loop volume 

• Partial loop fill: max. inj. volume = 1⁄2 x of loop volume 

• µl pick- up: max. inj. volume = 1⁄2 x loop volume - 

11⁄2 × needle volume 

Full loop gives maximum possible reproducibility, but not maximum 

accuracy, since loop volume is specified with an accuracy of ± 10%. 

Minimum sample loss = 230 µl (2 x loop overfill + flush volume for 

needle). 

Partial loop fill gives maximum accuracy (dependent on syringe 

accuracy) plus reproducibility better than 0.5% RSD for injection volumes 

> 10 µl 

Minimum sample loss (Flush volume) = 30 µl 

30 µl is the recommended minimum flush volume, smaller flush volumes 

can be programmed, but will result in decreasing performance. 

µl Pick-up offers zero sample loss, maximum accuracy (same as partial 

loop fill), but slightly less reproducibility: RSD better than 1% for injection 

volumes > 10 µl.


5 µl of AIR is injected together with the sample, in case an air segment is 

selected in the System Settings. 

Sometimes other combinations of syringe, loop and/or buffer are 

advised: 

Injection volumes smaller than 5 µl: 

Partial loop fill: 

Preferably install a 20 µl sample loop to avoid loss of accuracy due to 

expansion of the loop content when switching from inject to load position 

prior to sample loading. Especially when working with high pressure (200 

bar), this loss may be in the order of 0.1 - 0.5 µl for a 100 µl loop. 

Note that the minimum sample loss in partial loop fill mode is 30 µl 

(recommended minimum flush volume) for the first injection and an 

additional 15 (always half the programmed flush volume) for additional 

injections from the same vial. If a wash between injections has been 

programmed, sample loss is 30 µl for every injection. For zero sample 

loss injections, use the µl-pick injection mode. 

µl Pick-up: 

Do not install a smaller sample loop! 

The sample plug is transported into the loop, preceded by a 

programmable air segment of 5 µl, with a plug of transport liquid, which 

equals 2.5 times the programmed needle tubing volume. The 20 µl loop is 

too small to guarantee quantitative injection. 

Injection volumes up to twice the standard: 

With the standard 250 µl syringe, standard needle with tubing (15 µl) and 

standard 500 µl buffer, but with a 200 µl sample loop, the maximum 

injection volumes are: 

Full loop: 200 µl Sample loss remains 230 µl since 

loops > 100 µl need only one loop 

volume overfill 

Partial loop fill: 100 µl 

µl Pick-up: 77 µl 

Smaller volumes than 10 µl may be injected, but reproducibility and 

accuracy may not be < 0.5% for partial loop fill or < 1% for µl pickup! 

For volumes larger than 200 µl: 

Install the 2000 µl buffer; install the appropriate sample loop size and the 

appropriate syringe: Syringe volume > 2 x injection volume. Injection 

volumes larger than 500 µl are possible, but the sample may contaminate 

the syringe. Program sufficient wash after use! 

Buffer tubing: 

Table 7: Syringe and buffer tubing. 

Syringe Buffer tubing 

250 µl 500 µl buffer tubing 

1000 µl 2000 µl buffer tubing


Sample needle 

1 Ferrule 9 Needle holder 

2 Nut 10 Air needle 

3 Tefzel tubing 11 Vial sensor 

4 Needle connection nut 12 Needle penetration depth 

5 Ferrule (PTFE) 

adjustment screw 

6 Conical ring 

13 Air tubing to provide 

7 Sample needle 

headspace pressure 

8 Silicon air seal 

Fig. 44: Sample needle 

Sample needle replacement 

To replace the sample needle proceed as follows (see Fig. 44): 

• Open keyboard cover. 

• Place the sample needle in the front position, press 

, . 

• Loosen needle connection nut (4) that fixates the sample needle 

(7). 

• Loosen the nut (1) that connects the PTFE tubing (3) to the 

injection valve. 

• Remove sample needle by pulling it out of its fitting with the PTFE 

tubing that usually sticks to the needle. 

• Put in a new needle assembly, watch the air seal (6) is around the 

needle. 

• Tighten the needle assembly with needle connection nut (4), 

• Connect loose end of needle connection tubing to port 4 of 

injection valve. 

Do not tighten excessively; it may block the tubing! 

• Place the sample needle back in the home position and leave the 

maintenance mode, press and [Escape].


Syringe 

• Check the needle penetration depth, see below and adjust if 

necessary. 

• Perform a wash routine to clean the new needle by pressing 

 

Air needle replacement 

To replace the air needle proceed as follows (see Fig. 44): 

• Remove sample needle as described. 

• Remove air needle (10) and install new air needle. 

• Reinstall sample needle as described. 

Sample needle penetration depth 

To keep rest volume small, the sample needle should stop close to the 

bottom of the sample vial. If the needle penetration depth needs 

adjustment, proceed as follows (see Fig. 45): 

• Open keyboard cover. 

• Place an uncapped sample vial in position 2 of the tray. 

• Lower the sample needle in the vial, therefore: 

Program a method with a full loop injection and an analysis time of 

at least 10 seconds. 

Program a Series with the programmed method and vial 2 as first 

and last vial. 

Start the Series. 

As soon as the sample needle has entered the vial, switch of the 

power supply. 

• Loosen adjustment screw one turn (counter clockwise). 

• Use the needle connection nut (4) as a grip, adjust needle 

penetration depth. 

Needle should stop not less than 1 mm above the bottom of a 

standard vial and not less than 2 mm above the bottom of a conical 

vial. 

• Fasten adjustment screw (clockwise). 

• Re-apply the power, the AS 3900 will initialize and is ready for use. 

The AS 3900 is factory equipped with a 250 µl syringe, but can also be 

equipped with a 1000 µl syringe. 

To install another syringe proceed as follows: 

Do not disconnect the power supply of the AS 3900, it is needed to 

move the syringe!


Fig. 46: Changing the syringe 

• Press to get access to the maintenance 

function for moving the syringe 

• Move the syringe to the end position by pressing 

. 

• Unscrew the syringe from syringe valve; be sure that the Luer 

connector in the valve remains in place. 

• Disconnect the plunger from the syringe drive. 

• Fill the new syringe with wash solvent, be sure most air bubbles 

are removed from the syringe. 

• Connect the plunger of the filled syringe to the syringe drive and 

connect the syringe with the Luer connector at the syringe valve. 

• Screw the syringe firmly into the Luer connector. 

• Remove the air from the syringe by pressing . The 

syringe will move to its HOME position and dispense its contents to 

the syringe waste. 

• If some air remains in the syringe press again. The 

syringe is filled with wash solvent. 

Press to dispense the wash solvent to waste. If 

there is still air in the syringe, repeat the previous action and tick 

softly against the syringe as the wash solvent is dispensed to the 

syringe waste. 

• Leave the maintenance screen by pressing [Escape] and press 

to perform a standard wash routine. All tubing connected 

to the syringe valve will be refilled and flushed. 

The AS 3900 is now ready for use


Troubleshooting 

Start up problems 

Start up 

problems 

The instrument 

would not operate 

after turning the 

power on 

The instrument is 

working, but diplay 

doesn't work 

No response from 

keyboard but 

display works 

Error code is 

indicated on the 

display 

Fig. 47: Start up problems 

Power cord 

unplugged or 

faulty 

No 

Yes 

Plugin/ replace 

power cord 

Blown fuse Yes Replace fuse 

No 

Defective 

electronics 

Diplay 

component(s) 

failure 

Keyboard 

component(s) 

failure 

Yes 

Call your 

service 

representative 

Call your 

service 


Call your 

service 


Check Appendix B, 

to locate error 

message

58 Troubleshooting 

Analytical problems 

Syringe Valve 

Syringe 

In cases of analytical problems the best thing to start with is to determine, 

if the cause for the problem is in the autosampler, or in the rest of the 

system. 

Quick check! 

Replace the valve by a manual injection valve to discriminate between 

valve problems and other problems. 

Perform some manual Full loop injections. If the results are fine the fault 

has to be found in the autosampler, if not the HPLC system should be 

checked. 

Fig. 48: Troubleshooting: AS 3900 flow path. 

Buffer Tubing 

Injection Valve 

Needle arm 

Air Needle 

Injection Needle 

In the diagrams on the next pages (Fig. 49 and Fig. 50) it is assumed that 

the unit is working without Errors. 

Please keep in mind that analytical also might be caused by external 

influences, like temperature and or light sensitive samples. For this 

reason it is important to be sure the application was running without 

problems before and nothing is changed.


Fig. 49: 

No injection 

NO 

INJECTION 

Leakage inside 


Disconnect the needle tubing 

and the buffer tubing. 

Blockage 

in Flow 

Path 

Connect port 1 to an HPLC pump 

Block port 6. 

Start the pump at a low flow 

Start 

manual 

wash 

Disconnect 

Buffer tubing 

from valve 

Start 

manual 

wash 

Disconnect 

Buffer tubing 

from Syringe 

valve 

Start 

manual 

wash 

Disconnect 

needle from 

Valve 

Solvent 

flowing out of 

inj. port 

No 

Solvent 

out of open 

end 

No 

Solvent 

out of syringe 

valve 

Check for over tightened 

connections in the entire 

Flow Path & 

Check the syringe valve 

Observe 

ports 3 and 4 

for leakage 

No 

No 

Recheck with manual valve 

Yes 

Yes 

Yes 

Yes 

Check 

needle 

Check rotor 

seal 

Check 

buffer 

tubing 

Check rotor 

seal


Fig. 50: 

Bad reproducibility 

BAD 

REPRODUCIBILITY 

Air in Flow Path Start manual wash 

Air in Syringe 

Leaking Syringe 


Valve 

Rotor seal worn out 

Dead volumes in 

tubing connections 

Remove Syringe and fill 

manually with wash solvent 

Replace plunger tip or 

Syringe 

Replace Valve 

Replace seal 

Check Stator 

Redo connections with new 

Ferrules and nuts

APPENDIX A: List of Accessories 61 

APPENDIX A: List of Accessories 

Article no. Description 

0830.834 Large capacity tray option, 96 position for 1.5 ml vials 

(12 mm OD) 

0830.835 Large volume tray option, 24 position for 10 ml vials (22 

mm OD), 

with 1 ml syringe and LSV needle 

0830.836 Prep option (field installable), including software, large 

capacity tray, 2.5 ml syringe and large bore Valco 

injection valve with 10 ml sample loop 

0830.766 Smartline AS 3900 PC control, including CD-ROM, 

hardware protection key and PC serial interface cable. 

0700.010 Flanged-tube fitting 1/8” (pck/5) 

0700.011 Flanged-tube fitting 1/16” (pck/5) 

0830.718 Air needle (incl. seal) 

0830.303 Sample needle 

0830.304 Serum sample needle 

0830.318 Silc/steel sample needle 

0830.711 Air needle for serum needle 

0900.710 Buffer tubing 500 µl 

0900.711 Buffer tubing 2000 µl 

0900.712 Syringe waste tubing 

0900.713 Syringe wash tubing 

0830.811 Inject marker cable 

0830.733 Valco injection valve, stainless steel version, 

C2-2006 SPHMI, incl. bayonet pins. 

0830.734 Valco injection valve, PEEK version, 

C2-2346 SPHMI, incl. bayonet pins. 

3796.043 Valco rotor seal for injection valve C2-2006 

3796.044 Valco stator for injection valve C2-2006 

3796.048 Valco rotor seal PEEK for injection valve C2-2346 

3796.087 Valco PEEK stator for injection valve C2-2346 

0700.004 Valco Ferrule (pck/10) 

0700.005 Valco Nut (pck/10) 

3796.046 Valco loop 5 µl with fittings 


3796.030 Valco loop 200 µl with fittings 


3796.031 Valco loop 500 µl with fittings 

3796.088 Valco loop 20 µl PEEK with fittings 

3796.085 Valco loop 100 µl PEEK with fittings 

3796.083 Valco finger tight nut PEEK 

3796.084 Valco Ferrule PEEK 

0830.731 Rheodyne 7739 injection valve, 

stainless steel version, incl. bayonet pins. 

0830.732 Rheodyne 9740 injection valve, 

PEEK/ceramic version, incl. bayonet pins. 

3796.035 Rheodyne loop 5 µl 

3796.009 Rheodyne loop 10 µl 


3796.011 Rheodyne loop 50 µl

62 APPENDIX A: List of Accessories 

Article no. Description 





3796.076 Rheodyne loop 20 µl PEEK 

3796.016 Rheodyne loop 100 µl PEEK 

3796.091 Stator for Rheodyne 7739 injection valve 

3796.092 Vespel rotor seal for Rheodyne 7739 injection valve 

3796.093 Tefzel rotor seal for Rheodyne 7739 injection valve 

3796.095 PEEK stator for Rheodyne 9740 injection valve 

3796.096 Ceramic stator face for Rheodyne 9740 injection valve 

3796.097 PEEK rotor seal for Rheodyne 9740 injection valve 

3796.045 Socket wrench for 1/16”nut 

2140.151 Syringe valve 

2140.160 Luer lock connector syringe valve 

4400.250 250 µl syringe 

4400.000 1000 µl syringe 

0900.742 Plunger replacement tip for 250 µl syringe (pck/10) 

0700.019 Plunger replacement kit for 1000 µl syringe (pck/10) 

Vials, seals and caps 

0788.751 Standard clear crimptop 2-CV vial (pck/200) 

0788.752 Crimpcap for standard 2-CV and 1.1-CTVG vials. 

(pck/1000) 

0788.756 Chromacol 1.1-CTVG conical vial with crimptop. 

(pck/100) 

0788.757 Chromacol TTS-312 supports for 1.1-CTVG vial. 

(pck/100) 

0788.761 Standard screwtop 2-SV vial. (pck/100) 

0788.762 Screwcap for standard 2-SV vial. (pck/100) 

0788.763 Septum for standard 2-SV vial. (pck/100) 

0900.750 Chromacol 10-CV, 10 ml vial. (pck/125) 

0900.751 Chromacol 20-ACB crimpcap for 10-CV vial. (pck/125) 

0900.752 Chromacol 20-ST101 seal for 10-CV vial. (pck/125) 

3760.403 Handcrimper 11 mm OD vials (standard). 

3760.411 Handcrimper 20 mm OD vials.

APPENDIX B: Error Codes 63 

APPENDIX B: Error Codes 

Injection valve 

ERROR 211 Injection valve is not in a valid position. 

ERROR 212 The injection valve did not switch within 1.5 seconds. 

ERROR 213 The switching time of the injection valve exceeds 500 

msec 

Syringe dispenser unit 

ERROR 221 The syringe valve did not switch. 

ERROR 222 The syringe did not reach the home position within time. 

ERROR 223 The syringe spindle did not make the correct number of 

rotations. 

ERROR 224 The spindle does not rotate. 

ERROR 225 The syringe valve did not find a valid position. 

Injection needle unit 

ERROR 230 The sample needle arm did not reach or leave the home 

position (vertical). 

ERROR 231 The sample needle arm is in an invalid horizontal 

position while moving down. 

ERROR 232 The sample needle arm did not reach its destination 

within a certain time (horizontal). 

ERROR 233 Too many or not enough steps needed to reach 

destination of horizontal needle movement. 

ERROR 234 Sample needle arm not in vertical home position while 

moving horizontally. 

ERROR 235 The sample needle arm is at an invalid horizontal 

position 

ERROR 237 The sample tray is not at a valid position while moving 

the sample needle arm down. 

ERROR 239 Vial sensor sticks. 

Tray unit 

ERROR 251 Incorrect tray rotation 

ERROR 252 No sample tray positioned in the AS 3900. 

ERROR 253 The sample needle arm is not in the home position while 

rotating the tray.

64 APPENDIX B: Error Codes 

Vials 

ERROR 260 Missing vial. 

Only available when Skip Missing Vial is set to NO in the 

System Settings (see page 34) and during the execution 

of the Mix of a method. 

ERROR 262 Missing transport vial. 

Only available when Skip Missing Vial is set to NO in the 

System Settings (see page 34). 

ERROR 264 Missing vial for reagent A 

ERROR 265 Missing vial for reagent B 

ERROR 268 Missing destination vial. 

ERROR 269 Not enough transport liquid available due to missing 

transport vials. 

ERROR 270 Not enough reagent A available. 

ERROR 271 Not enough reagent B available. 

Electronics 

ERROR 275 Error occurred during initialization, the AS 3900 can not 

start.


APPENDIX C: Test Procedure 

Introduction 

The precision and reproducibility of a HPLC system crucially depends on 

the quality and dependability of the separation. One of the important 

functions is reliable extraction of value products. 

For the above reasons, it is important to regularly make sure that the 

detector is functioning properly. The following instructions explain how to 

carry out the respective tests. 

If the AS 3900 does not fulfil the required specifications while running the 

inspection then it must be marked as defective and cannot be used for 

further analysis. The autosampler can be used for further analysis only 

after service or repair together with the certificate stating that the required 

specifications have been fulfilled (see page 71). 

Defining the Inspection Intervals 

The routine functional and technical specification inspections have to be 

carried out in timed intervals according to how frequent the instrument is 

used. The following time intervals have been defined: 

Average use per day up to 5 days per week: every 6 months 

Frequent use, meaning day and night 

or more than 5 days per week: every 3 months 

Operation with buffer solution or 

other salt solutions: every 3 months. 

Required Materials 

Eluent: Deionised water (HPLC quality) 

The eluent must be degassed in order to avoid 

functioning defects caused by air bubbles. 

Fig. 51: Test unit 

Test solution: 50 ppm uracil dissolved in deionised water (HPLC 

quality) 

Wash solution: Water : i-propanol 8:2 (HPLC quality) 

HPLC Pump 

A restriction capillary to build up a minimum pressure of 15 bar at a 

1ml/min flow rate 

UV detector (measuring cell: 10 mm or smaller path length) 

Recorder, integrator, or chromatography software 

(data rate: min. 5 Hz). 

The above components should be configured as described in Fig. 51: 

pump: 1 ml/min 

UV-Detector: 

254 nm 

Analytical 

Unit

66 APPENDIX C: Test Procedure 

Inspecting the AS 3900 

Specification Test 

A system containing the above mentioned components is built together 

for all tests. The defaults for the 3900 Autosampler are according to the 

analytical standard version. The autosampler comes with a100 µl sample 

loop and a 250 µl syringe. The bottle for the wash solution on the 

autosampler is filled with 80% water and 20% isopropanol. 

1. Sample Volume Reproducibility 

For the sample volume reproducibility the prepared uracil solution (50 

ppm) is injected again with an injection volume of 10 µl. 

Set the following system parameters on the AS 3900: 

System Settings/Adjustments: 

Loop volume: 100µl (standard design) 

Needle tube volume: 15 µl 

Syringe volume: 250 µl 

Dispenser speed: normal 

Skip missing vial: yes 

Head space pressure: yes 

Program the following methods and series on the autosampler: 

Method 1 

Injection mode: Partial loop fill 

Flush volume: 30 µl 

Injections/vial: 9 

Inj. volume: 10 µl 

Analysis time: 1 min 

Wash: None 

Series 1 

Method number: 1 

Calibration vial: No 

First sample vial: 01 

Last sample vial: 01 

Analytical Parameters: 

Flow rate: 1 ml/min 

UV detector wavelength: 254 nm 

Set the 1 vial, filled with 500 µl of sample solution, in the 3900’s sample 

tray to position 1. Start the method series that was programmed on the 

autosampler. With each injection 10 µl is injected. This is repeated 9 

times. A chromatogram similar to Fig. 52 should result.


uAU 

500000 

400000 

300000 

200000 

100000 

0 

-100000 

UV-Detektor[1] 

MIDAS_Reproducibility 

9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 

Fig. 52: Sample volume reproducibility 

Minutes 

The mean of the integrated peak area is developed. Accordingly, the 

variation coefficient VK1 is calculated. The calculation can be made using 

the following formulas: 

Peakareas 

∑ 

= 

n 

∑ 

i= 

1 

Peakareas 

n 

i 

(mean) 

( Peakareai 2 

− Peakareas) 

σ n−1 

= 

n −1 

, whereby i = 1 - 9 

(standard deviation) 

VK 

1 

σ 

peakarea 

n−1 

[ % ] = 

× 100 

The variation coefficient should be VK = 0.5%. 

Record the results on the test report form. 

(variation coefficient) 

2. Sample Carry-Over Percent 

The system settings and the analytical parameters are determined as 

explained in test 1. 

To determine the sample carry-over percent, 10 µl of sample solution 

(vial position 1) is alternately injected with 10 µl eluent (vial position 2) 

from vials 1 and 2. 

In order to do this a method (no. 2) and 3 series (no. 2-4) must be 

programmed. Take into consideration that the wash function for the 

injection needle must be activated in between injections. 


Method 2 






Wash: Yes 

500000 

400000 

300000 

200000 

100000 

0 

-100000 

uAU


Series 2 to 4 





Due to the fact that the eluent is injected from vial 2, only a very small 

peak or no peak at all should be seen. A chromatogram as illustrated in 

Fig. 53 will result. 

uAU 

500000 

450000 

400000 

350000 

300000 

250000 

200000 

150000 

100000 

50000 

0 



Fig. 53: Sample Carry-Over Test 

Injection of Eluents 

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 

Minutes 

The respective determined peak areas (the mean) for the eluent injection 

are put into a ratio of the uracil peak areas. The sample carry-over 

percent PV can be calculated with the following equation: 

PV [%] X 100 (Sample carry-over) 

The sample carry-over percent PV should equal 0.3%. 


3. Linearity 

The system settings and analytical parameters are determined as 

explained in test 1. 

10, 20, 30, 40 und 50 µl of the uracil test solution are injected three times 

each from vial 1. In order to do this 5 different methods with different 

injection volumes must be programmed. The 5 methods are to be used in 

series 5-9. Make sure that there is sufficient test solution in vial 1 

(minimum 800 µl). 


Method 3-7 




Inj. volume: 10 µl (20, 30, 40, 50 µl) 


Wash: None 

Series 5-9 

= 

∑ 

i 

∑ 

i 

Peakarea 

3 

Peakarea 

i 

3 

i Eluent 

Testsolution 

500000 

450000 

400000 

350000 

300000 

250000 

200000 

150000 

100000 

50000 

0 

uAU


Method number: 3 (-7) 




Series 5-9 are carried one after the other. A chromatogram similar to Fig. 

54will result. 

uAU 

2000000 

1800000 

1600000 

1400000 

1200000 

1000000 

800000 

600000 

400000 

200000 

0 

-200000 


MIDAS_Linearity 

Fig. 54: Linearity Test 

2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 

Minutes 

For evaluation, the correlation coefficient r of the regression lines are 

determined from the peak’s measured values and the injection volumes 

using the following equation: 

r = 

∑ xi 

yi 

− nxy 

2 2 2 2 

( ∑ xi 

− nx 

)( ∑ yi 

− ny 

) 

2000000 

1800000 

1600000 

1400000 

1200000 

1000000 

800000 

600000 

400000 

200000 

0 

-200000 

(correlation coefficient) 

yi Y value from measured value i (injection volume) 

xi X value from measured value i (peak area) 

y 

Mean of Y over all n measured values 

x Mean of X over all n measured values 

n Number of paired measured values 

The correlation coefficient r should be ≥ 0.998. 


4 Mixture Test 

The mixture test can only be mode with the 3900 standard tray 

. A mixing program cannot be carried out with any of the 

other 3900 autosampler trays because they do not have the reagent 

A/B position. 

The system settings and analytical parameters are determined as 

explained on page 65. 

For the mixture test, set the following sample vials in the autosampler 

tray: one sample vial (vial pos. 1) filled with test solution, an empty vial 

(destination vial pos. 2), and one eluent filled reagent vial. 

The autosampler must be programmed so that a 1:10 dilution of the 

sample is produced in the empty vial. Due to the fact that a maximum of 9 

methods and 9 series can be programmed and saved, the methods and 

series must be overwritten. 

uAU


After the dilution is completed, 10 µl is taken from both sample vials and 

injected three times each. 


Method 1: 



No. of inj./vial: 3 

Injection volume: 10 µl 

Analysis time: 0:01:00 

Wash between: No 

Method 2: 







1) Add 90 µl Reag-A to DESTINATION 


3) Add 40µl SAMPLE to DESTINATION 



MIX 3 times with 250 µl 

END OF MIX METHOD 

Series 1: 

Method: 1 

First vial: 01 

Last vial: 01 

Series 2: 

Method: 2 


Last vial: 01 

Destination vial: 02 

After measurement is completed, a chromatogram similar to Fig. 55 

should result. 

uAU 

700000 

600000 

500000 

400000 

300000 

200000 

100000 

0 

-100000 

-200000 


MIDAS_Mixing_Test 

Fig. 55: Mixture Test 

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 

Minutes 

700000 

600000 

500000 

400000 

300000 

200000 

100000 

0 

-100000 

-200000 

uAU


The measuring value’s mean (peak area) is developed for each vial and 

the variation coefficient (VK2/3) is determined for both vials (see 

calculation point 1). 

The dilution factor F10 is determined from the ratio of the original 

sample’s peak areas mean and the dilution. 

The variation coefficient VK2 for the 1. vial (sample) should be = 0.5%. 

The variation coefficient VK3 for the 2. vial (dilution) should be = 0.5%. 

The dilution factor F10 should be within the following range: 

9.85 < x > 10.25. 


Documentation and Archive 

The results are recorded for each test on the test report form. 

Additionally, the instrument number (i.e. serial number or inventory 

number) of the instrument inspected, date of the inspection, date of the 

next inspection, and name of the inspector are entered on the test report 

form. The test report form is then chronologically filed in the instrument 

log book. 

If the instrument passed the inspection and fulfilled the specifications, 

then it is provided with a sticker or tag (a green label). The label has the 

instrument number, date of inspection, date of the next inspection, and 

name of the inspector on it. 

If the instrument did not pass the inspection and did not fulfil the 

specifications then the instrument is given a sticker or tag (a red label 

with a DEFECT label). This label has the instrument number, date of the 

inspection, and the name of the inspector. The instrument may not be 

operated until the required maintenance or repair has been made and the 

specifications are met. 

All instrument inspection documents (instructions and test reports) are 

quality assurance system regulations that are archived. 

The manufacturer archives documents, manuals, service manuals, 

service information, and part lists that are available for reference.


TEST REPORT 

Module: Autosampler 

Type: 3900 Analytical Cool Bio 

Instrument number: 

Function Test 

No. Test Settings Specifications Results 

1 Reproducibility 10 µl test solution from 6 glass 

vials, each one is injected 3 

times. 

2 Carry-over 

10 µl of the test solution and 

eluent in alternately injected 3 

times. 

3 Linearity 10, 20, 30, 40, and 50 µl of the 

test solution are injected 3 times 

each. 

4* Mixture Test 10 µl of the test solution and one 

of the 1:10 Autosampler dilutions 

are injected 3 times each. 

* Only for the AS 3900 with a sample tray. 

Date: ........................................ 

Next inspection on: ........................................ 

VK1: = 0.5% 

PV: = 0.3% 

r: ≥ 0.998 

VK 2: = 0.5% 

VK 3: = 0.5% 

F10 9.85 < x > 10.25 

Inspector: ........................................ Signature: ........................................


APPENDIX D: AS 3900, Preparative 

By just choosing PREP in your system settings, you can use the AS 3900 

to inject all of your samples into a Preparative LC system or in other 

areas where large injection volumes are required. Also in combination 

with the PROSPEKT On-line Solid Phase Extraction System, the 

AS 3900 can be your ideal autosampler. 

The combination of large sample vials (10 ml) a large sample volume 

needle and a 2.5 ml syringe enables you to inject large volumes very 

reproducible with high speeds and only 45 µl of sample loss. The 

installed large bore valve (0.75 mm) with 10 ml sample loop enables you 

to inject from microliters to milliliters with the same autosampler. Flow 

rates up to 200 ml per minute are no problem for the autosampler 

AS 3900, used in Prep mode. 

If the Prep option is factory installed the part on installation can be 

skipped. 

If the Prep option is bought as a kit, carry out the installation instructions. 

Specifications AS 3900, prep 

The Specifications of the AS 3900, prep differ in some ways from the 

standard autosampler AS 3900. The different specifications are listed 

below. 

SAMPLING 

Sample capacity 

LSV tray: 24 vials of 10 ml (LSV) 

Loop volume Not programmable, injection volume 

determines the aspirated sample 

volume 

Dispenser syringe 2500 µl syringe 

ANALYTICAL PERFORMANCE 

Reproducibility RSD 10 µl 

up to 50% of the installed sample 

loop. 

Memory effect < 0.1% with programmable needle 

wash 

PROGRAMMING 

Methods 9 programmable methods 

Injection method Partial loop fill only 

Injection volume 1 µl – 19,999 µl, with 1 µl increment 

Mix Not available 

OPTIONS 

Bio-compatible valve Not available

74 APPENDIX D: AS 3900, Preparative 

Installation AS 3900, prep 

To install the Prep option on the standard AS 3900 perform the following 

installation steps: 

• When the Firmware revision is lower than V2.00, then first replace 

the EPROM with the one supplied in the shipkit before you continue 

with the next steps, see section Firmware replacement 

• Replace the standard injection valve with the special AS 3900 Prep 

valve (VALCO #C2-3006 SPHMI); see page 47 for detailed 

information. 

• Replace standard sample needle, air needle and buffer tubing with 

the ones supplied in the AS 3900 Prep kit. See page 54 for detailed 

information. 

• Re-connect all tubing to the injection valve as described in section 

Fluid connections on page 22. 

• Replace standard Syringe with the 2500 µl syringe; see section 

Syringe on page 55 for detailed information. 

• Install the 24 vials (LSV) tray, see section Instrument Description on 

page 13 detailed information how to place the sample tray in the 

autosampler AS 3900. 

• Choose Prep Mode in system settings, see section Prep Mode 

System Settings on page 37. 

Table 8: Tubing of the AS 3900 Prep option. 

Tubing Material and dimensions Label 

LSV sample needle 

and tubing. 

Buffer tubing from 

high pressure valve 

to syringe valve. 

SS tubing; 

70mm x 0.81mm OD x 051 mm ID 

Tefzel tubing; 

155 mm x 1 /16” OD x 0.50 mm ID 

PTFE tubing; 

2550 mm x 1 /16” OD x 1.0 mm ID 

45 µl 

2000 

µl


Injecting with the AS 3900, prep 

The injection routine differs from the standard autosampler AS 3900. The 

AS 3900, prep has only the Partial loop fill injection routine, which differs 

from the partial loop fill injection routine of the standard autosampler. 

Therefore some remarks, which explain the difference and make sure 

your have the best injection performance. 

Ensure that the programmed injection volume does not exceed the 

50% of the loop volume, otherwise the reproducibility and accuracy 

of the injection can not be guaranteed. 

The software does not check the injection volume with the installed 

loop volume. It is therefore possible to program injection volumes 

larger than 50% of the loop volume. 

The preflush is no longer executed, expansion of the liquid in the 

sample loop will remove sample from the sample tubing and needle 

when switching from INJECT to LOAD. To compensate for the 

volume of the needle and tubing, an additional amount of the 

sample, equal to the programmed sample needle – tubing volume 

(default 45 µl) is aspirated in the sample loop together with the 

programmed sample volume. 

Firmware replacement 

The firmware of the AS 3900 is stored in an EPROM, which is located on 

the CPU Board. 

ATTENTION: 

The EPROM is highly sensitive for Electro Static Discharges. 

Observe precautions for handling Electro Static Discharge sensitive 

devices. 

For replacement of this EPROM proceed as follows: 

• Make a notice of all the programmed Methods, Series and System 

Settings 

• Turn main power OFF 

• Remove the 4 screws marked (A). 

• Open the rear panel 

• Remove the old EPROM and place the new EPROM on the CPU 

Board. 

Make sure all pins of the EPROM are placed in the IC-socket. 

• Check all System Settings after placing the new EPROM 

The little notch on the top of the EPROM should be facing the same 

way as the notch on the IC-socket.

76 APPENDIX D: AS 3900, Preparative 

A 

A A 

Fig. 56: Rear side of the autosampler AS 3900 

Fig. 57: Placing the EPROM of AS 3900 

S1 

ON DIP 

S2 

ON DIP 

OUT IN 

EPROM 

A

Technical Data 77 

Technical Data 

Sample Handling 

Standard tray: 84 sample vials of 1.8 ml plus 3 vials of 

10 ml for additional liquids 

optional: 96 vials of 1.8 ml; 

Preparative tray: 24 sample vials of 10 ml 

Cool option: 

Injection Volume 

4-15 ± 2°C 

standard sample loop: 20 µl, other sizes available 

1 µl – 5,000 µl in 1 µl increments 

partial loopfill: 1µl – 50% of installed sample loop 

µL pick-up: max. 2477 µl 

Injections per Vial: max. 9 

Analysis Time: max. 9hr 59min 59 sec 

Needle Wash: programmable 

Headspace Pressure: 


approx. 0.05 MPa (built-in compressor) 

standard: stainless steel 

Bio option: PEEK 

switching time: less than 100 ms 

Precision 

flushed loop injection: RSD < 0.3% 

partial loopfill injection: RSD < 0.5% 

µL pick-up: RSD

78 Hinweise zum Gebrauch des Handbuchs 

Hinweise zum Gebrauch des Handbuchs 

Konventionen in diesem Handbuch 

Besondere Warnhinweise und Hinweise auf mögliche Probleme sind 

mit dem Warnsymbol gekennzeichnet. 

Ein nützlicher Tipp wird in der Marginalspalte durch das Symbol 

hervorgehoben. 

Wichtige Hinweise werden in der Marginalspalte durch das 

Hinweissymbol kenntlich gemacht. 

Die Bezüge zu Details in Abbildungen im Text dieses Handbuchs werden 

durch das Format wie z.B.: „siehe Pos. {3} in Abb. 1 auf Seite 6“ 

charakterisiert. 

� � � � Offene Pfeile, verwendet in Blockdiagrammen, symbolisieren einen 

automatischen Programmablauf ohne die Notwendigkeit einer manuellen 

Eingabe. 

→ ↑ � ↓ Pfeile, verwendet in Blockdiagrammen, bedeuten, dass der Anwender die 

entsprechende Pfeiltaste betätigen soll. 

� � � � Die Pfeilspitzen symbolisieren die Selbstdefinierende Verwendung der 

entsprechenden Pfeiltasten. 

[Methods] Feste Funktionstasten erscheinen im Druckbild in eckigen Klammern 

Variable Funktionstasten werden zwischen spitzen Klammern 

beschrieben


Schnellstart des AS 3900 

Dieses Kapitel soll Ihnen einen schnellen Start des AS 3900 ermöglichen. 

Es werden Schritt für Schritt Informationen gegeben von der Installation 

bis zur laufenden Analyse. Es macht Ihren AS 3900 in einem minimalen 

Zeitaufwand zu Ihrem Helfer im Labor. 

Installation 

(Detaillierte Information finden Sie ab Seite 94) 

• Lassen Sie den AS 3900 sich mindestens eine Stunde an die 

Umgebungstemperatur anpassen 

• Prüfen Sie den AS 3900 auf sichtbare Transportschäden. Treten 

Sie bei deren Feststellung unverzüglich mit Ihrem lokalen Händler 

in Verbindung. 

• Entfernen Sie die Transportsicherungsschraube von der rechten 

Seite der Fronthaube. 

Halten Sie die Fronthaube mit der Bedienungstastatur während des 

Betriebs geschlossen! 

• Prüfen Sie die Sicherungen und die Spannungseinstellung an der 

Geräterückseite. 

• Schließen Sie das Netzkabel an. 

• Nach dem Einschalten des Gerätes erscheint der „Ready Screen“ 

und zeigt die Firmwareversionsnummer an. 

• Verbinden Sie den Ableitungsschlauch mit dem rechten 

Ableitungsanschluss an der Front des Gerätes. 

• Füllen Sie die Waschflasche mit destilliertem Wasser/i-Propanol 

(80/20) oder mit der vorgesehenen mobilen Phase. Es sollen nur 

Wasser und/oder organische Lösungsmittel benutzt werden. 

Verwenden Sie keine Pufferlösungen (Kristallisationsgefahr) die zu 

ernsthaften Schaden am Gerät führen können. Zur Vermeidung 

von Gasblasen in der Spritze verwenden Sie entgaste 

Waschlösungen. 

• Füllen Sie das System mit Waschlösung, indem Sie es durch 

Drücken der Funktionstaste (Ready Screen) 2- oder 3mal 

waschen. Falls Luftblasen in der Spritze verbleiben entfernen 

Sie diese durch vorsichtiges Klopfen an den Spritzenkörper. 

• Verbinden Sie Ihre HPLC Pumpe mit dem Port 1 des Injektionsventils 

und die Säule mit dem Port 6. Prüfen Sie das System auf 

Undichtigkeiten und lassen Sie es zumindest 5 Minuten einlaufen. 

Systemeinstellungen (Siehe Seite 108) 

Normaler Weise sind die Systemeinstellungen korrekt vorgegeben. Um 

sie zu überprüfen verfahren Sie wie folgt: 

Tastendruck: Beschreibung: 

[System] Eingabe der Systemeinstellungen 

Eingabe der Globalen Einstellungen 

[0100] [Enter] Volumen der installierten Probenschleife: 100 µl. 

[015] [Enter] Volumen des Schlauchs Nadel ↔ Ventil: 015 µl 

[Enter] Spritzenvolumen: 250 µl 

[Enter] Setzt die Spritzengeschwindigkeit Normal. 

[Enter] Überspringen fehlender Vials. 

[Enter] Luftsegment ist aktiv 

[Enter] Headspace Druck: aktiv 

Drücken Sie [Escape] zweimal, um zurück zum „Ready Screen“ zu 

gelangen

80 Schnellstart des AS 3900 

Beispiel 1: 10 µl Injektion mit partieller Schleifenfüllung von Vial Nummer 1 

Die Durchführung von Routineinjektionen ist mit dem AS 3900 einfach. 

Zuerst definieren Sie eine Methode, die Injektions-, Misch- und/oder 

Waschschritte enthalten kann. Diese Methoden werden im Gerät 

gespeichert. Danach kann eine Laufsequenz oder Serie programmiert 

werden in welchen die Methoden mit zugehörigen Vialbereichen 

verknüpft werden. Der AS 3900 kann dann diese Serien abarbeiten. 

Methodenprogrammierung (Siehe Seite 112 dieses Handbuchs) 

Injektionsprogramm: 


[Methods] [1] [Enter] Auswahl der Methode Nummer 1. 

Auswahl der Injektion mit partieller 

[Enter] 

Schleifenfüllung 

[30] [Enter] Spülvolumen: z.B. 30 µl 

[1] [Enter] Anzahl der Injektionen pro Vial: 1 

[10] [Enter] Injektionsvolumen: 10 µl 

[100] [Enter] Eingabe der Analysenzeit: z.B. 1 Minute 

Drücken Sie [Escape], um in das vorgelagerte Menü zu kommen 

Wash Programm: 


Menüauswahl Wash Programm 

Deaktivierung des Wash Programms 

Drücken Sie [Escape] dreimal, um zurück zum „Ready Screen“ zu 

gelangen 

Serienprogrammierung (Siehe Seite 117 dieses Handbuchs) 


[Series] [1] [Enter] Eingabe Seriennummer 1 

[1] [Enter] Eingabe Methodennummer:1 

[1] [Enter] Eingabe Erstes Probenvial: 01 

[1] [Enter] Eingabe Letztes Probenvial: 01 


gelangen 

Serienausführung (Siehe Seite 119 dieses Handbuchs) 

Geben Sie ein Probenvial in die Position 1. (Ist die Position nicht 

zugänglich, können Sie den Probenteller von Hand drehen.). 


[Start/Stop] 

[1] [Enter] Start der Serie Nummer:1 

[1] [Enter] Stopp nach Serie Nummer:1 

Nach dem Drücken von sucht der AS 3900 das Vial 1und führt 

die 10 µl Injektion durch.


Beispiel 2: Ausführung von drei 10 µl Injektionen aus einem Vial ohne 

Probenverlust durch Verwendung der µl Pick-up Injektionsroutine 

mit Durchführung einer Waschroutine nach jeder Injektion. 

Wenn das Luftsegment auf ON gesetzt ist, wird auch ein kleines 

Luftsegment in Ihr HPLC System injiziert. (Für Detailinformationen 

siehe Seite 119 dieses Handbuchs). 

Zum Ausschalten (OFF) des Luftsegments ändern Sie in den 

Systemeinstellungen die Einstellung von YES auf NO. 

Drücken Sie hierfür die Tastenfolge: 

[System] [Enter] [Enter] [Enter] [Enter] [Enter] 

[Escape] [Escape] 





 

[Enter] 

Auswahl der Injektion mit µl Pick-up 




Drücken Sie [Escape], um in das vorgelagerte Menü zu kommen. 



Menüauswahl Wash Programms 

[ENTER] Wash Programm nach jeder Injektion 

[1] [Enter] Eingabe der Anzahl von Spritzenfüllungen je 

Waschprozess, z.B. 1 Spritzenfüllung. 


gelangen 








gelangen 


Geben Sie ein Probenvial in die Position 1 und ein Vial mit mobiler Phase 

in die Position 85. 

Stellen Sie sicher, dass das Transportvial beim Start einer neuen 

Serie korrekt gefüllt ist. 


[Start/Stop] 



Nach dem Drücken von sucht der AS 3900 das Vial 1und führt 

drei 10 µl Injektionen durch. Nach jeder Injektion wird die Nadel mit einer 

Spritzenfüllung gewaschen.

82 Schnellstart des AS 3900 

Beispiel 3: Ausführung einer 1:10 Verdünnung gefolgt von einer 10 µl 

Injektionen mit partieller Schleifenfüllung von Vial Nummer 1 

Die Mischmethode wird wie folgt durchgeführt: 

Überführe 360 µl von Reagenz A ins Zielvial, füge 40 µl Probe hinzu, 

mische 3-mal mit 250 µl und injiziere danach 10 µl. 

Ausgehend vom „Ready Screen“: 





Auswahl der Injektion mit partieller 

[Enter] 

Schleifenfüllung 

[30] [Enter] Spülvolumen: z.B. 30 µl 




Drücken Sie [Escape], um in das vorgelagerte Menü zu kommen. 



Menüauswahl Wash Programm 

Deaktivierung des Wash Programms 


gelangen 

Mischprogramm: (Siehe Seite 115 dieses Handbuchs) 

Zu betätigende Tasten: Beschreibung: 

Auswahl Mischprogramm 

Bestätigung der Mischprogrammnutzung 

 

Eingabe des ersten Mischschrittes: 

[180] [Enter] Zufügen von 180 µl Reagenz A zum 

[Enter] Zielvial. 

 

[Enter] 

 

Eingabe des zweiten Mischschrittes: 

[180] [Enter] Zufügen von weiteren 180 µl Reagenz A 

[Enter] zum Zielvial. 

 

[Enter] 

 

Eingabe des dritten Mischschrittes: 

[40] [Enter] Zufügen von 40 µl Probe zum Zielvial. 

[Enter] 

 

[Enter] 

 

Eingabe des dritten Mischschrittes: 

[3] [Enter] 3-maliges Mischen des Zielvialinhalts mit 

[250] [Enter] 

einem Volumen von 250 µl 


gelangen








[2] [Enter] Eingabe Erstes Zielvial: 02 


gelangen 


Geben Sie ein Probenvial in die Position 1, ein leeres verschlossenes 

Vial in die Position 2 und ein mit dem Reagenz A gefülltes Vial in die 

Position 86. (Ist eine Position nicht zugänglich, können Sie den 

Probenteller von Hand drehen.) 

Stellen Sie sicher, dass das Transportvial beim Start einer neuen 

Serie korrekt gefüllt ist. 


[Start/Stop] 



Nach dem Drücken von sucht der AS 3900 das Vial 86 und 

überführt zweimal 180 µl in das Zielvial und danach 40 µl der Probe. 

Dann wird dreimal gemischt gefolgt von einer 10 µl Injektion.

84 Programmübersicht 

Programmübersicht 

[System] 

[Methods] 

[Series] 

[Start/Stop] 

[Priority] 

[Hold/Cont.] 

Ready screen 

 

Perform 

standard 

wash 

Maintenance 

functions. 


1 

Copy 

methods 

Erase 

methods 

Midas 

logbook 

Serial 

communication 

protocol 

Control 

column oven 

temperature 

Control 

sample tray 

cooling 

 

Loop volume 

Needle volume 

Syringe volume 

Syringe speed 

Skip missing vials 

Air segment 

Headspace pressure 


vials 


Tray type Inject marker pulse length 

Input edge next injection 

Freeze input active 

Reset outputs after last 

Series 

Service 

mode 

Device identifier Select Prep mode 2 

 

Injection type: 

 

Flush volume 


Analysis time 

Flush volume 



Analysis time 

Method number 

First sample vial 

Last sample vial 

Use calibration vials 3 

First calibration vial 

Last calibration vial 

Vials between calibration 

First destination vial 4 

First Series 

Last Series 

 

Sample vial 

Hold the analysis time of the Midas 

Abb. 1 Programmübersicht 



Analysis time 

Wash volume Timed events program: Mix program: 

Wash between: 

- Series 

- Vials 

- Series 

- 4 x AUX-1 

- 4 x AUX-2 

- INITIAL OVEN SETPOINT 

- 2 x OVEN SETPOINT 

- END TIME 

1. Zugänglich wenn die optionale Probentellerkühlung installiert ist. 

2. Bei ausgewähltem Prep mode, sind einige Systemeinstellungen nicht mehr programmierbar. Sie werden auf 

vorgegebene Werte gesetzt. 

3. Abhängig von den Systemeinstellungen. 

4. Im Fall das Zielvials in der Mischmethode verwendet werden. 

- Add 

- Mix 

- Wait

AS 3900, allgemeine Beschreibung 85 

AS 3900, allgemeine Beschreibung 

Der AS 3900 wurde konzipiert, um allen Anforderungen eines modernen, 

analytischen Laboratoriums zu genügen: Er ist robust, kosteneffektiv und 

leicht einzubinden. Für konsistente Resultate sind eine Säulentemperatursteuerung 

und eine Probenkühlung verfügbar. Eine sehr feine 

Spritzensteuerung garantiert überragende Genauigkeit bei der Injektion 

oder Reagenzdosierung. Das gesamte Injektionsventil kann für einen 

schnellen Service innerhalb von Sekunden ausgewechselt werden. Diese 

und viele weitere Features sind in diesem Handbuch beschrieben, um 

Ihnen die Nutzung des vollen Potentials des AS 3900 zu ermöglichen. 

PASA, ein robustes Injektionsprinzip. 

Die Vollschleifeninjektion mit druckunterstützter Probenansaugung 

(Pressure Assisted Sample Aspiration PASA) ist ein bewährtes 

Konzept, das hohe Präzision mit Einfachheit und Verlässlichkeit 

verbindet: 

• Keine unnötigen Bewegungen der Probennadel 

• Reduzierte Gefahr von Luftblasen in der Probenführung 

• Kein verschleißender und kontaminierender Nadelport 

• Intelligente Ventilschaltung 

• Sehr feine Spritzensteuerung mit höchster Genauigkeit 

Es kann zwischen drei Injektionsmodi ausgewählt werden: 

• Vollschleifeninjektion für maximale Genauigkeit 

• Partielle Schleifenfüllung für maximale Flexibilität 

• µl Pick-up für ausgeschlossenen Probenverlust 

Abb. 2 Das PASA Injektionsprinzip 

Air pressure

86 AS 3900, allgemeine Beschreibung 

Säulenofen für konsistente Resultate. 

Integraler Teil des AS 3900 ist ein Säulenofen, weil eine konstante 

Säulentemperatur für die Langzeitbeständigkeit einer 

chromatographischen Trennung von Bedeutung ist und möglicherweise 

von GLP Bestimmungen gefordert wird. 

Optional integrierte Probenkühlung. 

Eine voll integrierte thermo-elektrische Probenkühlung ist als Cool- 

Option erhältlich. Es sind keine zusätzlichen externen Vorrichtungen 

erforderlich. Das effiziente Kühlsystem verursacht keinerlei 

Beschränkungen des Probentellerzugangs während des Betriebes. 

Reagenzzusatz. 

Die Zugabe interner Standards, die Probenverdünnung oder –derivatisierung 

kann in einfachster Weise programmiert werden. Die Einschrittderivatisierung 

einer Probe in einem separaten Zielvial erfordert nicht 

mehr als vier Programmzeilen. Mehrfache Reagenzzugabe ist durch zwei 

10ml Reagenzvials auf dem Probenteller (Pos.86 und 87)ebenfalls 

möglich. 

PC Steuerung. 

Für die Kommunikation mit externen Computern sind ein serielles 

Interface und das Kommunikationsprotokoll Standard. Der AS 3900 kann 

auch direkt mit den KNAUER HPLC Softwarepaketen ChromGate ® und 

EuroChrom ® gesteuert werden. 

Service freundliches Design. 

Geringe Ausfallzeiten des AS 3900 werden durch im Mittel lange Zeiten 

zwischen Fehlfunktionen sowie durch einen schnellen Geräteservice 

gewährleistet. Spezielle Aufmerksamkeit wurde diesem Zusammenhang 

gewidmet, wie am Beispiel des Injektionsventils gezeigt wird. Der AS 

3900 warnt Sie, sobald die normale Gebrauchszeit der Dichtung 

verstrichen ist oder das Drehmoment beim Schalten zu hoch wird. Das 

ermöglicht eine präventive Wartung bevor die Injektionen beeinträchtigt 

werden. Falls erforderlich, kann auch das komplette Ventil durch den 

speziellen Schnellmontagemechanismus innerhalb von Sekunden 

ausgewechselt werden.

Instrumentbeschreibung 87 

Instrumentbeschreibung 

8 

10 

9 

7 

12 

11 

Abb. 3 Autosampler AS 3900, Explosionsbild 

13 

1. Nadelarm 

2. Injektionsventil 

3. Ofengehäuse 

4. Schlauchhalterung 

5. Waschposition 

6. Position für 

Transportlösungsmittelund 

Reagenzienvials 

6 

5 

7. Wasch- und Abfallableitung 

8. Kondenswasser und 

Undichtigkeitsableitung 

9. Probentellerfixierung 

10. Probenteller 

11. Spritze 

12. Tastatur 

13. Pufferschlauch 

Einsetzen des Probentellers in den AS 3900 

• Setzen Sie den Probenteller in den AS 3900 und drehen Sie ihn 

bis er einrastet. Es ist nur eine Position möglich. 

• Schrauben Sie die Probentellerfixierung (9) in Uhrzeigerrichtung 

fest. 

• Der AS 3900 ist nun einsatzbereit. 

1 

4 

3 

2

88 Injektionsprinzip 

1. P2- I/O Anschluss; Eingänge, Siehe Seite 101 

2. P1- I/O Anschluss; Relay Ausgänge 

3. Netzschalter 

4. Netzeingang 

5. Sicherungen und Spannungswahl 

6. CE-Zeichen 

7. RS-232 Interface Anschlüsse IN und OUT 

8. Ventilator, nur bei der Cool-Option 

Abb. 4 Rückansicht des AS 3900 

Injektionsprinzip 

Eine spezielle Folge von Ventilschaltungen und Spritzen gesteuerten 

Probenabgaben ermöglichen es mit dem AS 3900 in einfacher und 

reproduzierbarer Weise, Probenvolumen im Bereich von wenigen 

Mikrolitern bis zu Millilitern zu injizieren. 

Deshalb stehen drei verschiedene Injektionsmethoden zur Auswahl: 

• Full loop: Die Probenschleife wird komplett mit Probe 

gefüllt, wodurch eine extreme gute 

Reproduzierbarkeit erreicht wird. 

• Partial loop fill: Die Probenschleife wird nur partiell mit Probe 

gefüllt, wodurch bei programmierbarem 

Injektionsvolumen geringere Probenverluste 

erreicht werden. 

• µl pick-up: Nach dem Ansaugen der programmierten 

Probenmenge wird dies mit mobiler Phase aus 

einem anderen Vial unter Ausschluss jeglichen 

Substanzverlustes in die Schleife transportiert. 

S1 

ON DIP 

S2 

ON DIP 

OUT IN


Der AS 3900 verwendet eine Spritze um die Probe aus dem Vial in die 

Probenschleife zu saugen. Um Verunreinigungen der Spritze zu 

vermeiden, ist der AS 3900 mit einem Pufferschlauch zwischen Spritze 

und Ventil ausgestattet. 

Das Waschlösungsmittel entfernt Probenreste aus der Probennadel und 

dem Pufferschlauch und spült beides. 

Vollschleifeninjektion 

Die Schaltsequenz für eine Vollschleifeninjektion ist in den folgenden 

Abbildungen schematisch dargestellt: 

Abb. 5 Vollschleifeninjektion: Ausgangssituation 

Ausgangssituation: Das 

Injektionsventil ist in der INJECT 

Position. Die Probennadel ist mit der 

Luftnadel in das Vial eingeführt. Der 

Headspace Druck, angelegt über die 

äußere Luftnadel, verhindert das 

Auftreten von Dampfblasen während 

des Ansaugens. 

Die Spritze saugt das “flush volume” 

vom Probenvial in die Probenleitung 

um die Waschlösung zu entfernen. 

Abb. 6 Vollschleifeninjektion: Spülen der Nadel und Probenleitung 

Das Injektionsventil ist in die LOAD 

Position geschaltet und erzeugt so 

eine scharfe Probenfront am 

Schleifeneingang. 

Abb. 7 Vollschleifeninjektion: Injektionsventil in LOAD Position 

Die Probenschleife ist quantitativ mit 

Probe gefüllt, indem ein Mehrfaches 

des Schleifenvolumens (abhängig 

von der Schleifengröße) durch sie 

gefördert wurde. 

3x Schleifenvolumen 

für Schleifen 500 µl 

Abb. 8 Vollschleifeninjektion: Füllen der Probenschleife


Abb. 9 Vollschleifeninjektion: Injektion der Probe 

Das Injektionsventil ist in der 

INJECT Position. Die Probenschleife 

ist jetzt Teil des Fließweges der 

mobilen Phase des HPLC Systems 

und die Probe wird zur Säule 

Transportiert. Die Analyse wird 

gestartet. 

Wenn eine Injektion je Vial durchgeführt wird oder nach jeder Injektion 

ein Waschprogramm vorgesehen ist, wird die Nadel direkt danach aus 

dem Vial gezogen und soweit programmiert gespült. 

Nach Ablauf der Analysenzeit wird die nächste Injektionssequenz der 

Serie gestartet. Falls die nächste Injektionssequenz aus dem gleichen 

Vial erfolgt und keine Waschroutine programmiert ist, beginnt diese mit 

einem Spülgang mit 50% des programmierten Spülvolumens. In den 

anderen Fällen wird sie mit dem programmierten Waschvorgang starten. 

Wenn das Volumen der nächsten Injektion das der Pufferleitung 

übersteigt, wird diese vor der nächsten Injektion gespült. Die Injektion 

wird in diesem Fall mit dem Spülen mit dem programmierten Volumen 

gestartet. 

Luftsegment 

Ein Luftsegment kann zur Reduzierung des Spülvolumens genutzt 

werden. Dieses Luftsegment ist an der Front des Spülvolumens und wird 

nicht mit injiziert. Es beeinflusst also weder die Injektion noch die 

Analyse. Das Luftsegment kann in den Systemeinstellungen aktiviert 

werden (ON/OFF, siehe Seite 108). 

Bei einer Standardnadel muss das Spülvolumen mindestens 30 µl für 

Injektionen mit Luftsegment und 35 µl für Injektionen ohne Luftsegment 

betragen. Für höher viskose Proben sollte das Spülvolumen erhöht und 

die Nadelgeschwindigkeit verringert werden, um optimale Ergebnisse zu 

erzielen. 

Abb. 10 Situation nach dem Füllen der Probenschleife (Vollschleifenfüllung) 

mit Luftsegment (A) oder ohne Luftsegment (B)


Partielle Schleifenfüllung 

Die Schaltsequenz für eine Injektion mit partieller Schleifenfüllung ist in 

den folgenden Abbildungen schematisch dargestellt: 

Abb. 11 Partielle Schleifenfüllung: Ausgangssituation 



Position. Die Probennadel ist mit der 

Luftnadel in das Vial eingeführt. Der 

Headspace Druck, angelegt über die 

äußere Luftnadel, verhindert das 

Auftreten von Dampfblasen während 

des Ansaugens. 

Die Spritze saugt das “flush volume” 

vom Probenvial in die Probenleitung 

um die Waschlösung zu entfernen. 

Abb. 12 Partielle Schleifenfüllung: Spülen der Nadel und Probenleitung 

Das Injektionsventil ist in die LOAD 

Position geschaltet und erzeugt so 

eine scharfe Probenfront am 

Schleifeneingang. 

Abb. 13 Partielle Schleifenfüllung: Injektionsventil in LOAD Position 

Abb. 14 Partielle Schleifenfüllung: Füllen der Probenschleife 

Das programmierte Injektionsvolumen 

wird in die Probenschleife gefördert


Abb. 15 Partielle Schleifenfüllung: Injektion der Probe 

Das Injektionsventil ist in der INJECT 

Position. Die Probenschleife ist jetzt 

Teil des Fließweges der mobilen 

Phase des HPLC Systems und die 

Probe wird zur Säule Transportiert. 

Die Analyse wird gestartet. 

Wenn eine Injektion je Vial durchgeführt wird oder nach jeder Injektion 

ein Waschprogramm vorgesehen ist, wird die Nadel direkt danach aus 

dem Vial gezogen und soweit programmiert gespült. 

Nach Ablauf der Analysenzeit wird die nächste Injektionssequenz der 

Serie gestartet. Falls die nächste Injektionssequenz aus dem gleichen 

Vial erfolgt und keine Waschroutine programmiert ist startet sie mit einem 

Spülgang mit 50% des programmierten Spülvolumens. In den anderen 

Fällen wird sie mit dem programmierten Waschvorgang starten. 

Luftsegment 

Ein Luftsegment kann zur Reduzierung des Spülvolumens genutzt 

werden. Dieses Luftsegment ist an der Front des Spülvolumens und wird 

nicht mit injiziert. Es beeinflusst also weder die Injektion noch die 

Analyse. Das Luftsegment kann in den Systemeinstellungen aktiviert 

werden (ON/OFF, siehe Seite 108). 

Bei einer Standardnadel muss das Spülvolumen mindestens 30 µl für 

Injektionen mit Luftsegment und 35 µl für Injektionen ohne Luftsegment 

betragen. Für höher viskose Proben sollte das Spülvolumen erhöht und 

die Nadelgeschwindigkeit verringert werden, um optimale Ergebnisse zu 

erzielen. 

Abb. 16 Situation nach dem Füllen der Probenschleife (partielle Schleifenfüllung) 

mit Luftsegment (A) oder ohne Luftsegment (B) 

µl Pick-up Injektionen 

Die Schaltsequenz für eine Injektion mit µl Pick-up ist in den folgenden 

Abbildungen schematisch dargestellt: 

Abb. 17 µl Pick-up Injektion: Ausgangssituation 



Position. Die Probennadel ist in das 

Vial mit der Transportlösung 

eingeführt. (Mobile Phase um 

Störungen im Chromatogramm durch 

zusätzliche Peaks der 

Transportlösung zu vermeiden).


Füllen der Probenleitung mit 

Transportlösung für die erste Injektion 

nach dem Spülen und Leeren des 

Pufferschlauches. 

Abb. 18 µl Pick-up Injektion: Füllen der Probenleitung mit Transportlösung 

Die Nadel wechselt vom Transportvial 

zum Probenvial. Das Ventil ist in die 

LOAD Position geschaltet. 

Abb. 19 µl Pick-up Injektion: Nadelwechsel zum Probenvial Injektionsventil in 

LOAD Position 

Abb. 20 µl Pick-up Injektion: Füllen der Probenschleife 

Das programmierte Injektionsvolumen 

wird in die Probenschleife gefördert 

Die Nadel wechselt zurück zum 

Transportvial. 

Die Probe wird quantitativ mit der 

Transportlösung in die Probenschleife 

gefördert. 

Abb. 21 µl Pick-up Injektion: Transport der Probe in die Probenschleife


Installation 

Abb. 22 µl Pick-up Injektion: Injektion der Probe 

Das Injektionsventil ist in der INJECT 

Position. Die Probenschleife ist jetzt 

Teil des Fließweges der mobilen 

Phase des HPLC Systems und die 

Probe wird zur Säule Transportiert. 

Die Analyse wird gestartet. 

Für die nächste Injektion wird das erste Ansaugen von Transportlösung 

übersprungen, falls kein Wachprozess programmiert worden ist oder der 

AS 3900 den Inhalt des Pufferschlauches in den Waste gefördert hat. In 

diesen Fällen wird die Sequenz komplett durchlaufen. 

Luftsegment 

Falls ein Luftsegment programmiert ist erscheint dieses an der Front des 

ersten Transportlösungsbereiches und an der Front des 

Probenbereiches. Das Luftsegment kann in den Systemeinstellungen 

aktiviert werden (ON/OFF, siehe Seite 108). 

Bei der µl Pick-up Injektion wird das direkt vor der Probe befindliche 

Luftsegment mit in das HPLC System injiziert. 

Abb. 23 Situation nach dem Füllen der Probenschleife (µl Pick-up Injektion) 

mit Luftsegment (A) oder ohne Luftsegment (B) 

Auspacken 

Die µl Pick-up Injektion erfolgt grundsätzlich ohne Luftdruck 

(headspace pressure) in den Vials, um Expansionen der 

Luftsegmente während der Nadelbewegungen zwischen den Vials 

zu vermeiden. 

Inspizieren Sie den AS 3900 auf Anzeichen von Beschädigungen. Für 

Transportschäden des AS 3900, ersichtlich an Schäden am 

Transportgebinde, ist der Transporteur verantwortlich. Benachrichtigen 

Sie diesen unverzüglich. Wird ein Anspruch von Ihnen angemeldet, wird 

der Transportcontainer vom Transporteur inspiziert. 

Für den Inhalt der Sendung siehe Packliste des Transportcontainers. 

Vor dem Betrieb soll der AS 3900 sich während einer Stunde an die 

Umgebungstemperatur anpassen können. 

Wir empfehlen, den Transportbehälter aufzubewahren. Er ist zu 

benutzen, falls ein Versenden des AS 3900, z.B. zu Servicezwecken, 

erforderlich wird. 

Heben Sie den AS 3900 nur an den in Abb. 24 angezeigten Stellen an.


Abb. 24 AS 3900 Positionen zum Anheben des Gerätes 

Heben Sie den AS 3900 mit beiden Händen an der Geräteunterseite 

oder mit einer Hand unter der Front und der anderen an der 

Geräterückseite an. 

Heben Sie den AS 3900 nicht an der Fronthaube an! 

Aufstellung des AS 3900 

Netzanschluss 

Der AS 3900 benötigt Labortischplatz von etwa 30 cm (12 inches) Breite 

und einen Netzanschluss (230 VAC oder 115 VAC, 50/60 Hz). 

Stellen Sie sicher, dass keine der Lüftungsöffnungen blockiert ist. Eine 

Unterbrechung der Ventilation kann zu Fehlfunktionen führen oder sogar 

zur Zerstörung elektronischer Bauteile. 

Stellen Sie den AS 3900 nicht an Orten mit signifikanter Staubeinwirkung, 

direkter Sonneneinstrahlung oder in unmittelbarer Nähe anderer 

Heizquellen auf. Vermeiden Sie Erschütterungen. 

Überprüfen Sie die Einstellung der Eingangsspannung an der 

Anschlussbuchse auf der Rückseite des AS 3900. Stellen Sie sicher, 

dass diese Einstellung mit Ihrer Netzspannung übereinstimmt. 

Verwenden Sie ausschließlich Anschlusskabel mit Schutzerdung. 

Falls die Spannung nicht übereinstimmt, ziehen Sie den 

Sicherungsträgerblock heraus und fügen ihn um 180° gedreht wieder 

hinein. 

Überprüfen Sie, dass die richtigen Sicherungen installiert sind und 

wechseln Sie diese gegebenenfalls aus. 

Alle Sicherungen müssen UL gelistet und CSA zertifiziert sein! 

Verwenden Sie für 115 VAC ±15%, zwei 5 AT- Sicherungen (slow). 

Verwenden Sie für 230 VAC ±15%, zwei 2,5 AT- Sicherungen (slow).


BRANDGEFAHR! 

VERWENDEN SIE NUR DIE ANGEGEBEN SICHERUNGEN! 

Wenn die Sicherungen und die Spannungseinstellung korrekt sind, 

schließen Sie das Netzkabel an. 

Kapillar- und Schlauchanschlüsse 

Herstellerseitig ist der AS 3900 mit einer 250 µl Spritze, einer 100 µl 

Probenschleife, einem 500 µl Pufferschlauch und einer Edelstahl- 

Probennadel ausgestattet. 

Abb. 25 zeigt eine schematische Darstellung aller Teile, die mit 

Flüssigkeit in Kontakt kommen. Sie finden Sie auch auf der Innenseite 

der Fronthaube. 

Für den Zugang zu den Flüssigkeitsanschlüssen müssen Sie die 

Fronthaube des AS 3900 öffnen. Dies setzt die Entfernung der Schraube 

an der rechten Seite der Haube voraus (Transportsicherung). 

Siehe Tabelle 1 für die Dimensionen der Standardanschlüsse. 

Um eine optimale Leistung des AS 3900 zu erreichen, muss eine 

geeignete Kombination von Spritze, Probenschleife und Pufferschlauch 

verwendet werden, siehe hierzu Abschnitt Nadel und Schlauchverbindung 

auf Seite 126. 

Abb. 25 Kapillar- und Schlauchanschlüsse AS 3900 

Tabelle 1: Installierte Standardleitungen des AS 3900 

Geräteteil Material und Dimensionen Label 

Standard Probennadel SS Schlauch; 70 mm x 0,65 mm OD x 

und -schlauch 

0,25 mm ID 

Tefzel Schlauch; 155 mm x 1 15 µl 

/16” OD x 

0,25 mm ID 

Pufferschlauch vom 

Injektions- zum 

Spritzenventil 

PTFE Schlauch; 640 mm x 1 /16” OD x 

1,0 mm ID 

500 µl 

Schlauch vom 

Spritzenventil zur 

Waschlösungsflasche. 


1,0 mm ID 

Schlauch vom 

Spritzenventil zur 

Abfallflasche. 


1,6 mm ID


HPLC Kapillaranschlüsse 

Um reproduzierbare Injektionen ausführen zu können, müssen folgende 

Anschlüsse zu Ihrem HPLC System erstellt werden: 

Verbinden Sie die HPLC Pumpe mit Port 1 des Injektionsventils. 

Verbinden Sie die HPLC Säule mit Port 6 of des Injektionsventils. 

Das Gerät wurde mit i-Propanol gespült. Stellen Sie Sicher, dass Ihre 

mobile Phase hiermit mischbar ist. Falls nicht, verwenden Sie ein 

Zwischenlösungsmittel, das sowohl mit i-Propanol, als auch mit Ihrer 

mobilen Phase mischbar ist. Lösen Sie hierzu die Verbindung zur Säule. 

Grundsätzlich wird der Inhalt der Probenschleife immer im Gegenfluss 

zur Säule transportiert. Verwechseln Sie deshalb nie die Anschlüsse 

von Pumpe und Säule am Injektionsventil. 

Abfallleitungen 

Allgemeiner Abfall (Siehe Abb. 3, pos. 7) 

Verbinden Sie den mitgelieferten Ableitungsschlauch mit dem rechten 

Ableitungsanschluss an der Front des Gerätes und führen Sie ihn zu 

einer Abfallflasche am Boden. Durch diese Leitung werden alle 

Flüssigkeiten aus der Waschposition abgeführt. 

Probenanteile, die nicht injiziert worden sind, werden durch diesen 

Schlauch abgeleitet. 

Spritzenabfall: (Siehe Abb. 25) 

Führen Sie den Spritzenabfallschlauch in eine kleine Flasche links dicht 

neben dem AS 3900. Solange nur Injektionsvolumina kleiner als die 

Probenschleife programmiert werden, enthält der Spritzenabfall 

ausschließlich die Waschlösung. 

Kondenswasser- und Leckageableitung: (Siehe Abb. 3, pos. 8) 

Durch den linken Schlauchanschluss erfolgt die Leckageableitung sowie 

die Kondenswasserableitung falls die Peltier Cool Option installiert ist. 

Ist diese installiert, sollte dieser Schlauchanschluss mit einem 

Auffanggefäß verbunden werden, das unterhalb des AS 3900 positioniert 

ist 

Stellen Sie Sicher, dass der Ableitungsschlauch nicht geknickt ist 

und dadurch die Kondenswasserableitung gestört ist. 

Waschlösung und Systemspülung 

Verwenden Sie eine saubere Flasche für die Waschlösung und stellen 

Sie diese links dicht neben den AS 3900. 

Wir empfehlen eine Mischung aus Wasser und i-Propanol 

(80/20 v /v%) oder Ihre jeweilige mobile Phase als Waschlösung zu 

verwenden. 

Vor dem Gebrauch sollte die Waschlösung mit Helium oder in einem 

Ultraschallbad entgast werden. 

Verwenden Sie auf keinen Fall Salz- oder Pufferlösungen als 

Waschlösung. Kristallisationen können zum Blockieren und zur 

Beschädigung des Gerätes führen.


Zur Füllung der Spritze und Schlauchverbindungen verfahren Sie wie 

folgt: 

• Führen Sie den Waschlösungsschlauch in die gefüllte 

Waschlösungsflasche. 

• Drücken Sie um zu den Wartungsfunktionen 

des AS 3900 zu gelangen. 

• Füllen Sie den Schlauch durch Betätigung der Funktionstasten 

und . 

- Mit wird ein voller Spritzeninhalt aus der Flasche 

in den Schlauch gezogen. 

- Mit wird der aktuelle Spritzeninhalt in die 

Spritzenabfallleitung geführt. 

• Wiederholen Sie beide Schritte, bis die Spritze und die 

Waschleitung komplett gefüllt sind. 

• Drücken Sie [Escape] um das Wartungsmenu zu verlassen. 

Drücken Sie danach um eine Standard Waschroutine 

durchzuführen. 

Spritze 

Der AS 3900 ist werkseitig mit 250 µl Spritze ausgestattet, kann aber 

auch mit einer 1000 µl Spritze versehen werden, Spritzenwechsel siehe 

Seite 129. 

Der AS 3900 liefert die besten Resultate, wenn absolute keine Luft in 

der Spritze verblieben ist. Verwenden Sie die Funktion um 

alle Luft aus der Spritze zu entfernen. Siehe auch Seite 97 für 

weitere Tipps zur Entlüftung. 

Vorbereitung der Vials 

Vialdimensionen 

Standardmäßig ist der AS 3900 mit einem 84 + 3 Probenteller 

ausgestattet, 84 1,5ml Probenvials und 3 10ml Vials für Reagenzien und 

Transportlösung. 

Alle verwendeten Vials müssen folgenden Dimensionen entsprechen: 

Maximale Höhe, einschließlich Verschluss: 47 mm 

Minimale Höhe, einschließlich Verschluss: 32 mm 

Maximaler Durchmesser: 

Standardprobenvial: 12 mm 

Reagenz- und Transportvial: 22 mm 

Großvolumen Probenvial: 22 mm 

Im Folgenden werden die Beispiele der Chromacolvials aufgeführt, die im 

AS 3900 verwendet werden können, siehe ANHANG A: Zubehör auf 

Seite 135. 

Chromacol Standardprobenvials 

Die folgenden Chromacolvials können im AS 3900 eingesetzt werden. 

Abb. 26 Standardprobenvials


Abb. 27 Konische Vials mit Träger 

Abb. 28 Plasticvials 

Zur Reduzierung des Probenvolumens von Standardprobenvials können 

die Chromacol Einsätze (02–MTV, 02–MTVWG oder 03–MTV) in 

Kombination mit den geeigneten Vials und Trägerringen oder Federn 

verwendet werden. 

Abb. 29 Standardprobenvial mit Einsatz 

Chromacol 2.5-CV Vials 

Auch die Chromacol 2.5-CV Vials können im AS 3900 verwendet werden. 

in diesem Fall muss der Vialtyp in den Systemeinstellungen, siehe Seite 

108 programmiert werden. 

Der AS 3900 verwendet zwei Ansaughöhen um Flüssigkeit aus den 

2.5-CV Vials anzusaugen. Deshalb muss die Nadel beim Start des 

AS 3900 gefüllt sein anderenfalls kann auch Luft angesaugt werden! 

Chromacol Reagenz- und Transportvials 

Das folgende Chromacolvial kann als Reagenz- und Transportvial 

eingesetzt werden, wie auch als Probenvial für den präparativen 24 

Positionen Probenteller. 

Abb. 30 Reagenz- und Transportvial


Verwenden sie keine unverschlossenen 10-CV Vials. Der Vialsensor 

des AS 3900 erkennt diese nicht als Vials! 

Verwenden Sie in Kombination mit den 10-CV Vials 

Chromacol: 

nur die Verschlusstypen: 

20-ST101 

Chromacol: 20-ACB (Blank aluminium cap) 

20-MCB (Blank tinplate cap) 

Der AS 3900 verwendet zwei Ansaughöhen um Flüssigkeit aus den 

10-CV Vials anzusaugen. Deshalb muss die Nadel beim Start des 

AS 3900 gefüllt sein anderenfalls kann auch Luft angesaugt werden! 

Eppendorf Mikrozentrifugengläser 

Eppendorf Mikrozentrifugengläser können anstelle der 

Standardprobenvials eingesetzt werden. 

Zur Vermeidung von Probenverschleppung darf die Luftnadel nicht 

mit der Probe in Kontakt kommen! 

Abb. 31 Eppendorf Mikrozentrifugengläser mit Träger 

Lassen Sie beim Einsatz von Eppendorf Mikrozentrifugengläsern 

keine Positionen des Probentellers dazwischen frei! Die Form der 

Gefäße kann das Erkennen der freien Positionen beeinträchtigen. 

Füllen und Verschließen der Vials 

Die Vials sollen mit einer engen Pipette gefüllt werden, um ein 

problemloses verdrängen der Luft zu gewährleisten. 

Füllen Sie die Vials nicht bis zur Kante. Es besteht sonst die Gefahr der 

Probenverschleppung durch die Luftnadel. 

Es ist wichtig, die Vials luftdicht zu verschließen. Anderenfalls kann der 

Kopfdruck zur Vermeidung des Auftretens von Luftblasen und des 

Verdunstens flüchtiger Substanzen nicht aufgebaut werden. 

Bei der Verwendung unverschlossener Vials ist die Erfüllung der 

Injektionsspezifikationen (Präzision) nicht gewährleistet. 

Verwenden Sie die Vials nicht mehrfach, ohne Kappe und Septum 

zu erneuern. 

Prüfen Sie die Dichtigkeit des Verschlusses. Wenn die Kappe sich leicht 

drehen lässt, ist sie nicht luftdicht verschlossen.


Beschickung des Probentellers 

Setzen Sie die Vials in die vorgesehenen Positionen des Tellers und 

geben Sie diese in die Methode der Injektionsserie ein, siehe Seite 117. 

Um zu allen Positionen des Probentellers Zugang zu haben, kann dieser 

von Hand gedreht werden, wenn der AS 3900 nicht in Betrieb ist. 

Steueranschlüsse I/O 

Der AS 3900 hat standardmäßig drei I/O Steueranschlüsse: 

• RS232 Anschluss zur seriellen Kommunikation unter Verwendung 

des Geräteprotokolls, siehe Abschnitt I/O auf Seite 111. 

• Kurzschlussausgangsanschluss (P1) 

• TTL Eingangsanschluss (P2) 

Der Hersteller übernimmt keinerlei Verantwortlichkeit für Schäden, 

die direkt oder mittelbar auf das Anschließen an solche Geräte 

zurückzuführen sind, die nicht den relevanten Sicherheitsstandards 

entsprechen! 

Kurzschlussausgangsanschluss (P1): 

Tabelle 2: Anschluss P1: Kurzschlussausgang 

Pin Nr.: Beschreibung: 










10 Alarm output Normally open 

11 Alarm output Common 

12 Alarm output Normally closed 




V MAX = 28 V DC / V AC , I MAX = 0.25 A 

Wenn das Injektionsventil von LOAD zu INJECT schaltet, wird ein Inject 

marker Signal (1 und 2) erzeugt. Der Alarm Ausgang wird aktiviert, 

wann immer ein Fehler am AS 3900 auftritt. 

Abb. 32 Kurzschlussausgang 

TTL Eingangsanschluss (P2) 

Dieser Anschluss kann vom Anwender in den Systemeinstellungen als 

active high oder active low TTL Eingang definiert werden. Das Next 

Injection Signal wenn der AS 3900 in Remote Control betrieben wird. 

Die Freeze Input und Stop Input können bei der Steuerung des 

AS 3900 durch andere Geräte genutzt werden.


Tabelle 3: Anschluss P2: TTL Eingänge 

Abb. 33 TTL Eingänge 

Pin Nr.: Beschreibung: 

1 Next Inject Input 

2 Signal Ground 

3 Freeze Input 

4 Stop Input 

5-9 Signal Ground 

Autosampler Autosampler 

Next Injection Signal: 

Dieses Eingangssignal startet bei ferngesteuertem AS 3900 die nächste 

Injektionsroutine. Nach deren Abarbeitung wartet das Gerät auf ein 

erneutes Next Injection Signal. 

Ausgehend vom „Ready Screen“ startet das Next Injection Signal die 

zuletzt gespeicherte Injektionssequenz. In diesem Falle führt der 

AS 3900 den kompletten Lauf aus, als ob er mit der [Start/Stop] 

ausgelöst wurde. Er wartet nicht auf ein neues Next Injection Signal. 

Haltefunktion der Analysenzeit Freeze input: 

Der AS 3900 friert den Ablauf der Analysenzeit ein, solange dieser 

Eingang aktiv ist. Ist der Freeze Input aktiv währen keine Analysenzeit 

läuft, führt der AS 3900 alle der Injektion vorgelagerten 

Probenbehandlungsoperationen (Misch- und Verdünnungsprogramme, 

Probenschleifenfüllung) aus. Die Injektion erfolgt jedoch erst, wenn der 

Eingang nicht mehr aktiviert ist. 

Injektionsabbruch, Stop Input: 

Beim Eingang dieses Signals bricht der AS 3900 die Injektionsserie sofort 

ab und kehrt zurück zum „Ready Screen“. Wird der AS 3900 fern 

gesteuert, wird der Lauf auch sofort unterbrochen, das Gerät bleibt 

jedoch im Remote Control Status, wobei es aber nicht auf ein Next 

Injection Signal reagiert, siehe Abschnitt Fernsteuerung auf Seite 120.

Installation 103 

Multi Link Anschlüsse 

Die MultiLink Anschlüsse dienen der Kommunikation des AS 3900 mit 

HPLC Softwarepacketen wie ChromGate ® and EuroChrom ® . 

S1 

ON DIP 

S2 

ON DIP 

OUT IN 

Abb. 34 Multi Link Anschlüsse 

Für eine erfolgreiche Kommunikation setzen Sie die DIP-Schalter S1 und 

S2 wie folgt: 

S1 1 2 3 4 

ON 

OFF 

S2 1 2 3 4 

ON 

OFF 

Port Beschreibung 

S1: OUT zu Nachgeschalteten Geräten 

S2: IN zum PC oder Vorgeschalteten Geräten 

Anschlussbelegung für den 9 Pin Anschluss: 

pin 2 TD Datentransport zum PC 

pin 3 RD Dateneingang vom PC 

pin 5 SG 

Signalerde (auch als GND in einigen 

Geräten gekennzeichnet)

104 Betrieb 

Betrieb 

Typographische Festlegungen 

KEYBOARD Tasten: 

Feste 

Funktionstasten: 

Variable 

Funktionstasten: 

Feste Funktionstasten erscheinen im 

Druckbild in eckigen Klammern: 

[Start/Stop], [Hold/Cont.], [Priority], [Series], 

[Methods], [System], [Escape], [Menu], 

[Clear] und [Enter]. 

Variable Funktionstasten werden zwischen 

spitzen Klammern beschrieben, wie: 

, . 

DISPLAY: 

Das LCD-Display des AS 3900 wird wie folgt dargestellt: 

Benutzung der Tastatur 

Abb. 35 Tastatur des AS 3900 

[MENU] 


TRAY:10°C 

 

Die 24 Tasten auf dem Bedienfeld des AS 3900 können in drei Gruppen 

eingeteilt werden: 

1. Zifferntasten 0 bis 9, die [Clear] Taste (CL) zum Löschen von 

Werten und die [Enter] Taste (E) zur Bestätigung von 

Eingabewerten. 

2. Feste Funktionstasten: 

- Drei Tasten zum Start und zur Steuerung des AS 3900 

während des Laufs: 

[Start/Stop], [Hold/Cont.], [Priority]. 

- Vier Tasten zum Programmieren des AS 3900: 

[Series], [Methods], [Menu], [System]. 

- Die [Escape] Taste zum Verlassen eines Menus zum nächst 

höheren Level bis hin zum „Ready Screen“

Betrieb 105 

3. Variable Funktionstasten: Tasten, die je nach aktuellem Menu 

eine andere Funktion auslösen, die jeweils in der untersten Zeile 

des Displays angezeigt wird. 

Feste Funktionstasten 

Direktfunktionen 

Tasten- 

Beschreibung 

funktion 

[Start/Stop Start und Stopp des automatischen Ablaufs. 

[Hold/Cont.] Anhalten und Fortsetzen des Countdown der 

Analysenzeit. Die Analysenzeit wird um den 

Zeitraum verlängert für den die Hold Funktion 

aktiv ist. 

[Priority] Unterbricht eine Runserie um eine 

Dringlichkeitsprobe zu injizieren und setzt die 

unterbrochene Serie danach mit der nächsten 

Injektion fort. 

[Series] Zugang zum Series Programmiermodus. In 

einer Serie werden die Vial-Positionen mit 

Methoden verknüpft. 

[Methods] Zugang zum Methoden Programmiermodus 

[Menu] Die [Menu] Taste ist nur aktiv, wenn dieses 

durch "[Menu]" in der rechten oberen Ecke des 

Displays angezeigt wird. Dann sind mehr als vier 

variable Funktionen zugänglich. Sie können jetzt 

mit der [Menu] Taste zwischen diesen 

Funktionen hin- und herschalten. 

[System] Zugang zum System Programmiermodus um 

die Systemeinstellungen des AS 3900 zu 

definieren. 

[Escape] Verlassen eines Menus zum nächst höheren 

Level. Beim Verlassen eines Programmierlevels 

werden die programmierten Parameter auf 

Konsistenz gecheckt und im Backup 

gespeichert. 

[CL] Clear; löscht den aktuellen Wert des 

programmierten Parameters. In einigen Fällen 

wird daraufhin NONE angezeigt. 

[E] Enter; checkt und speichert alle Werte der 

aktuellen Displayanzeige und wechselt zum 

nächst folgenden Programmiermenu. 

0 - 9 Zifferntasten zur Eingabe numerischer Werte, 

die mit [Enter] bestätigt und gespeichert 

werden. Der Parameter bleibt unverändert, 

wenn das Menu mit [Escape] verlassen wird. 

Nach dem Einschalten des AS 3900 führt dieser eine Startroutine durch. 

Es erfolgt ein Selbsttest und alle Parameter werden auf die 

vorgegebenen beziehungsweise zuletzt in das Backup gespeicherten 

Werte gesetzt. 

Danach zeigt der AS 3900 den „Ready Screen“: 

[MENU] 


TRAY:10°C 

106 Betrieb 

[Menu]: 

[MENU] 

READY (X.XX) OVEN:--°C 

TRAY:--°C 

 

In der untersten Zeile zeigt der „Ready Screen“ die variablen 

Funktionen, die von hieraus zur Verfügung stehen. Mit der [Menu] Taste 

können Sie zwischen den beiden Teilen des Menüs hin und her schalten. 

In der zweiten und dritten Zeile werden rechts die Ofentemperatur und, 

falls die Option installiert ist, die Probentellertemperatur angezeigt. 

Direkte Steuerfunktionen: 

 

Aktiviert manuell das Spülen der Spritze, der Nadel und aller Schläuche 

und Kapillaren des AS 3900. 

 

Das Wartungsmenu bietet drei Funktionen zur Steuerung des Nadelarms, 

der Spritze und des Injektionsventils. 

 

Diese Funktion dient der Erleichterung des Auswechselns der 

Probennadel, der Luftnadel und des Ventils, siehe Abschnitt Austausch 

der Probennadel auf Seite 128. 

Drücken Sie die Taste um den Nadelarm über den inneren 

Probenring zu positionieren. Durch drücken der Taste 

wird der Nadelarm wieder in die Homeposition bewegt. 

 

Diese Funktion dient der Erleichterung des Auswechselns der Spritze 

und der Füllung der Waschlösungsleitung, siehe auch Abschnitt Spritze 


Drücken Sie um die Spritze in die Endposition zu bewegen. 

Dabei wird Waschlösung in die Leitung und die Spritze gesaugt. Die 

Spritze verharrt in dieser Position, bis gedrückt wird, 

wodurch der Spritzenkolben wieder in die Homeposition geführt wird und 

der Spritzeninhalt in die Spritzenabfallleitung gedrückt wird. 

Nach dem Wechseln der Spritze können alle Leitungen auch wie oben 

beschrieben durch Betätigung der Taste gespült werden. 

 

Mit dieser Funktion können Sie das Injektionsventil schalten. Drücken Sie 

um von INJECT auf LOAD zu schalten. Aus der LOAD 

Position kann es zurück auf INJECT geschaltet werden durch Betätigen 

von . 

Sie können diese Funktion nicht mit [Escape] verlassen, solange sich 

das Ventil in der LOAD Position befindet. Sie müssen es zuvor erst 

wieder in die INJECT Position schalten. 

Zum Verlassen des Wartungsmenüs betätigen Sie erneut die Taste 

[Escape].

Betrieb 107 

 

Durch Drücken von gelangt der AS 3900 in den seriellen 

Kommunikationsmodus. In diesem kann der AS 3900 über ein RS232 

Interface durch einen PC und eine HPLC-Software gesteuert werden. 

SERIAL MODE 

 

Im seriellen Modus sind nur zwei variable Funktionstasten am AS 3900 

zugänglich. Die anderen sind deaktiviert. 

Der AS 3900 unterbricht den Lauf sofort und 

verlässt den seriellen Modus. 

Der AS 3900 verlässt den seriellen Modus 

und kehrt zurück zum „Ready Screen“ und 

kann wieder manuell gesteuert werden. 

Die Taste ist während eines Runs nicht 

aktiv. 

Nach einer Verwendung der Funktion soll auf jeden 

Fall eine Waschroutine durchgeführt werden, um alle Teile zu 

spülen. 

 

Nach Drücken von zeigt der AS 3900 das Temperatursteuermenu. 

für den Säulenthermostaten und (im Falle der installierten Cool- 

Option) der Probentellerkühlung. 

PROGRAMMING TEMPERATURE SETTINGS 

 

Zur Programmierung der Ofentemperatur drücken Sie : 

PROGRAMMING OVEN SETTINGS 

OVEN: OFF SETPOINT: 20°C 

 

Schalten Sie den Ofen durch betätigen der Taste ein und setzen 

Sie die Solltemperatur fest. Der Sollwert wird durch [Enter] bestätigt und 

gespeichert. 

Obwohl Temperaturen im Bereich von 0°C bis 60°C eingegeben 

werden können, kann der AS 3900 Ofen nur Temperaturen regeln, 

die mindestens 5°C über der Umgebungstemperatur liegen. 

Bei einem manuellen Start wird der im „Ready Screen“ auf ON 

gesetzte Ofen wieder auf OFF gesetzt, wenn in der Methode keine 

Starttemperatur angegeben ist. 

Ist dagegen eine Starttemperatur programmiert, wird der Ofen aber 

aktiviert, auch wenn er auf OFF gesetzt ist. Der AS 3900 wartet dann 

mit der Abarbeitung der Serie, bis die Starttemperatur ± 2 °C erreicht 

ist.

108 Betrieb 

Im Falle der installierten Cool-Option drücken Sie zur Programmierung 

der Probentellerkühlung : 

PROGRAMMING COOL SETTINGS 

COOLING: OFF SETPOINT: 04°C 

 

Schalten Sie die Kühlung durch betätigen der Taste ein und setzen 

Sie die Solltemperatur fest. Der Sollwert wird durch [Enter] bestätigt und 

gespeichert. 

Temperaturbereich der Kühlung: 4°C - 15°C 

Maximale Kühlkapazität: 20°C unter Raumtemperatur 

Zum Verlassen des Temperaturmenüs betätigen Sie erneut die Taste 

[Escape]. 

 

Nach dem Drücken von bietet der AS 3900 drei 

Dienstfunktionen an: 

Kopiert eine Methode 

Löscht eine Methode 

Das AS 3900 Logbuch, enthält Informationen 

über die Zahl der Schaltvorgänge des Injektionsund 

des Spritzenventils sowie der 

Spritzenkolbenhübe. 

 

In den Servicemodus des AS 3900 gelangen Sie über Drücken von 

und Eingabe des allerdings nur autorisierten Personen 

bekannten Servicecodes. 

Systemeinstellungen 

Drücken von [System] öffnet das Systemeinstellungsmenü des AS 3900, 

in dem alle Systemvariablen definiert werden. 

[Menu] 



 



TRAY:10°C 

 

Die Systemeinstellungen sind in fünf Unterabschnitte eingeteilt, die Sie 

über die entsprechenden Funktionstasten aufrufen können. Durch 

Betätigen der [Enter] Taste gelangen Sie Schritt für Schritt durch den 

jeweiligen Unterabschnitt. 

Nach korrekter Eingabe aller Werte gelangen Sie mit der [Escape] Taste 

wieder in das Systemmenü und durch ein weiteres [Escape] in den 

„Ready Screen“.

Betrieb 109 

Im Folgenden werden die definierbaren Parameter und ihre zulässigen 

Bereiche dargestellt: 

Allgemeine Einstellungen 

: 

Allgemeine 

Einstellungen 

Volume of 

installed loop 

Volume of 

tubing 

needle -> 

valve: 

Syringe volume: 

 

Bereich Beschreibung 

0-5000 µl Der AS 3900 nutzt das Volumen der 

Probenschleife für Berechnungen des 

Injektionsvolumens. 

0-999 µl Volumen der Verbindung der Nadel mit 

dem Injektionsventil. Es wird genutzt zur 

Berechnung der Spül- und 

Transportoperationen. 

Volumen der installierten Spritze. 

Syringe speed: Die Geschwindigkeit der 

Spritzenkolbenbewegung kann in drei 

Stufen festgelegt werden: 

NORMAL für Proben mit einer mit 

Wasser vergleichbaren Viskosität 

LOW für Proben mit einer höheren 

Viskosität 

HIGH für Proben mit einer niedrigeren 

Viskosität 

(Siehe Tabelle 4). 

Skip missing 

vials: 

 

 

Air segment: 

 

Headspace 

pressure: 

 

 

Definiert, ob der AS 3900 leere Vial- 

Positionen überspringen oder die Serie 

abbrechen soll. 

Abbrechen der Serie 

Überspringen der Position und 

weitere Abarbeitung der Serie. 

Injektion einer Probe mit bzw. ohne 

Luftsegment zwischen Probe und 

Spüllösung. 

ON Ansaugen eines 

Luftsegmentes von 5 µl vor dem 

Spülvolumen. Das Luftsegment wird nicht 

auf die Säule gebracht. 

OFF Injektion ohne Luftsegment 

Die µl Pick-up arbeitet grundsätzlich mit 

Luftsegment, das in diesem Falle aber 

auf die Säule gelangt. (Siehe auch Seite 

92) 

Der AS 3900 verwendet normaler weise 

den Headspace Druck in Kombination mit 

der Spritzenansaugung zum Transport 

der Probe in die Probenschleife. 

Falls aus einem Grunde kein Headspace 

Druck aufgebaut werden soll, kann er mit 

auch ausgeschaltet werden, 

wodurch jedoch die Genauigkeit und 

Reproduzierbarkeit des AS 3900 

eingeschränkt werden kann. Der 

Kompressor wird auch für die 

Waschvorgänge benötigt.

110 Betrieb 

Tabelle 4: Spritzengeschwindigkeit 

Spritzen- 

250 µl Spritze 1000 µl Spritze 

geschwindigkeit 

Ansaugen Fördern Ansaugen Fördern 

LOW 0,31 ml/min 3,4 ml/min 1.25 ml/min 5.5 ml/min 

NORMAL 0,62 ml/min 3,4 ml/min 2.50 ml/min 5.5 ml/min 

HIGH 0,94 ml/min 3,4 ml/min 3.75 ml/min 5.5 ml/min 

Spritzengeschwindigkeit 

beim Spülen: 

Methodeneinstellungen 

: 

3,4 ml/min 

13,7 ml/min 

Einstellung Bereich Beschreibung 


vials: 

Probentellereinstellungen 

: 

 

 

Bestimmt, ob Eichproben 

möglich sind. 


Tray type: Standard–Probenteller für 84 

Vials mit 1.5 ml und 3 Vials mit 

10 ml für spezielle Verwendung. 

Vials 85-87 werden bei µl Pickup 

Injektionen für Transportflüssigkeiten 

eingesetzt 

Für Mischprogramme gilt: 

Vial 85: 

Vial 86: 

Vial 87: 

Transportflüssigkeit 

Reagenz A 

Reagenz B 

Tray type: Probenteller mit 96 1.5 ml Vials 

Tray type: Probenteller mit 24 10 ml Vials 

Vial type Standardvials werden verwendet 

(nur bei 

oder 

Trays) 

Nur 2.5 ml Vials werden 

verwendet (Chromacol 2.5-CV, 

12 X 40 mm) 

Mischprogramme und die µl Pick-up Injektionen können nur mit dem 

Standard–Probenteller ausgeführt werden. Bei der Auswahl 

anderer Probenteller sind diese Funktionen nicht zugänglich.

Betrieb 111 

I/O Konfiguration 

: 


Injection marker 

pulse length: 

Input edge next 

injection: 

Freeze input 

active: 

Reset outputs 

after last Series: 

0.0 - 2.0 sec. Definiert die Länge des Pulses für die 

Injektionsmarkierung, normal 1,0 sec. 

 

 

 

 

 

 

Definiert ob die an- oder absteigende 

Flanke des next injection Signals 

auslösend wirkt. 

Definiert den Level für die Aktivierung 

der Freeze Funktion. 

Definiert ob nach dem Ende einer Serie 

ein Output Reset erfolgen soll oder 

nicht. 

Wenn der Freeze Input HIGH gesetzt ist und der Input mit keinem 

anderen Gerät verbunden ist, wird der Zeitcountdown eingefroren. 

Als Konsequenz: Der AS 3900 startet nicht. 

Serielle Kommunikation 

: 


Device identifier: 60-69 Die Geräte ID wird im Kommunikationsprotokoll 

der jeweiligen Software verwendet. 

Prep-Modus Einstellungen 

: 


Use Prep Mode: 

 

Definiert ob der AS 3900 ein Standardgerät 

ist, oder ein Prep mode Autosampler. 

Wenn der Prep-Modus ausgewählt ist, sind einige 

Systemeinstellungen nicht mehr programmierbar. Sie sind dann auf 

einen vorgegebenen Wert gesetzt. Siehe ANHANG D: AS 3900, P auf 

Seite 147. 

Im Prep-Modus werden die Mischfunktion, die Vollschleifen- und die 

µl Pick-up Injektion automatisch deaktiviert. 

Die folgende Tabelle gibt eine Übersicht zu den im Prep-Modus fest 

programmierten Systemeinstellungen. 

Tabelle 5: Fest programmierte Systemeinstellungen im Prep-Modus 

Allgemeine Systemeinstellungen 

Volume of the installed loop 10000 µl 

Syringe volume 2500 µl 

Air segment 

Methoden Einstellungen 

 

Use of calibration vials 

Probenteller Einstellungen 

 

Tray type 

Zur Umrüstung eines Standardgerätes zum AS 3900 mit Prep-Option 

siehe ANHANG D: AS 3900, P auf Seite 147.

112 Betrieb 

Injektionsvolumen des AS 3900, Präparativ 

Stellen Sie sicher, dass das programmierte Injektionsvolumen nicht 

größer als 50% der installierten Probenschleife ist. Anderenfalls 

kann die spezifizierte Genauigkeit und Reproduzierbarkeit nicht 

gewährleistet werden. 

Methodenprogrammierung 

Der AS 3900 bietet die Möglichkeit, neun Methoden zu programmieren. 

Abhängig von den Erfordernissen kann jede Methode enthalten: 

• Injektionsprogramm Enthält den Injektionstyp, das Spülvolumen, 

das Injektionsvolumen, die Anzahl der 

Injektionen je Vial und die Analysenzeit. 

• Waschprogramm Enthält Informationen über das 

Waschprogramm des AS 3900. 

• Mischprogramm Enthält Informationen über die 

Probenbehandlung vor der Injektion. 

• Ereignisprogramm (Timed events program) Enthält 

Informationen über Zusatzeinrichtungen und 

die Temperatur des Säulenofens während 

der Analyse. 

Jede Methode ist eine beliebige Kombination der obigen Parameter und 

wird als solche unter seiner Methodennummer gespeichert. 

Drücken Sie [Method], um in den Methodenprogrammiermodus zu 

gelangen. 

Nach Eingabe und Bestätigung der Methodennummer geht der AS 3900 

in den Hauptscreen der Methodenprogrammierung: 

PROGRAMMING METHOD NUMBER: 1 (I W M T) 

SELECT SECTION TO PROGRAM 

 

Von hier aus sind die einzelnen Sektionen durch Betätigung der 

entsprechenden Funktionstasten zugänglich. 

Existierende Programmsektionen der ausgewählten Methode werden in 

der ersten Zeile rechts in Klammern angezeigt: I für Injektionsprogramm, 

W für Waschprogramm, M für Mischprogramm und T für 

Ereignisprogramm. 

Nach Abschluss der Programmeingabe verlassen Sie das Menü mit 

[Escape]. Die Methoden werden netzunabhängig im Batterie Backup 

gespeichert.

Betrieb 113 

Injektionsprogramm 

 

METHOD NUMBER: 1 SECTION: INJECTION 

INJECTION MODE: PARTIAL LOOPFILL 

 

Wählen Sie den gewünschten Injektionsmodus oder falls keine 

Festlegung in dieser Methode erforderlich ist, siehe auch Abschnitt 

Injektionsprinzip. 

Vollschleifeninjektion, siehe Seite 89 

Partielle Schleifenfüllung, siehe Seite 91 

µl Pick-up Injektion, siehe Seite 92 

Kein Injektionsprogramm in dieser Methode 

Je nach ausgewählter Injektionsmethode fragt der AS 3900 folgende 

Parameter ab: 

Parameter: Bereich: 

Flush 

volume: 

Number of 

injections 

per vial: 

Injection 

volume: 

Analysis 

time: 

0-9999 µl Menge der Probe zur Füllung der 

Nadel und der Verbindung zum 

Injektionsventil (nicht das 

Schleifenvolumen). Nicht für µl Pickup 

Injektionen. 

1-9 Anzahl der Injektionen aus dem 

gleichen Vial. 

0-2500 µl Nicht für Vollschleifeninjektionen 

Max. 9:59:59 Die Analysenzeit beginnt mit dem 

Schalten des Ventils von LOAD auf 

INJECT. 

Die vollen Spezifikationen des AS 3900 werden nur garantiert, wenn 

das Flushvolumen mindestens zweimal das Volumen von Nadel und 

Verbindung zum Injektionsventil beträgt! 

Das maximal mögliche Injektionsvolumen beträgt: 

Full loop: Nicht programmierbar, es ist gleich dem 

Schleifenvolumen, es wird jedoch eine größere 

Probenmenge zur vollständigen Schleifenfüllung 

erforderlich: 

3 x Schleifenvolumen für Schleifen 500 µl 

Partial loop 50% des programmierten Schleifenvolumens. 

fill: 

µl Pick-up: ½ x Schleifenvolumen - 1½ x Verbindung zum 

Injektionsventil 


[Escape].

114 Betrieb 

Waschprogramm 

 

METHOD NUMBER: 1 SECTION: WASH 

WASH BETWEEN: INJECTION 

 

Ein Waschprogramm beinhaltet zwei Parameter: 

Paramete Bereich: 

r: 

Wash 

between: 

Number of 

syringe 

volumes: 

Nadel und Verbindung zum Ventil 

werden nach jeder Injektion gespült. 


werden nach jedem Vial gespült. 


werden nach jeder Serie gespült. 

Es wird keine Spülung durchgeführt. 

0-9 Festlegung des Waschvolumens in 

Anzahl der Nadelfüllungen. 

Falls das Waschprogramm der einzige programmierte Teil einer 

Methode ist, wählen Sie wash between Series. Anderenfalls wird die 

Serie mit dieser Methode nicht ausgeführt. 


[Escape]. 

Ereignisprogramm (Timed events program) 

Nach dem Drücken von fordert der AS 3900 eine 

Bestätigung, dass in dieser Methode Zeitereignisse verwendet werden 

sollen. Falls Sie mit antworten zeigt der AS 3900 folgenden 

Screen. 

METHOD NUMBER: 1 SECTION: TIMED EVENTS 

1. AUX-1 ON AT TIME: 0:00:00 

 

Falls Sie gewählt haben werden keine Zeitereignisse in dieser 

Methode verwendet und der AS 3900 kehrt zum vorhergehenden 

Menü zurück. Der Inhalt (bereits programmierte Zeitereignisse) der 

Methode werden nicht gelöscht. Sie stehen wieder zur Verfügung, 

wenn das nächste Mal die Option gewählt wird. 

Das Zeitereignisprogramm ist eine Liste von 20 programmierbaren 

Ereignissen um andere Geräte via die beiden Zusatzausgänge 

(Kurzschluss) zu steuern oder um neue Temperatureinstellungen des 

Ofens zu bewirken. Jedes Ereignis wird zeitlich programmiert. 

Bezugspunkt ist der Moment der Injektion (Schalten des Ventils). 

Drücken Sie [Clear] um programmierte Zeiten zu löschen. Die Anzeige 

ist daraufhin NONE. 

Tabelle 6 zeigt eine komplette Liste. Mit [ENTER] kommen Sie Schritt für 

Schritt in die nächsten Zeilen oder mit einer der Funktionstasten jeweils 

in die erste Zeile der entsprechenden Funktion.

Betrieb 115 

Tabelle 6: Screenanzeige der Zeitereignisprogrammierung. 

1. AUX-1 ON AT TIME: 0:00:00 


2. AUX-1 ON AT TIME: 0:00:00 


3. AUX-1 ON AT TIME: 0:00:00 


4. AUX-1 ON AT TIME: 0:00:00 


1. AUX-2 ON AT TIME: 0:00:00 


2. AUX-2 ON AT TIME: 0:00:00 


3. AUX-2 ON AT TIME: 0:00:00 


4. AUX-2 ON AT TIME: 0:00:00 


INITIAL OVEN SETPOINT: 00°C 



END OF TIMED EVENTS AT: 0:00:00 

Obwohl Temperaturen im Bereich von 0°C bis 60°C eingegeben 

werden können, kann der AS 3900 Ofen nur Temperaturen regeln, 

die mindestens 5°C über der Umgebungstemperatur liegen. 

Wenn der Ofen im „Ready Screen“ (Siehe Seite 107) auf ON gesetzt 

worden ist, wird der Ofen trotzdem auf OFF gesetzt, falls keine 

Starttemperatur angegeben ist. 

Der Ofen wird aktiviert, auch wenn er auf OFF gesetzt ist, aber eine 

Starttemperatur programmiert ist. Der AS 3900 wartet dann mit der 

Abarbeitung der Serie, bis die Starttemperatur ± 2 °C erreicht ist. 

Nach Durchführung der Serie wird der Ofen wieder auf OFF gestellt 

wenn entweder die letzte Serie erreicht oder für die folgende Serie 

keine Starttemperatur programmiert ist. 

Wenn die Starttemperatur mit NO programmiert ist, werden keine 

weiteren Zeilen für Temperaturänderungen angezeigt. 

Die END Zeit hat eine höhere Priorität als die programmierte 

Analysenzeit. 

Die nächste Injektion wird gestartet, sobald und nicht bevor das 

Ereignisprogramm beendet ist. 

Es können zwar nach der Endzeit liegende Ereignisse programmiert 

werden, sie werden aber nicht während des Runs ausgeführt. 


[Escape].

116 Betrieb 

Mischprogramm 

Nach dem Drücken von fordert der AS 3900 eine Bestätigung, 

dass in dieser Methode ein Mischprogramm verwendet werden soll. Falls 

Sie mit antworten zeigt der AS 3900 folgenden Screen. 

METHOD NUMBER: 1 SECTION: MIX LINE:01 

END OF MIX 

 

Falls Sie gewählt haben wird kein Mischprogramm in dieser 

Methode verwendet und der AS 3900 kehrt zum vorhergehenden 

Menü zurück. Der Inhalt (bereits programmierte 

Mischprogrammschritte) der Methode werden nicht gelöscht. Sie 

stehen wieder zur Verfügung, wenn das nächste Mal die Option 

gewählt wird. 

Das Mischprogramm besteht aus maximal 15 Zeilen einschließlich der 

Zeile END OF MIX. 

Zum Wechseln zwischen den Programmzeilen benutzen Sie die 

und Funktionstasten. 

Zum Löschen eines angezeigte Schrittes drücken Sie die 

Taste. 

Drücken Sie [Enter] um einen angezeigten Schritt zu bestätigen. 

Mit fügen Sie eine Zeile vor der angezeigten ein. 

METHOD NUMBER: 1 SECTION: MIX STEP:01 

SELECT ACTION: 

 

Es können drei Aktionstypen programmiert werden: 

, und 

: xxx µl from 

 

 

 

to 

 

Ziehe eine programmierte Menge von xxx µl (max. = Spritzenvolumen) 

aus dem Probenvial, , einem Reagenzvial, oder 

, oder aus der Waschlösungsflasche, , und 

überführe sie in das Probenvial, , oder in das Zielvial, 

. 

Zur Vermeidung von Probenverschleppungen zieht der AS 3900 

zusätzlich 25% des programmierten Volumens zum Spülen von 

Nadel und Schlauchverbindung. 

Die Ansaug- und Dosiergeschwindigkeit wird durch die verwendete 

Spritze und die in den Systemeinstellungen ausgewählte 

Spritzengeschwindigkeit bestimmt, siehe Seite 108. 

Die Reagenzien und die Transportlösung müssen in folgende 

Positionen des Probentellers gestellt werden: 

Transportlösung: Vial 85 

Reagenz A: Vial 86 

Reagenz B: Vial 87

Betrieb 117 

Beispiel: Programmieren Sie die Mischung und stellen Sie die Reagenz- und 

Transportlösungsvials in die entsprechenden Positionen: 

Die Zeile ADD 200 µl from Reagent A to Destination 

führt zu folgenden Aktionen: 

- Ansaugen eines Luftsegmentes von 5 µl zur Trennung der 

Waschlösung vom Reagenz A im Pufferschlauch. 

- Ansaugen von 50 µl Reagenz A zur Spülung der Nadel und des 

Verbindungsschlauches 

- Entleerung der Spritze in die Waste-Position 

- Ansaugen von 200 µl Reagenz A und Dosierung in das Zielvial 

- Spülung der Nadel und des Verbindungsschlauches mit 

Waschlösung. 

: x times with xxx µl 

Programmierung eines Mix-Schrittes: Angabe der Anzahl (x) wie oft eine 

programmierte Menge (xxx µl) vom Zielvial angesaugt und in dieses 

wieder dosiert wird. Wird kein Zielvial angegeben, erfolgt die Mischung im 

Probenvial 

Beispiel: Die Zeile MIX 3 times with 250 µl. 

führt zu folgenden Aktionen: 

- Ansaugen eines Luftsegmentes von 50 µl zur Trennung der 

Waschlösung von der zu mischenden Lösung im Pufferschlauch. 

- Entleerung der Spritze in die Waste-Position 

- Ansaugen von 250 µl und Dosierung zurück in das Vial 

- Zweimalige Wiederholung der letzten Aktion. 

- Spülung der Nadel und des Verbindungsschlauches mit 

Waschlösung. 

: x:xx:xx 

Warten für einen programmierten Zeitraum bevor der nächste Schritt 

durchgeführt wird (Reaktionszeit). 


[Escape]. 

Programmierung der Runsequenz; Serie 

In einer Serie oder Runsequenz werden Methoden mit Vial-Positionen 

verknüpft. 

[Series] 

PROGRAMMING SERIES 

SERIES NUMBER: 1 

Geben Sie eine Nummer (1-9) ein und drücken Sie [Enter]. 

Der erste Parameter einer Serie ist die Methodennummer. Abhängig von 

den Systemeinstellungen und vom Inhalt der ausgewählten Methode 

reagiert der AS 3900 mit einer Reihe von Fragen. Drücken Sie [Enter] 

um schrittweise die Fragen anzuzeigen. 

Geben Sie einen Zahlenwert (1-9) ein oder drücken Sie [Clear] oder 0 

um NONE auszuwählen und drücken Sie dann [Enter] um zum nächsten 

Menüpunkt zu gelangen. 

• Method number: 1-9 oder NONE

118 Betrieb 

Der Wert kann für leere Serien verwendet werden. Sie wird 

dann bei der Abarbeitung programmierter Serien übersprungen. 

Dies ist ein einfacher Weg, eine Serie zu entfernen, trotzdem aber 

die Möglichkeit zu haben, eine Serie bei laufendem Gerät wieder zu 

aktivieren, siehe Seite 121. 

Besteht die ausgewählte Methode nur aus Waschprogramm und/oder 

Ereignisprogramm, ist hiermit der Dialog beendet. 

Wenn die Verwendung von Kalibrationsvials in den Systemeinstellungen 

aktiviert ist (siehe Seite 108) und die Methode kein Mischprogramm 

beinhaltet, zeigt der AS 3900 folgenden Dialog: 

Use calibration vials (siehe Abb. 36) 

: • First calibration vial: 

• Last calibration vial: 

• No of samples between calibrations 

Der Bereich der Kalibrationsvials ist: 



Wenn in der Methode ein Mischprozess mit einem Zielvial programmiert 

ist, Fragt der AS 3900 nach der Position des ersten Zielvials. Das letzte 

Zielvial wird auf Basis der Probenvials automatisch ermittelt. 

• First destination vial: 

Abb. 36: Eine Runsequenz mit 3 Kalibrationsvials zwischen jeweils 5 Probenvials 

(erstes Kalibrationsvial: 1, letztes Kalibrationsvial: 3 und Anzahl der 

Proben zwischen den Kalibrierungen: 5) 

Die Proben- und Kalibrationsvials müssen in nicht unterbrochenen 

Gruppen angeordnet sein. Sie dürfen sich nicht überlappen. 


[Escape]. Den „Ready Screen“ erreichen Sie dann durch erneutes 

Drücken von [Escape]. 

Serien werden nicht im netzunabhängigen Batterie Backup 

gespeichert! 

Nach dem Einschalten sind die Serien leer (method: ).

Betrieb 119 

Betrieb 

Start und Stopp 

Um einen Lauf des AS 3900 zu starten, drücken Sie [Start/Stop] am 

„Ready Screen“. 

Der AS 3900 fragt dann nach der Seriennummer, mit der er beginnen soll 

und nach der letzten Seriennummer. 

Geben Sie die Nummern ein und bestätigen Sie diese mit [Enter]. 

EXECUTE SERIES 1 

 

Der AS 3900 kann direkt durch Drücken der Taste oder im 

Remote Control Modus durch Drücken der Taste, siehe 

Abschnitt Fernsteuerung unten. 

Falls ein Mischprogramm oder eine µl Pick-up Injektion vorgesehen 

ist, vergewissern Sie sich das die Transport- und/oder Reagenz- 

Vials vollständig gefüllt sind. 

Anderenfalls kann der AS 3900 Luft ansaugen, die über die 

Probenschleife in Ihr Chromatographiesystem gelangen kann, siehe 

auch Seite 99. 

Zurück zum „Ready Screen“ ohne den AS 3900 zu starten, drücken Sie 

[Escape]. 

Während des Laufs zeigt der AS 3900 folgende Informationen: 




AUX: 12 

In der ersten Zeile werden der generelle Status und die abgelaufene 

Analysenzeit seit dem Start angezeigt. 

Die zweite Zeile zeigt die Nummer der aktuell laufenden Serie die 

Nummer des Probenvials, die aktuelle Injektionsnummer, die Gesamtzahl 

der Injektionen und die aktuelle Ofentemperatur. “- -“ zeigt an, das der 

Ofen in OFF Stellung ist. 

In der dritten Zeile wird die Nummer der laufenden Methode angezeigt. 

Diese wird auch verwendet, wenn eine Probe mit Priorität eingeschoben 

wird, siehe Abschnitt Probenpriorität. 

Bei installierter und eingeschalteter Probentellerkühlung wird die aktuelle 

Probentellertemperatur angezeigt. “- -“ bedeutet, dass die Kühlung nicht 

installiert oder ausgeschaltet ist (OFF). 

Die vierte Zeile gibt schließlich Auskunft über zusätzliche Steuerereignisse, 

falls solche in der Methode programmiert sind. Hinter “AUX:” 

angezeigte Zahlen geben an, dass diese Zusatzereignisse aktiv sind. 

Serien werden immer in aufsteigender numerischer Reihenfolge 

abgearbeitet, nicht besetzte Seriennummern werden übersprungen. 

Eine laufende Methode kann jeder Zeit durch Drücken von [Start/Stop] 

abgebrochen werden. Der AS 3900 führt dann eine Abschlussprozedur 

zur Entfernung der Probe aus der Pufferleitung durch. Sie wird mit einer 

Standardwaschroutine beendet.

120 Betrieb 

Fernsteuerung 

Nach dem wie oben beschriebenen Programmieren des abzuarbeitenden 

Serienbereiches drücken Sie um die weitere Steuerung des 

AS 3900 im Remote Control Modus zu betreiben. Der AS 3900 arbeitet 

jetzt im Slavemodus eines anderen Gerätes und erwartet das Signal 

Next Injection Input. 

Mit dem Eingangssignal Nächste Injektion startet der AS 3900 die 

nächste Injektion der aktuellen Serie. War diese schon beendet, wird die 

erste Injektion der nächsten Serie gestartet und alle weiteren 

programmierten Injektionen und Serien werden abgearbeitet. Während 

dieser Zeit zeigt der AS 3900 die gleichen Informationen wie ohne 

Fernsteuerung: 




r AUX: 12 

Zusätzlich weist ein blinkendes “r” in der linken unteren Ecke auf die 

Fernsteuerung (Remote Control) hin. 

Zum Abschluss der bearbeiteten Serien zeigt der AS 3900: 

SERIES COMPLETED VIA REMOTE CONTROL 

Zum „Ready Screen“ gelangen Sie jetzt wieder durch [Escape]. Von 

hieraus können Sie den AS 3900 wieder normal mit [Start/Stop] neu 

starten. 

Solange SERIES COMPLETED VIA REMOTE CONTROL angezeigt wird, 

kann der AS 3900 mit einem Eingangssignal Nächste Injektion 

gestartet werden. 

Probenpriorität 

Für besonders dringliche Proben bietet der AS 3900 die Möglichkeit, 

diese zu analysieren, ohne die laufende Serie zu stoppen. 

Drücken Sie [Priority], um in den Prioritätsprogrammier-Modus zu 

gelangen. 

Geben Sie hier die Position der Prioritätsprobe ein. 

PROGRAMMING PRIORITY 

PRIORITY SAMPLE: 12 

Kehren Sie mit [Escape] zum Runscreen zurück. Die Prioritätsprobe wird 

dann nach Beendigung der laufenden Probe injiziert und zwar mit deren 

Methode. 




p AUX: 12

Wartung 121 

Wartung 

Ein blinkendes “p” in der linken unteren Ecke weist auf die Aktivierung 

einer Prioritätsprobe hin. 

Solange das “p” blinkt, kann die Prioritätsprobe geändert oder 

entfernt werden. 

Der Prioritätsmodus ist nur während einer laufenden Methode 

zugänglich. Voraussetzung ist auch, dass diese kein 

Mischprogramm beinhaltet. 

Falls in der aktuellen Serie Kalibrationsvials verwendet werden, wird 

die Prioritätsprobe in das Kalibrierintervall einbezogen. 

Programmierung während des Laufs 

Auch während des Laufs können Serien und Methoden am AS 3900 

programmiert werden: 

Drücken Sie [Series] oder [Methods]. 

The programming possibilities are the same as described in sections 

Methodenprogrammierung und Programmierung der Runsequenz; Serie. 

Geänderte Serien und Methoden werden erst nach Ablauf der 

aktuellen Serie aktiv. Die laufende Serie wird von den Änderungen 

nicht beeinflusst. 

Es ist nicht möglich, einer laufenden Serie Proben hinzuzufügen. Sie 

können jedoch bisher leere Serien zwischen der ersten und letzten Serie 

mit Proben aktivieren. Solange eine Serie noch nicht gestartet ist, kann 

sie (um-)programmiert werden. 


Der AS 3900 ist mit einem Valco, einem Rheodyne Ventil mit Schnellmontageanschluss 

oder einem biokompatiblen Ventil mit 

Schnellmontageanschluss ausgestattet. 

Austausch des Injektionsventils 

Der AS 3900 ist zur Vereinfachung des Ventilaustausches mit einem 

Schnellmontageventil ausgestattet. 

Zum Ausbau des Ventils siehe Abb. 37: 

A 

Abb. 37: Ventilausbau 

A

122 Wartung 

Abb. 38: Ventileinbau 

• Entfernen Sie alle Kapillaranschlüsse vom Ventil. Die Demontage 

der Probenschleife ist nicht erforderlich. 

• Bringen Sie den Nadelarm in die Frontposition, drücken Sie dazu 

, siehe Abschnitt Direktfunktion 


• Drücken Sie die Halterungen “A” nach hinten um das Ventil zu 

lösen. 

• Ziehen Sie das Ventil unter Drehung entgegen dem Uhrzeigersinn 

heraus. 

Zum Einbau des Ventils siehe Abb. 38: 

• Halten Sie das Ventil zum Einbau mit Port 1 nach oben. 

• Führen Sie das Ventil in die Halterung ein und drehen Sie es bis 

zum Einschnappen im Uhrzeigersinn. 

• Stellen Sie die Kapillarverbindungen wieder her. 

• Stellen Sie durch Aus- und Einschalten des AS 3900 sicher, dass 

das Ventil in der INJECT Position ist. 

• Führen Sie die Standardwaschroutine durch. 

Valco Cheminert ® Module C2 Ventil 

Reinigung und Rotoraustausch 

(Technical Note 810, Valco Instrument Co. Inc.) 

Die Reinigung des Ventils wird üblicherweise durch Spülen aller Kanäle 

mit einem geeigneten Lösungsmittel vollzogen. 

Bauen Sie das Ventil nicht auseinander, wenn eine Fehlfunktion des 

AS 3900 nicht eindeutig auf das Ventil zurückzuführen ist. 

Demontage 

Siehe Abb. 39, Explosionsdarstellung. 

• Lösen Sie mit einem 9/16 Inbusschlüssel die Kopfschrauben, die 

die Ventilkappe halten. 

• Um Beschädigungen der Dichtfläche zu vermeiden, legen Sie die 

Kappe nie mit diesen nach unten ab. 

• Nehmen Sie den Rotor vorsichtig vom Antrieb ab. 

• Untersuchen Sie die Rotordichtung auf Kratzer. Sind solche mit 

bloßem Auge zu erkennen, muss der Rotor ausgewechselt

Wartung 123 

werden. Sind keine Kratzer zu erkennen, reinigen Sie alle Teile 

vorsichtig mit einem geeigneten Lösungsmittel. Am häufigsten sind 

Probleme in der HPLC auf die Bildung von Pufferkristallen 

zurückzuführen. Diese sind gewöhnlich wasserlöslich. Der Rotor 

braucht nicht getrocknet zu werden. 

DRIVER 

Abb. 39: Ventil, Explosionsdarstellung 

ROTOR 

CAP 

Zusammenbau 

• Setzen Sie den Rotor mit den eingravierten Fließkanälen nach 

außen in den Antrieb ein. Die Abmessungen sind asymmetrisch 

gehalten, um die richtige Position sicher zu stellen. 

• Setzen Sie die Kappe auf. Fügen Sie die beiden Kopfschrauben 

ein und ziehen sie leicht an. Ziehen Sie sie nicht zu fest an, sie 

haben nur eine Haltefunktion und beeinflussen die Dichtungskräfte 

nicht. Diese stellen sich automatisch ein, wenn die Kappe am 

Ventilkörper anliegt. 

• Prüfen Sie das Ventil, indem Sie das System unter Druck setzen. 

Wenn es den Druck nicht hält, muss es zur Reparatur an Valco 

eingeschickt werden. 

Bedienungsanleitung für das Rheodyne Ventil Modell 7739 

Kopie der Rheodyne Operating Instructions. 

Beschreibung 

Das Modell 7739 ist ein Zwei-Positionen, sechs Port Edelstahlventil. 

Abb. 40 zeigt das Flussdiagramm des Ventils. Die sechs kleinen Kreise 

symbolisieren die sechs Ventilports. Die Bögen stehen für die 

Verbindungspassagen im Rotor. Vor- und Rückwärtsdrehungen um 

jeweils 60° bringen das Ventil jeweils in die andere Schaltposition. 

Abb. 40: Flussdiagramm des Ventils Modell 7739 

Spezifikationen 

• Maximale Temperatur: 100°C. 

• Maximaler Druck: 345 bar (5000 psi). 

• Die benetzten Teile sind aus Edelstahl und inertem Polymer.

124 Wartung 

Wartung 

Bei normalem Gebrauch sind mehrere zehntausend Schaltungen ohne 

Probleme möglich. Hauptgrund für eventuelle frühere Fehler (zu 

erkennen an auftretenden Undichtigkeiten) sind abrasive Teilchen in der 

Probe oder der mobile Phase, die zu Kratzern auf der Rotordichtung 

führen können. 

Zum Austausch der Rotor- und der Isolierungsdichtung verfahren Sie wie 

folgt, vergleiche Abb. 41: 

• Entfernen Sie die drei Statorschrauben mit einem 9/16” 

Inbusschlüssel. 

• Entfernen Sie den Stator und den Statorring vom Ventilkörper. 

• Ziehen Sie die Rotordichtung von den Stiften ab. 

• Entfernen Sie die Isolierungsdichtung. 

• Setzen Sie die neue Isolierungsdichtung ein. Die Federseite muss 

der Rotordichtung abgewandt sein. 

• Setzen Sie die neue Rotordichtung. Die drei Stifte gewährleisten 

die Richtige Ausrichtung der Rotordichtung. Die Fließkanäle 

müssen zum Stator zeigen. 

• Setzen Sie den Statorring auf, so dass der Führungsstift des 

Ringes in die entsprechende Bohrung passt. 

• Setzen Sie den Stator auf den Ventilkörper, so dass der 

Führungsstift in die entsprechende Bohrung passt. 

• Setzen Sie die Statorschrauben ein und ziehen Sie sie 

gleichmäßig und alternierend an. 


Body 

Rotor Pins 


Rotor Seal 

Stator Ring 

Stator 

Location Pin 

Stator 

Stator Screws 

Abb. 41: Ventil, Explosionsdarstellung Modell 7739

Wartung 125 

Bedienungsanleitung für das Rheodyne Ventil 9740 

Kopie der Rheodyne Operating Instructions. 

Beschreibung 

Das Modell 9740 ist ein Zwei-Positionen, sechs Port PEEK Ventil. Abb. 

42 zeigt das Flussdiagramm des Ventils. Die sechs kleinen Kreise 

symbolisieren die sechs Ventilports. Die Bögen stehen für die 

Verbindungspassagen im Rotor. Vor- und Rückwärtsdrehungen um 

jeweils 60° bringen das Ventil jeweils in die andere Schaltposition. 

Abb. 42 Flussdiagramm des Ventils Modell 9740 

Spezifikationen 

• Maximale Temperatur: 50°C. 

• Maximaler Druck: 345 bar (5000 psi). 

• Die benetzten Teile sind aus PEEK, einer Aluminiumoxidkeramik 

und inertem Polymer. 

ACHTUNG, WICHTIGER SICHERHEITSHINWEIS: 

Verwenden Sie ausschließlich Plastikverschraubungen zum 

Anschluss der Kapillaren an den Statorports. 

Metallverschraubungen können irreparable Beschädigungen des 

Stators bewirken. 

Wartung 

Bei normalem Gebrauch sind mehrere zehntausend Schaltungen ohne 

Probleme möglich. Hauptgrund für eventuelle frühere Fehler (zu 

erkennen an auftretenden Undichtigkeiten) sind abrasive Teilchen in der 

Probe oder der mobile Phase, die zu Kratzern auf der Rotordichtung 

führen können. 

Zum Austausch der Rotor- und der Isolierungsdichtung verfahren Sie wie 

folgt, vergleiche Abb. 43: 

• Entfernen Sie die drei Statorschrauben mit einem 9/16” 

Inbusschlüssel. 

• Entfernen Sie den Stator und den Statorring vom Ventilkörper. 

• Ziehen Sie die Rotordichtung von den Stiften ab. 

• Entfernen Sie die Isolierungsdichtung. 

• Setzen Sie die neue Isolierungsdichtung ein. Die Federseite muss 

der Rotordichtung abgewandt sein. 

• Setzen Sie die neue Rotordichtung. Die drei Stifte gewährleisten 

die Richtige Ausrichtung der Rotordichtung. Die Fließkanäle 

müssen zum Stator zeigen. 

• Setzen Sie den Statorring auf, so dass der Führungsstift des 

Ringes in die entsprechende Bohrung passt.

126 Wartung 

• Setzen Sie den Stator auf den Ventilkörper, so dass der 

Führungsstift in die entsprechende Bohrung passt. 

• Setzen Sie die Statorschrauben ein und ziehen Sie sie 

gleichmäßig und alternierend an. 

Body 



Rotor Seal 

Body Location Pin 

Stator Ring 

Stator Location Pin 

Stator Face 

Assembly 

Stator 

Stator Support 

Ring 

Stator Screws (3) 

Abb. 43: Ventil, Explosionsdarstellung Modell 9740 

Nadel und Schlauchverbindung 

Für den Probengeber sind zwei Spritzengrößen verfügbar: 

250 und 1000 µl 

Standardmäßig ist die 250 µl Spritze mit einem 500 µl Pufferschlauch 

und der 100 µl Probenschleife kombiniert. Hiermit sind folgende 

(maximalen) Injektionsvolumina realisierbar: 

• Vollschleifeninjektion: 100 µl 

Injektionsvolumen = Schleifenvolumen 

• Partielle Schleifenfüllung: 1 - 50 µl 

Maximum = 50% des Schleifenvolumens 

• µl Pick-up: 1 - 27 µl 

Maximum = 50% Schleifenvolumen - 150% Nadelvolumen 

Die Vollschleifeninjektion liefert die maximal mögliche 

Reproduzierbarkeit, jedoch nicht die maximal mögliche Genauigkeit, 

weil das Schleifenvolumen mit einer Genauigkeit von ± 10% spezifiziert 

ist. Der minimale Probenverlust pro Injektion ist = 230 µl (2 x Schleifenfüllung 

+ Nadelspülvolumen). 

Die Injektion mit partieller Schleifenfüllung liefert die maximal 

mögliche Genauigkeit (abhängig von der Spritzengenauigkeit) und eine 

Reproduzierbarkeit besser als 0.5% RSD für Injektionsvolumina > 10 µl. 

Der minimale Probenverlust pro Injektion ist = 30 µl (Nadelspülvolumen). 

30 µl sind das empfohlene minimale Spülvolumen, kleinere Volumina 

können programmiert werden, können aber das Ergebnis negativ 

beeinflussen. 

Die Injektion im µl Pick-up ist verbunden mit der Vermeidung jeglichen 

Substanzverlustes und mit der gleichen maximal möglichen 

Genauigkeit wie die Injektion mit partieller Schleifenfüllung aber einer 

geringfügig niedrigeren Reproduzierbarkeit: RSD besser als 1% für

Wartung 127 

Injektionsvolumina > 10 µl. 

5 µl Luft werden mit der Probe injiziert, falls in den Systemeinstellungen 

die Option air segment aktiviert worden ist. 

In einigen Fällen sind andere Kombinationen von Spritze, 

Probenschleife und Pufferschlauch zu empfehlen: 

Injektionsvolumina kleiner als 5 µl: 

Partielle Schleifenfüllung: 

Installieren Sie vorzugshalber eine 20 µl Probenschleife, um 

Genauigkeitseinbußen durch Expansion des Schleifeninhalts beim 

Schalten von der Inject- zur Loadposition vor dem Aufgeben der Probe zu 

vermeiden. Insbesondere beim Arbeiten mit hohen Drücken (200 bar) 

kann dieser Verlust bei der 100 µl Schleife in der Größenordnung von 0.1 

- 0.5 µl liegen. 

Beachten Sie, dass der minimale Probenverlust 30 µl für die erste 

Injektion aus einem Vial beträgt (empfohlenes minimales Spülvolumen). 

Für jede weitere Injektion aus demselben Vial sind mindestens weitere 

15 µl (die Hälfte des programmierten Spülvolumens) anzusetzen. Zur 

Vermeidung jeglichen Substanzverlustes arbeiten Sie mit dem µl Pick-up 

Injektionsmodus. 

µl Pick-up: 

Installieren Sie keine kleinere Probenschleife! 

Das Probensegment wird mit einem Vorgelagerten Luftsegment von 5 µl 

in die Schleife gefördert. Das entspricht dem 2,5 fachen des 

Nadelschlauchvolumens. Die 20 µl Schleife ist zu klein, um eine 

quantitative Injektion zu garantieren. 

Injektionsvolumina bis zum zweifachen des Standards: 

Mit der 250 µl Standardspritze, der Standardnadel mit 15 µl Schlauch und 

dem 500 µl Standardpufferschlauch, aber mit einer 200 µl Probenschleife 

betragen die maximalen Injektionsvolumina: 

Vollschleifeninjektion: 

200 µl Der Substanzverlust bleibt bei 

230 µl, weil bei Schleifen> 100 µl 

nur einmal Schleifenvolumen zur 

Überfüllung erforderlich ist 

100 µl 

Partielle 

Schleifenfüllung: 

µl Pick-up: 77 µl 

Kleinere Volumina als 10 µl können injiziert werden, aber die 

Reproduzierbarkeit und Genauigkeit von < 0.5% für die partielle 

Schleifenfüllung und < 1% für µl Pick-up werden nicht garantiert! 

Injektionsvolumina größer als 200 µl: 

Installieren Sie einen 2000 µl Pufferschlauch; eine Probenschleife 

geeigneter Größe und eine größere Spritze (> 2 x Injektionsvolumen). 

Injektionsvolumina größer als 500 µl sind auch möglich, es besteht 

jedoch die Gefahr der Spritzenkontamination. Führen Sie deshalb nach 

der Injektion ein ausreichendes Waschprogramm aus!

128 Wartung 

Pufferschlauch: 

Tabelle 7: Spritze und Pufferschlauch. 

Probennadel 

Spritze Pufferschlauch 

250 µl 500 µl 

1000 µl 2000 µl 

1 Ferrule 9 Nadelhalter 

2 Verschraubung 10 Luftnadel 

3 Tefzel Schlauch 11 Vialsensor 

4 Verschraubung, Nadel 12 Einstellschraube für die 

5 Ferrule (PTFE) 

6 Konischer Ring 

7 Probennadel 

8 Silicon-Luftdichtung 

Abb. 44: Probennadel 

Nadeleindringtiefe 

13 Luftschlauch für den 

Headspace Druck 

Austausch der Probennadel 

Zum Auswechseln der Probennadel verfahren Sie wie folgt (Siehe Abb. 44): 

• Öffnen Sie die Tastaturhaube. 

• Bringen Sie die Nadel durch drücken von , 

in die vordere Position. 

• Lösen Sie die Verschraubung (4) die die Nadel f(7) fixiert. 

• Lösen Sie die Verschraubung (1) die den PTFE Schlauch (3) mit 

dem Injektionsventil verbindet. 

• Entfernen Sie die Probennadel, ziehen Sie diese mit dem PTFE- 

Schlauch aus dem Ferrule heraus. 

• Setzen Sie die neue Nadeleinheit ein und achten Sie darauf, dass 

die Silicon-Luftdichtung (8) auf der Nadel steckt. 

• Fixieren Sie die Nadeleinheit mit der Verschraubung (4). 

• Verbinden Sie das lose Ende des Verbindungsschlauches mit dem 

Port 4 des Injektionsventils.

Wartung 129 

Ziehen Sie die Verschraubungen nicht zu fest an, um ein 

Verklemmen des Schlauches zu vermeiden. 

• Durch drücken von bringen Sie die Nadel wieder in 

die Homeposition und verlassen Sie den Wartungsmodus mit 

[Escape]. 

• Überprüfen Sie die Eindringtiefe der Nadel und justieren Sie diese 

gegebenenfalls wie unten beschrieben. 

• Führen Sie ein Routinewaschprogramm aus indem Sie 

drücken. 

Luftnadelaustausch 

Zum Auswechseln der Luftnadel verfahren Sie wie folgt (Siehe Abb. 44): 

• Entfernen Sie wie beschrieben die Probennadel. 

• Entfernen Sie die Luftnadel (10) und installieren Sie die neue 

Nadel. 

• Reinstallieren Sie die Probennadel wie beschrieben. 

Eindringtiefe der Probennadel 

Um das Restvolumen klein zu halten, sollte die Nadel bis kurz über dem 

Vialboden eintauchen. Zur Justierung der Eindringtiefe verfahren Sie wie 

folgt (Siehe Abb. 45): 

Spritzenwechsel 

• Öffnen Sie die Tastaturhaube. 

• Setzen Sie ein unverschlossenes Vial in die Position 2 des 

Probentellers. 

• Senken Sie die Nadel in das Vial, indem Sie 

- eine Vollschleifeninjektion mit einer Analysenzeit von 

mindestens 10 s programmieren 

- eine Serie mit dieser Methode und Vial 2 als erstem und 

letztem Vial programmieren 

- die Serie starten 

- den Netzschalter ausschalten, sobald die Nadel im Vial ist. 

• Lösen Sie die Einstellschraube um eine Drehung entgegen dem 

Uhrzeigersinn. 

• Justieren Sie die Eindringtiefe, indem Sie die Verschraubung (4) 

als Griff benutzen. 

Die Nadel sollte nicht tiefer als 1 mm über dem Boden eines 

Standardvials und nicht tiefer als 2 mm über dem Boden eines 

konischen Vials stehen. 

• Ziehen Sie die Justierschraube im Uhrzeigersinn wieder fest. 

• Schalten Sie das Gerät wieder ein. 

Der AS 3900 ist standardmäßig mit einer 250 µl Spritze ausgestattet, 

kann aber auch mit einer 1000 µl Spritze versehen werden. 

Zum Spritzenwechsel verfahren Sie wie folgt: 

Schalten Sie den AS 3900 nicht aus. Die Stromversorgung wird zur 

Bewegung der Nadel benötigt.

130 Wartung 

Abb. 46: Auswechseln der Spritze 

• Drücken Sie um aus dem Wartungsmenü 

Zugang zu den Spritzenbewegungen zu bekommen. 

• Bringen Sie die Spritze in die Endposition durch Drücken von 

. 

• Schrauben Sie die Spritze vom Spritzenventil ab. Sichern Sie 

dabei; dass die Luerverbindung im Ventil richtig platziert bleibt. 

• Lösen Sie den Spritzenkolben vom Antrieb. 

• Füllen Sie die neue Spritze blasenfrei mit Waschlösung. 

• Verbinden Sie den Kolben der gefüllten Spritze mit dem 

Spritzenantrieb und die Spritze mit der Luerverbindung am 

Spritzenventil. 

• Schrauben Sie die Spritze vorsichtig in die Luerverbindung. 

• Entfernen Sie die Luft aus der Spritze durch Drücken von 

. Die Spritze geht in die HOME Position und fördert 

ihren Inhalt in den Spritzenabfall. 

• Falls Luftblasen in der Spritze verbleiben, drücken Sie noch einmal 

. Die Spritze wird mit Waschlösung gefüllt. Drücken 

Sie , um den Inhalt in den Spritzenabfall zu fördern. 

Falls immer noch Luftblasen in der Spritze verblieben sind, 

wiederholen Sie die letzte Aktion, wobei Sie die Blasen durch 

vorsichtiges Klopfen an den Spritzenkörper entfernen. 

• Verlassen Sie den Wartungsmodus mit [Escape]. 

• Führen Sie ein Routinewaschprogramm aus indem Sie 

drücken. 

Der AS 3900 ist nun wieder zum Einsatz bereit.


Troubleshooting 

Startprobleme 

Start up 

problems 

The instrument 

would not operate 

after turning the 

power on 

The instrument is 

working, but diplay 

doesn't work 

No response from 

keyboard but 

display works 

Error code is 

indicated on the 

display 

Abb. 47: Startprobleme 

Power cord 

unplugged or 

faulty 

No 

Yes 

Plugin/ replace 

power cord 

Blown fuse Yes Replace fuse 

No 

Defective 

electronics 

Diplay 

component(s) 

failure 

Keyboard 

component(s) 

failure 

Yes 

Call your 

service 


Call your 

service 


Call your 

service 


Check Appendix B, 

to locate error 

message


Analytische Probleme 

Syringe Valve 

Syringe 

Im Falle analytischer Probleme ist als erstes zu klären, ob diese im 

AS 3900 oder in sonst einem Teil Ihres HPLC-Systems ihre Ursache 

haben. 

Schnelltest 

Ersetzen Sie den Autosampler durch ein manuelles Injektionsventil. 

Führen Sie einige Vollschleifeninjektionen durch. Treten die Probleme 

jetzt nicht auf, müssen sie ihre Ursache im AS 3900 haben, anderenfalls 

müssen Sie ihr HPLC-System auf Fehlerquellen untersuchen. 

Abb. 48: Troubleshooting: AS 3900 Fließweg 

Buffer Tubing 


Needle arm 

Air Needle 

Injection Needle 

In den Diagrammen auf den nächsten Seiten (Abb. 49 und Abb. 50) wird 

davon ausgegangen, dass das HPLC-System selbst fehlerfrei arbeitet. 

Bitte beachten Sie, dass analytische Probleme auch durch externe 

Einflüsse auftreten können, z.B. bei Licht- oder Temperaturempfindlichen 

Proben. Deshalb ist es wichtig, dass die Applikation zuvor und ohne 

Änderungen problemlos läuft.


Keine Injektion 

NO 

INJECTION 

Leakage inside 


Disconnect the needle tubing 

and the buffer tubing. 

Blockage 

in Flow 

Path 

Connect port 1 to an HPLC pump 

Block port 6. 

Start the pump at a low flow 

Abb. 49: Keine Injektion 

Start 

manual 

wash 

Disconnect 

Buffer tubing 

from valve 

Start 

manual 

wash 

Disconnect 

Buffer tubing 

from Syringe 

valve 

Start 

manual 

wash 

Disconnect 

needle from 

Valve 

Solvent 

flowing out of 

inj. port 

No 

Solvent 

out of open 

end 

No 

Solvent 

out of syringe 

valve 

Check for over tightened 

connections in the entire 

Flow Path & 

Check the syringe valve 

Observe 

ports 3 and 4 

for leakage 

No 

No 

Recheck with manual valve 

Yes 

Yes 

Yes 

Yes 

Check 

needle 

Check rotor 

seal 

Check 

buffer 

tubing 

Check rotor 

seal


Schlechte Reproduzierbarkeit 

BAD 

REPRODUCIBILITY 

Air in Flow Path Start manual wash 

Air in Syringe 



Valve 

Rotor seal worn out 

Dead volumes in 

tubing connections 

Abb. 50: Schlechte Reproduzierbarkeit 

Remove Syringe and fill 

manually with wash solvent 

Replace plunger tip or 

Syringe 

Replace Valve 

Replace seal 

Check Stator 

Redo connections with new 

Ferrules and nuts

ANHANG A: Zubehör 135 

ANHANG A: Zubehör 

Artikelnr. Beschreibung 

0830.834 Probentelleroption erweiterte Kapazität, 96 Positionen 

für 1,5 ml Vials (12 mm OD) 

0830.835 Großvolumen Probentelleroption, 24 Positionen für 

10 ml Vials (22 mm OD), mit 

1 ml Spritze und LSV Nadel 

0830.836 Prep-Option (nachrüstbar), einschließlich Software, 

Großvolumenprobenteller, 2,5 ml Spritze und 

Valco Injektionsventil mit Großbohrung und 

10 ml Probenschleife 

0700.010 Flanged-tube fitting 1/8” (5 Stück) 

0700.011 Flanged-tube fitting 1/16” (5 Stück) 

0830.718 Luftnadel (inkl. Dichtung) 

0830.303 Probennadel 

0830.304 Serum Probennadel 

0830.318 Silc-Stahl Probennadel 

0830.711 Luftnadel für Serum Probennadel 

0900.710 Pufferschlauch 500 µl 

0900.711 Pufferschlauch 2000 µl 

0900.712 Spritzenabfallschlauch 

0900.713 Spritzenspülschlauch 

0830.811 Injektionsmarkerkabel 

0830.733 Valco Injektionsventil, Edelstahlversion, 

C2-2006 SPHMI, inkl. Bajonettanschluss 

0830.734 Valco Injektionsventil, PEEK-Version, 

C2-2346 SPHMI, inkl. Bajonettanschluss 

3796.043 Valco Rotordichtung für Injektionsventil C2-2006 

3796.044 Valco Stator für Injektionsventil C2-2006 

3796.048 Valco Rotordichtung PEEK für Injektionsventil C2-2346 

3796.087 Valco PEEK Stator für Injektionsventil C2-2346 

0700.004 Valco Ferrule (10Stück) 

0700.005 Valco Verschraubung (10 Stück) 

3796.046 Valco Probenschleife 5 µl mit Fittings 


3796.030 Valco Probenschleife 200 µl mit Fittings 


3796.031 Valco Probenschleife 500 µl mit Fittings 

3796.088 Valco Probenschleife 20 µl PEEK mit Fittings 

3796.085 Valco Probenschleife 100 µl PEEK mit Fittings 

3796.083 Valco PEEK Verschraubung (finger fest) 

3796.084 Valco Ferrule PEEK 

0830.731 Rheodyne 7739 Injektionsventil, Edelstahlversion, 

inkl. Bajonettanschluss 

0830.732 Rheodyne 9740 Injektionsventil, PEEK/Keramik Version, 

inkl. Bajonettanschluss 

3796.035 Rheodyne Probenschleife 5 µl 

3796.009 Rheodyne Probenschleife 10 µl 




3796.013 Rheodyne Probenschleife 200 µl

136 ANHANG A: Zubehör 

Artikelnr. Beschreibung 



3796.076 Rheodyne Probenschleife 20 µl PEEK 

3796.016 Rheodyne Probenschleife 100 µl PEEK 

3796.091 Stator für Rheodyne 7739 Injektionsventil 

3796.092 Vespel Rotordichtung für 

Rheodyne 7739 Injektionsventil 

3796.093 Tefzel Rotordichtung für Rheodyne 7739 Injektionsventil 

3796.095 PEEK Stator für Rheodyne 9740 Injektionsventil 

3796.096 Keramik Stator face für Rheodyne 9740 Injektionsventil 

3796.097 PEEK Rotordichtung für Rheodyne 9740 Injektionsventil 

2140.151 Spritzenventil 

2140.160 Luer lock Verbinder Spritzenventil 

4400.250 250 µl Spritze 

4400.000 1000 µl Spritze 

0900.742 Kolbenaustauschkit für 250 µl Spritze (10Stück) 

0700.019 Kolbenaustauschkit für 1000 µl Spritze (Stück 10) 

Vials, Dichtungen und Kappen 

0788.751 Standard 2-CV Vials mit Klemmrand (200 Stück) 

0788.752 Klemmkappen für standard 2-CV und 1.1-CTVG Vials. 

(1000 Stück) 

0788.756 Chromacol 1.1-CTVG konische Vials mit Klemmrand 

(100 Stück) 

0788.757 Chromacol TTS-312 Halter für 1.1-CTVG Vials 

(100 Stück) 

0788.761 Standard 2-SV Schraubrandvials (100 Stück) 

0788.762 Schraubkappen für standard 2-SV Vials (100 Stück) 

0788.763 Septa für standard 2-SV Vials (100 Stück) 

0900.750 Chromacol 10-CV, 10 ml Vials (125 Stück) 

0900.751 Chromacol 20-ACB Klemmkappen für 10-CV Vials 

(125 Stück) 

0900.752 Chromacol 20-ST101 Dichtungen für 10-CV Vials 

(125 Stück) 

3760.403 Verschließzange für 11 mm OD Vials (standard). 

3760.411 Verschließzange für 20 mm OD Vials

ANHANG B: Fehlermeldungen 137 

ANHANG B: Fehlermeldungen 


ERROR 211 Injektionsventil ist nicht in zulässiger Position. 

ERROR 212 Das Injektionsventil schaltet nicht innerhalb 1,5 s. 

ERROR 213 Die Schaltzeit des Injektionsventils übersteigt 500 msec. 

Spritze 

ERROR 221 Das Spritzenventil hat nicht geschaltet. 

ERROR 222 Die Spritze erreicht die Homeposition nicht in der Zeit. 

ERROR 223 Die Spritzespindel vollzog nicht die korrekte Anzahl von 

Drehungen. 

ERROR 224 Die Spritzespindel dreht sich nicht. 

ERROR 225 Das Spritzenventil findet keine zulässige Position. 

Injektionsnadel 

ERROR 230 Der Probennadelarm konnte die Homeposition nicht 

erreichen oder verlassen (vertikal). 

ERROR 231 Der Probennadelarm ist in einer unerlaubten Position für 

eine Abwärtsbewegung. 

ERROR 232 Der Probennadelarm erreicht die Homeposition nicht in 

der Zeit (horizontal). 

ERROR 233 Zu viele oder nicht ausreichende Anzahl von Schritten 

um das Ziel der horizontalen Nadelbewegung zu 

erreichen. 

ERROR 234 Der Probennadelarm ist nicht in der vertikalen Homeposition 

für eine horizontale Bewegung. 

ERROR 235 Der Probennadelarm ist in einer unerlaubten 

horizontalen Position. 

ERROR 237 Der Probenteller ist in einer unerlaubten Position für eine 

Abwärtsbewegung der Probennadel. 

ERROR 239 Der Vialsensor klemmt. 

Probenteller 

ERROR 251 Falsche Probentellerrotation. 

ERROR 252 Kein Probenteller im AS 3900 installiert. 

ERROR 253 Der Probennadelarm ist nicht in der vertikalen Homeposition 

während der Probentellerrotation.

138 ANHANG B: Fehlermeldungen 

Vials 

ERROR 260 Kein Vial in der Zielposition. 

Gilt nur, wenn in den Systemeinstellungen die Option 

Missing Vials auf NO gesetzt wurde (Siehe Seite 108) 

oder bei der Ausführung einer Mischmethode. 

ERROR 262 Kein Transportvial. 

Gilt nur, wenn in den Systemeinstellungen die Option 

Missing Vials auf NO gesetzt wurde (Siehe Seite 108). 

ERROR 264 Kein Vial für Reagenz A. 

ERROR 265 Kein Vial für Reagenz B. 

ERROR 268 Kein Zielvial. 

ERROR 269 Nicht genug Transportflüssigkeit wegen fehlenden 

Transportvials. 

ERROR 270 Nicht genug Reagenz A verfügbar. 

ERROR 271 Nicht genug Reagenz B verfügbar. 

Elektronik 

ERROR 275 Fehler bei der Initialisierung des AS 3900. Er kann nicht 

starten.


ANHANG C: Test Prozeduren 

Einleitung 

Um eine stets gleich bleibende hohe Qualität der Ergebnisse 

sicherzustellen, ist die Reproduzierbarkeit des Probenvolumens von 

entscheidender Bedeutung für die Genauigkeit der HPLC- 

Analysenergebnisse. 

Aus diesen Gründen ist die regelmäßige Überprüfung der korrekten 

Autosampler-Funktion wichtig. Diese Arbeitsanleitung erläutert die 

Durchführung der entsprechenden Tests. 

Wird im Laufe der Überprüfung festgestellt, dass der Autosampler nicht 

die vorgegebenen Spezifikationen erfüllt, muss er als defekt 

gekennzeichnet werden und darf nicht weiter für die Analyse eingesetzt 

werden. Erst nach erfolgter Wartung bzw. Reparatur und dem Nachweis, 

dass die vorgegebenen Spezifikationen erfüllt werden, kann der 

Autosampler wieder für die Analytik eingesetzt werden (siehe Seite 145). 

Festlegung des Überprüfungsintervalls 

Die routinemäßige Überprüfung der Funktion und technischen 

Spezifikationen ist in gewissen zeitlichen Abständen durchzuführen, die 

von der Intensität der Nutzung abhängt. Folgende zeitliche Abstände 

wurden festgelegt: 

Durchschnittliche Nutzung über 1 Tag bis maximal 5 Tage pro Woche: 

alle 6 Monate 

Intensive Nutzung, d.h. Tag/Nacht oder mehr als 5 Tage pro Woche: 

alle 3 Monate 

Betrieb mit Pufferlösungen oder sonstigen Salzlösungen: alle 3 Monate. 

Benötigte Materialien 

Eluent : Deionisiertes Wasser (HPLC-Qualität) 

Der Eluent muss entgast sein, um Funktionsstörungen 

durch vorhandene Luftblasen zu vermeiden. 

Testlösung: 50 ppm Uracil gelöst in deionisiertem Wasser (HPLC- 

Qualität) 

Waschlösung: Wasser : Isoropanol 8:2 (HPLC-Qualität) 

HPLC Pumpe 

Restriktionskapillare, um einen Druck von mindestens 15 bar bei 1 ml/min 

Fluss aufzubauen; 

UV-Detektor (Messzelle: 10 mm oder geringere Schichtdicke); 

Schreiber, Integrator oder Chromatographie-Software (Datenrate: min. 5 Hz). 

Die genannten Komponenten sind nach folgendem Schema (Abb. 51) zu 

konfigurieren.

140 ANHANG C: Test Prozeduren 

Abb. 51: Testeinheit 

Überprüfung des Autosamplers 3900 

Pumpe: 1 ml/min 

UV-Detektor: 

254 nm 

Auswertun 

einheit 

Spezifikationstests 

Für alle Tests wird ein System aus oben genannten Komponenten 

aufgebaut. Die Vorgaben für den 3900 Autosampler beziehen sich auf die 

analytische Standardversion, die mit einer 100 µl Probenschleife und 

einer 250 µl Spritze ausgestattet ist. Die Flasche für die Waschlösung am 

Autosampler ist mit 80% Wasser / 20% i-Propanol gefüllt. 

1. Reproduzierbarkeit des Probenvolumens 

Dazu wird die vorbereitete Uracil-Lösung (50 ppm) wiederholt mit einem 

Injektionsvolumen von 10 µl injiziert. 

Stellen Sie folgende Systemparameter am Autosampler 3900 ein: 

System Settings/Adjustments: 

Loop volume: 100µl (standard design) 

Needle tube volume: 15 µl 

Syringe volume: 250 µl 

Dispenser speed: normal 

Skip missing vial: yes 

Head space pressure: yes 

Programmieren Sie folgende Methoden und Serien am Autosampler: 

Method 1 






Wash: None 

Series 1 





Analytische Parameter: 

Flussrate: 1 ml/min 

UV-Detektor Wellenlänge: 254 nm 

Stellen Sie ein Gläschen, gefüllt mit mindestens 500 µl Probenlösung, in 

das Probentablett des 3900 auf Position 1. Starten Sie danach die 

Methodenserie, die Sie am Autosampler programmiert haben. Es werden 

jeweils 10 µl injiziert. Dies wird 9-mal wiederholt. Es sollte sich ein 

Chromatogramm ähnlich wie in Abb. 52 ergeben.


uAU 

500000 

400000 

300000 

200000 

100000 

0 

-100000 



9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 

Abb. 52: Reproduzierbarkeit des Probenvolumens 

Minutes 

Der arithmetische Mittelwert der integrierten Peakflächen wird gebildet. 

Daraus wird anschließend der Variationskoeffizient VK1 berechnet. Als 

Berechnungsgrundlage dienen die folgenden Formeln: 

Peakareas 

∑ 

= 

n 

∑ 

i= 

1 

Peakareas 

n 

i 

(arithmetischer Mittelwert) 

( Peakareai 2 

− Peakareas) 

σ n−1 

= 

n −1 

, wobei i = 1 - 9 

(Standardabweichung) 

VK 

1 

σ 

peakarea 

n−1 

[ % ] = 

× 100 

Der Variationskoeffizient VK sollte ≤ 0,5 % sein. 

(Variationskoeffizient) 

Dokumentieren Sie das Ergebnis auf dem Formular "Test Report“. 

2. Prozentuale Probenverschleppung 

Die Systemeinstellungen und analytischen Parameter sind wie unter Test 

1 festzulegen. 

Zur Bestimmung der prozentualen Probenverschleppung werden 3-mal 

im Wechsel jeweils 10 µl Probenlösung (Vialposition 1) und 10 µl Eluent 

(Vialposition 2) aus Gläschen 1 und 2 injiziert. 

Dazu müssen am Autosampler eine neue Methode (Nr. 2) und 3 neue 

Serien (Nr. 2 bis 4) programmiert werden. Beachten Sie dabei, dass die 

Waschfunktion für die Injektionsnadel zwischen den Injektionen aktiviert 

sein muss. 


Method 2 






Wash: Yes 

500000 

400000 

300000 

200000 

100000 

0 

-100000 

uAU


Series 2 to 4 





Da aus Vial 2 der Eluent injiziert wird, sollte möglichst kein bzw. nur ein 

kleiner Peak erkennbar sein. 

Es sollte sich ein Chromatogramm wie in Abb. 53 ergeben. 

uAU 

500000 

450000 

400000 

350000 

300000 

250000 

200000 

150000 

100000 

50000 

0 



Abb. 53: Probenverschleppungstest 

Eluentinjektionen 

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 

Minutes 

Die entsprechend ermittelten Peakflächen (Mittelwert) für die 

Eluenteninjektion werden ins Verhältnis zu den Peakflächen (Mittelwert) 

des Uracilpeaks gesetzt. Die prozentuale Probenverschleppung PV ergibt 

sich dann aus folgender Gleichung: 

= 

PV [%] X 100 (Probenverschleppung) 

∑ 

i 

∑ 

i 

Peakarea 

3 

Peakarea 

i 

3 

i Eluent 

Testsolution 

Die prozentuale Probenverschleppung PV sollte ≤ 0,3 % sein. 

Dokumentieren Sie das Ergebnis auf dem Formular "Test Report". 

3. Linearität 


4.1.1 festzulegen. 

Es werden jeweils 3 mal 10, 20, 30, 40 und 50 µl der Testlösung Uracil 

aus Vial 1 injiziert. Dazu müssen am Autosampler 5 Methoden mit 

unterschiedlichen Injektionsvolumina programmiert werden. Diese 5 

Methoden sind dann bei der Programmierung der Serien 5 bis 9 zu 

verwenden. Stellen Sie sicher, dass sich genügend Testlösung in Vial 1 

(mindestens 800 µl) befindet. 

500000 

450000 

400000 

350000 

300000 

250000 

200000 

150000 

100000 

50000 

0 

uAU



Method 3-7 




Inj. volume: 10 µl (20, 30, 40, 50 µl) 


Wash: None 

Series 5-9 

Method number: 3 (-7) 




Es ergibt sich ein Chromatogramm wie in Abbildung Abb. 54. 

uAU 

2000000 

1800000 

1600000 

1400000 

1200000 

1000000 

800000 

600000 

400000 

200000 

0 

-200000 


MIDAS_Linearity 

Abb. 54: Linearitätstest 

2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 

Minutes 

Zur Auswertung wird der Korrelationskoeffizient r der 

Regressionsgeraden aus den Messwerten der Peakflächen und des 

Injektionsvolumens nach folgender Gleichung bestimmt: 

r = 

∑ xi 

yi 

− nxy 

2 2 2 2 

( ∑ xi 

− nx 

)( ∑ yi 

− ny 

) 

2000000 

1800000 

1600000 

1400000 

1200000 

1000000 

800000 

600000 

400000 

200000 

0 

-200000 

(Korrelationskoeffizient) 

yi Y-Wert von Messwert i (Injektionsvolumen) 

xi X-Wert von Messwert i (Peakfläche) 

y 

arithmetisches Mittel von Y über alle n Messwerte 

x arithmetisches Mittel von X über alle n Messwerte 

n Anzahl der Messwertepaare 

Der Korrelationskoeffizient r sollte ≥ 0,998 sein. 


uAU


4. Mischtest 

Der Mischtest kann nur mit dem Standardprobenteller 

durchgeführt werden, da mit den anderen Probentellern die 

Programmierung am Autosampler für die Verdünnung von Proben 

nicht möglich ist. 


1 festzulegen, Seite 139. 

Für den Mischtest werden ein mit Testlösung gefülltes Probengläschen 

(Vial Pos. 1), ein leeres Gläschen (Destination Vial Pos. 2) und ein mit 

Eluent gefülltes Reagensgläschen (Reag-A = Pos. 86) in den Teller des 

Autosamplers gestellt. 

Der Autosampler ist so zu programmieren, dass eine 1:10 Verdünnung 

der Probe im leeren Gläschen hergestellt wird. Da nur maximal 9 

Methoden und 9 Serien am Autosampler programmiert und gespeichert 

werden können, sind vorherige Methoden und Serien zu überschreiben. 

Nach der Verdünnung werden aus beiden Probengläschen jeweils 10 µl 

mit dreimaliger Wiederholung injiziert. 


Method 1: 







Method 2: 









3) Add 40µl SAMPLE to DESTINATION 



MIX 3 times with 250 µl 

END OF MIX METHOD 

Series 1: 

Method: 1 


Last vial: 01 

Series 2: 

Method: 2 


Last vial: 01 

Destination vial: 02 

Nach Beendigung der Messung sollte sich ein Chromatogramm ähnlich 

wie in Abb. 55 ergeben.


uAU 

700000 

600000 

500000 

400000 

300000 

200000 

100000 

0 

-100000 

-200000 


MIDAS_Mixing_Test 

Abb. 55: Verdünnungstest 

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 

Minutes 

Der arithmetische Mittelwert der Messwerte (Peakflächen) wird für jedes 

Gläschen gebildet und die Variationskoeffizienten (VK2/3) für beide 

Gläschen bestimmt (s. Berechnung Punkt 1). 

Aus dem Verhältnis der Mittelwerte der Peakflächen der Originalprobe 

und der Verdünnung wird der Verdünnungsfaktor F10 ermittelt. 

Der Variationskoeffizient VK2 für das 1. Gläschen (Probe) sollte ≤ 0,5 % 

sein. 

Der Variationskoeffizient VK3 für das 2. Gläschen (Verdünnung) sollte ≤ 

0,5 % sein. 

Der Verdünnungsfaktor F10 sollte im folgenden Bereich liegen: 9.85 < x > 

10.25. 


Dokumentation und Archivierung 

Für jeden Test wird das Ergebnis im Testreport-Formular eingetragen. 

Außerdem werden die Gerätenummer (z.B. Seriennummer oder 

Inventarnummer) des überprüften Gerätes, das Datum der Überprüfung, 

das Datum der nächsten Überprüfung und der Name des Prüfers 

eingetragen. Das Testreport-Formular wird anschließend im 

Gerätelogbuch chronologisch abgeheftet. 

Wenn die Überprüfung ergeben hat, dass das Gerät die Spezifikationen 

erfüllt, wird das Gerät mit einem entsprechenden Etikett oder Schild (z.B. 

in grüner Farbe) versehen, auf dem die Gerätenummer, das Datum der 

Überprüfung, das Datum der nächsten Überprüfung sowie der Name des 

Prüfers angegeben sind. 

Wenn die Überprüfung ergeben hat, dass das Gerät die Spezifikationen 

nicht erfüllt, wird das Gerät mit einem entsprechenden Etikett oder Schild 

(z.B. in roter Farbe mit der Aufschrift "DEFEKT") versehen, auf dem 

Gerätenummer, Datum der Überprüfung sowie der Name des Prüfers 

angegeben sind. Das Gerät darf nicht mehr eingesetzt werden, bis es 

nach einer geeigneten Wartung oder Reparatur wieder den 

Spezifikationen genügt. 

Alle Dokumente zu Geräteüberprüfungen, d.h. die Arbeitsanweisungen 

sowie Testberichte (Testreports), sind entsprechend den Vorschriften des 

Qualitätssicherungssystems zu archivieren. 

Beim Hersteller werden Geräteunterlagen, Gerätehandbücher, Service- 

Handbücher, Service-Informationen und Teilelisten archiviert, die als 

Referenz zur Verfügung stehen. 

700000 

600000 

500000 

400000 

300000 

200000 

100000 

0 

-100000 

-200000 

uAU


TEST REPORT 

Modul: Autosampler 

Typ: 3900 analytisch Cool Bio 

Gerätenummer: 

Funktionstest 

o. Prüfung von Einstellung Spezifikation Ergebnis 

Reproduzierbark 

eit 

Verschleppung 

10 µl Testlösung aus 6 Gläschen 

jeweils 3-mal injizieren. 

10 µl der Testlösung bzw. des 

Eluenten im Wechsel 3-mal 

injizieren. 

Linearität 10, 20, 30, 40 und 50 µl der 

Testlösung jeweils 3-mal 

injizieren. 

Mischtest 10 µl der Testlösung und einer 

vom Autosampler durchgeführten 

1:10 Verdünnung jeweils 3-mal 

injizieren. 

* nur für den Autosampler 3900 mit dem Probenteller . 

Datum: ........................................ 

Nächste Überprüfung am: ........................................ 

VK1: = 0.5% 

PV: = 0.3% 

r: ≥ 0.998 

VK 2: = 0.5% 

VK 3: = 0.5% 

F10 9.85 < x > 10.25 

Prüfer: ........................................ Unterschrift: ........................................


ANHANG D: AS 3900, Prep 

Einfach durch die Auswahl von in den Systemeinstellungen 

kann der AS 3900 genutzt werden, um Proben in ein präparatives LC- 

System oder andere Anwendungen wo größere Probenvolumina 

erforderlich sind, zu injizieren. 

Die Kombination von großen Probenvials (10 ml) und einer 2.5 ml 

Großvolumenspritze erlaubt schnelle Injektionen großer Volumina mit 

hoher Reproduzierbarkeit. Der Probenverlust beträgt nur 45 µl. das 

installierte Ventil mit erweiterter Bohrung (0,75 mm) und einer 10 ml 

Probenschleife ermöglicht Injektionen vom µl bis in den ml Bereich mit 

dem gleichen Autosampler. Für den im Prep-Modus betriebenen AS 3900 

stellen Flussraten bis 200 ml/min kein Problem dar. 

Wird die Prep-Option ab Werk geordert, können Sie die Installationshinweise 

überspringen. 

Haben Sie die Prep-Option als Nachrüstkit gekauft, verfahren Sie nach 

den unten gegebenen Installationshinweisen. 

Spezifikationen des AS 3900, prep 

In einigen Positionen unterscheiden sich die Spezifikationen des AS 

3900, prep vom standard Autosampler. Die Unterschiede sind unten 

dargestellt. 

PROBENAUFGABE 

Probenkapazität 

LSV Probenteller: 24 Vials a 

10 ml (LSV) 

Probenvolumen Nicht programmierbar, das 

Injektionsvolumen definiert das 

angesaugte Probenvolumen 

Spritze 2500 µl 

ANALYTISCHE LEISTUNG 

Reproduzierbarkeit RSD 10 µl bis zu 50% 

der installierten Probenschleife. 

Verschleppung < 0.1% mit programmierter 

Nadelspülung 

PROGRAMMIERUNG 

Methoden 9 Methoden programmierbar 

Injektionsmethode nur partielle Schleifenfüllung 

Injektionsvolumina 1 µl – 19,999 µl, mit 1 µl Inkrementen 

(praktisch durch das Vialvolumen auf 

~10ml begrenzt) 

Mischmethoden nicht verfügbar 

OPTIONEN 

Biokompatibles Ventil nicht verfügbar

148 ANHANG D: AS 3900, Prep 

Installation des AS 3900, prep 

Zur Installation der Prep-Option an einem Standard AS 3900 führen Sie 

folgende Schritte aus: 

• Bei Firmwareversionen kleiner als V2.00, muss als erster Schritt das 

EPROM durch das im Kit mitgelieferte ausgetauscht werden, siehe 

Abschnitt Firmwareaustausch auf Seite 149. 

• Tauschen Sie das Standard Injektionsventil gegen das spezielle 

AS 3900 Prep-Ventil (VALCO #C2-3006 SPHMI) aus, siehe 

Abschnitt Austausch des Injektionsventils auf Seite 121. 

• Tauschen Sie die Standard Probennadel, die Luftnadel und den 

Pufferschlauch gegen die entsprechenden Teile aus dem AS 3900 

Prep Kit aus siehe Abschnitt Probennadel Seiten 128 und 129. 

• Erneuern Sie alle Kapillar- und Schlauchanschlüsse am 

Injektionsventil wie auf Seite 96 beschrieben. 

• Tauschen Sie die Standardspritze gegen die 2500 µl Spritze aus; 

siehe Abschnitt Spritzenwechsel auf Seite 129. 

• Installieren Sie den 24 Vials (LSV) Probenteller, siehe Abschnitt 

Einsetzen des Probentellers in den AS 3900 auf Seite 87. 

• Wählen Sie in den Systemeinstellungen den Prep-Modus, siehe 

Abschnitt Prep-Modus Einstellungen auf Seite 111. 

Table 8: Schlauchverbindungen des AS 3900, Prep-Option. 

Schlauch Material und Dimensionen Label 

LSV Probennadel 

und Schlauch 

Pufferschlauch vom 


zum Spritzenventil 

Injektionen mit dem AS 3900, prep 

Edelstahlkapillarrohr 

70mm x 0.81mm OD x 051 mm ID 

Tefzel Schlauch; 

155 mm x 1 /16” OD x 0.50 mm ID 

PTFE Schlauch; 

2550 mm x 1 /16” OD x 1.0 mm ID 

45 µl 

2000 µl 

Die Injektionsroutine unterscheidet sich vom Standard Autosampler 

AS 3900. Der AS 3900, prep ist ausschließlich für Injektionen mit 

partieller Schleifenfüllung vorgesehen. 

Deshalb die folgenden Hinweise, die sicherstellen sollen, dass Sie die 

best mögliche Injektionsleistung des Gerätes erhalten. 

Stellen Sie sicher, dass das programmierte Injektionsvolumen nicht 

größer als 50% der installierten Probenschleife ist. Anderenfalls 

kann die spezifizierte Genauigkeit und Reproduzierbarkeit nicht 

gewährleistet werden. 

Durch die Software wird das Injektionsvolumen nicht mit der 

Installierten Probenschleife verglichen. Sie können daher auch 

Injektionsvolumina größer als 50% des Probenschleifenvolumens 

programmieren.


Die Vorspülung wird im Prep-Modus nicht ausgeführt. Die 

Ausdehnung der Flüssigkeit in der Probenschleife beim Umschalten 

von INJECT auf LOAD würde Probenanteile aus Nadel und Schlauch 

drücken. Um das Volumen der Nadel und des Probenschlauches zu 

kompensieren, wird das programmierte Schlauchvolumen 

(voreingestellt sind 45µl) zusammen mit dem angegebenen 

Probenvolumen angesaugt. 

Firmwareaustausch 

Die Firmware des AS 3900 ist auf einem EPROM gespeichert, dass sich 

auf der CPU Platine befindet. 

ACHTUNG! 

Das EPROM ist hoch empfindlich gegenüber elektrostatischen 

Entladungen. Beachten Sie die Vorsichtsmaßnahmen gegen 

elektrostatische Entladungen für die Handhabung sensibler 

Geräteteile. 

Tauschen Sie das EPROM wie folgt aus: 

• Notieren Sie sich alle programmierten Methoden, 

Systemeinstellungen und Serien, die Sie wieder verwenden 

möchten. 

• Schalten Sie den AS 3900 aus. 

• Entfernen Sie die 4 mit (A) markierten Schrauben an der 

Geräterückwand, siehe Abb. 56. 

• Öffnen Sie die Geräterückseite. 

• Entfernen Sie das alte EPROM und setzen Sie das neue auf der 

CPU Platine ein, siehe Abb. 57. 

Stellen Sie sicher, das alle Pins des EPROM richtig im IC-Sockel 

sitzen. 

Die kleine Markierung an der EPROM Oberseite muss in die gleiche 

Richtung zeigen wie die auf dem IC-Sockel. 

• Setzen Sie die Rückwand wieder ein und schrauben sie fest. 

• Überprüfen sie alle Systemeinstellungen nach dem Einbau des 

neuen EPROM. 

A 

A 

A A 

Abb. 56: Rückseite des Autosamplers AS 3900 

S1 

ON DIP 

S2 

ON DIP 

OUT IN

150 ANHANG D: AS 3900, Prep 

EPROM 

Abb. 57: Einsetzen des EPROM auf der CPU Platine des AS 3900

Technische Daten 151 

Technische Daten 

Probenaufgabe 

Standard: 84 Gefäße à 1,8 ml und 3 Gefäße à 10 ml 

für zusätzl. Lösungen; 

optional: 96 Gefäße à 1,8 ml 

Präpversion: 24 Gefäße à 10,0 ml; 

Cool-Option: 4-15 ± 2°C 

Injektionsvolumen 

Standardprobenschleife: 20 µl, andere Größen erhältlich 

1 µl bis 5.000 µl in 1 µl-Schritten 

partielle Schleifenfüllung: 1µl – 50% des Schleifenvolumens 

µL pick-up: max. 2477 µl 

Injektionen pro Gefäß max. 9 

Analysenzeit max. 9 h 59 min 59 s 

Nadelspülung programierbar 

Überdruck 


ca. 0,05 MPa, eingebauter Kompressor 

Standard: Edelstahl 

Bio-Option: PEEK 

Schaltzeit weniger als 100 ms 

Genauigkeit 

Volle Schleifenfüllung: RSD

152 Gewährleistungsbedingungen 

Warranty statement 

The warranty period of the Smartline Autosampler 3900 is 12 months 

beginning from the date of dispatch from Berlin. Operation inconsistent 

with manufacturer's instructions or damage caused by unauthorized 

service personnel are excluded from guarantee. Damage caused by 

blockages and wear and tear parts such as fuses and seals are not 

covered by the guarantee. Defective autosamplers should be sent to the 

manufacturer for repair. 


Dr. Ing. Herbert KNAUER GmbH 


D-14163 Berlin 

Tel: 030 – 809 727 – 0 

Fax: 030 – 801 50 10 

e-mail: info@KNAUER.net 

www.KNAUER.net 

If we find a defect covered by the guarantee, repair or replacement, at 

our discretion, will be carried out free of charge. Packing and transport 

costs are borne by the purchaser. 

Gewährleistungsbedingungen 

Die werksseitige Gewährleistung für den Smartline Autosampler 3900 

beträgt ein Jahr ab Versanddatum. Unsachgemäße Bedienung des 

Gerätes und Folgen einer Fremdeinwirkung sind hiervon ausgenommen. 

Ebenso sind Verschleißteile wie z. B. Sicherungen, Dichtungen, Lampen 

und Verstopfungsschäden sowie Verpackungs- und Versandkosten von 

der Gewährleistung ausgenommen. Bitte wenden Sie sich bei 

Fehlfunktionen Ihres Smartline Autosamplers 3900 direkt an das 

Herstellerwerk: 




D-14163 Berlin 

Tel: 030 – 809 727 – 0 

Fax: 030 – 801 50 10 

e-Mail: info@KNAUER.net 

www.KNAUER.net 

Die Verpackung unserer Geräte stellt einen bestmöglichen Schutz vor 

Transportschäden sicher. Prüfen Sie dennoch jede Sendung sofort auf 

erkennbare Transportschäden. Bitte wenden Sie sich im Falle einer 

unvollständigen oder beschädigten Sendung innerhalb von drei 

Werktagen an das Herstellerwerk. Bitte unterrichten Sie auch den 

Spediteur von etwaigen Transportschäden.

Konformitätserklärung 153 

Declaration of conformity 

Konformitätserklärung 

Manufacturer’s name and address: 

Herstellername und -adresse 




14163 Berlin, Germany 

Smartline Autosampler 3900 

in different versions 

Order Numbers, Bestellnummern: A 1508x 

complies with the following requirements and product specifications: 

● Low Voltage Ordinance (73/23/EWG) 

EN 61010-1 (08/2002) 

● Engineering Guidelines (89/392/EWG) 

● EMC Ordinance (89/336/EWG) 

EN 6100-3-2 (10/2006) 

EN 61326-1 (10/2006) 

entspricht den folgenden Anforderungen und Produktspezifikationen: 

● Niederspannungverordnung (73/23/EWG) 

EN 61010-1 (08/2002) 

● Maschinenrichtlinie (89/392/EWG) 

● EMV-Verordnung (89/336/EWG) 

EN 6100-3-2 (10/2006) 

EN 61326-1 (10/2006) 

The product was tested in a typical configuration. 

Das Produkt wurde in einer typischen Konfiguration geprüft. 

Berlin, 2007-03-30 

Alexander Bünz (Managing Director) 

The CE Shield is attached to the rear of the instrument. 

Das Konformitätszeichen ist auf der Rückwand des Gerätes angebracht.

154 INDEX(english) 

INDEX(english) 

A 

Air needle................................................. 55 

Air segment ............................................. 35 

Analysis time ........................................... 39 

AS 3900 logbook ..................................... 34 

AS 3900, preparative............................... 73 

B 

Buffer tubing ............................................ 53 

C 

Calibration vials ....................................... 44 

Column thermostat .................................. 33 

Control I/O connections..................... 27–28 

Contact closure output connector (P1) 27 

RS232 connector ................................ 27 

TTL input connector (P2) .................... 27 

Copy a method ........................................ 34 

D 

Destination vials ...................................... 44 

Device identifier ....................................... 37 

Direct control functions 

Maintenance........................................ 32 

Manual wash ....................................... 32 

Needle arm movement........................ 32 

Serial communication mode................ 32 

Temperature control............................ 33 

Direct Control functions ........................... 32 

Direct functions........................................ 31 

E 

Erase a method ....................................... 34 

Error codes .............................................. 63 

F 

Firmware.................................................. 75 

Fluid connections..................................... 22 

HPLC connections .............................. 23 

Syringe ................................................ 24 

Wash solvent....................................... 23 

Waste tubing ....................................... 23 

Flush volume ........................................... 39 

Freeze input............................................. 28 

Freeze input active .................................. 37 

Full loop injection............................... 39, 52 

Fuses....................................................... 21 

H 

Hard function keys 

[CL], Clear ........................................... 31 

[E], Enter ............................................. 31 

[Escape] .............................................. 31 

[Hold/Cont.] ......................................... 31 

[Menu] ................................................. 31 

[Methods]............................................. 31 

[Priority] ............................................... 31 

[Series] ................................................ 31 

[Start/Stop]........................................... 31 

[System]............................................... 31 

Headspace pressure................................ 35 

HPLC connections ................................... 23 

I 

Injection 

AS 3900, prep...................................... 75 

Injection marker pulse length ................... 37 

Injection mode 

µl Pick-up injection............................... 39 

Full loop injection................................. 39 

Partial loopfill injection ......................... 39 

Injection principle ..................................... 14 

µl Pick-up injections.......................18–20 

Full loop injections .........................15–16 

Partial loopfill injections .................16–18 

Injection program ..................................... 38 

Analysis time........................................ 39 

Flush volume ....................................... 39 

Injection volume................................... 39 

Number of injections per vial ............... 39 

Injection valve (Valco).............................. 47 

Injection valve replacement ..................... 47 

Injection volume .................................39, 52 

Input edge next injection .......................... 37 

Inspection Intervals .................................. 65 

Installation 

AS 3900, prep...................................... 74 

Instrument description 

Exploded view of AS 3900................... 13 

Rear side of AS 3900........................... 14 


Rückansicht des AS 3900 ................... 14 

K 

Keyboard.................................................. 30 

Hard function keys............................... 30 

Numeric keys ....................................... 30 

Soft function keys ................................ 30 

L 

Linearity.................................................... 68 

List of accessories ................................... 61 

Loading the sample tray........................... 27 

M 

Maintenance............................................. 32 

Manual injection valve switching.............. 32 

Manual wash............................................ 32 

Method programming............................... 38 

Mix program .......................................38, 42 

Delete step........................................... 42 

Insert step ............................................ 42 

Mixture Test ............................................. 69 

N 

Needle arm movement............................. 32 

Next injection input.............................28, 45

INDEX(english) 155 

Number of injections per vial....................39 

O 

Oven setpoint ...........................................33 

P 

Partial loopfill injection..................39, 52, 53 

PASA ....................................................11 

Pick-up injection ...........................39, 52, 53 

Power connections...................................21 

Priority sample..........................................46 

Programming Series 

Calibration vials....................................44 

Destination vials...................................44 

Method number....................................43 

Q 

Quick connection mounting......................47 

Quick start ..............................................5–9 

R 

Remote Control ........................................45 

Replace air needle ...................................55 

Replacing the sample needle...................54 

Replacing the syringe...............................55 

Reset outputs after last Series .................37 

Rheodyne Model 7739 valve....................49 

Rheodyne Model 9740 valve....................50 

Run screen information ............................45 

Run sequence ..........................................43 

S 

Sample Carry-Over ..................................67 

Sample needle .........................................54 

Sample needle penetration depth ............55 

Sample tray cooling..................................33 

Sample Volume Reproducibility ...............66 

Serial communication mode.....................32 

Panic stop ............................................33 

Series .......................................................43 

Skip missing vials.....................................35 

Specification Test.....................................66 

Start a Run ...............................................45 

Stop a Run ...............................................45 

Stop input .................................................28 

Switch the oven on...................................33 

Switch the tray cooling on ........................34 

Syringe ...............................................24, 55 

Syringe speed ..........................................35 

Syringe volume.........................................35 

System Settings .......................................34 

Air segment..........................................35 

Device identifier ...................................37 

Freeze input active...............................37 

Headspace pressure............................35 

Injection marker pulse length...............37 

Input edge next injection......................37 

Reset outputs after last Series.............37 

Skip missing vials.................................35 

Syringe speed ......................................35 

Syringe volume.................................... 35 

Tray type.............................................. 36 

Use calibration vials ............................ 36 

Use Prep mode ................................... 37 

Vial type............................................... 36 

Volume of installed loop ...................... 35 

T 

Technical Data......................................... 77 

Temperature control 

Column thermostat .............................. 33 

Sample tray cooling............................. 33 

Test 

Linearity............................................... 68 

Mixture................................................. 69 

Report.................................................. 72 

Sample Carry-Over ............................. 67 

Sample Volume Reproducibility .......... 66 

Specification ........................................ 66 

Test Procedure ........................................ 65 

Test unit ................................................... 65 

Timed events program....................... 38, 40 

Tray cooling setpoint................................ 34 

Tray type.................................................. 36 

TTL input connector (P2) 

Freeze input......................................... 28 

Next inject input................................... 28 

Stop input ............................................ 28 

Typographic conventions 

Display................................................. 30 

Keyboard keys..................................... 30 

U 

Use calibration vials................................. 36 

Use Prep mode........................................ 37 

V 

Vial type ................................................... 36 

Vials ................................................... 24–27 

Eppendorf micro centrifuge tubes ....... 26 

Filling and sealing vials ....................... 26 

Reagent vials....................................... 25 

Standard vials...................................... 24 

Transport vials..................................... 25 

Vial dimensions ................................... 24 

Volume of installed loop........................... 35 

Volume of tubing needle -> valve ............ 35 

W 

Wash program ......................................... 38 

Wash between injections..................... 40 

Wash between series .......................... 40 

Wash between vials ............................ 40 

Wash solvent ........................................... 23 

Waste tubing............................................ 23 

Condense water and leakage drain .... 23 

General waste ..................................... 23 

Syringe waste...................................... 23

156 INDEX(deutsch) 

INDEX(deutsch) 

µ 

µl Pick-up....................................... 113, 126 

A 

Abfallleitungen ......................................... 97 

Analysenzeit .......................... 102, 113, 115 

Analytische Probleme............................ 132 

Anschlussbelegung ............................... 103 

AS 3900, präparativ............................... 147 

Austausch 

Firmware ........................................... 149 

Injektionsventil................................... 121 

Luftnadel............................................ 129 

Probennadel....................................... 128 

Spritze ............................................... 129 

B 

Betrieb ............................................. 119–21 

D 

Destination vials .................................... 118 

Device identifier ..................................... 111 

Direktfunktionen..................................... 105 

Display................................................... 104 

E 

Eichproben ............................................ 110 

Eingangsanschluss................................ 101 

Eingangssignal 

Nächste Injektion............................... 120 

Eppendorf Microzentrifugengläser ........ 100 

Ereignisprogramm ......................... 112, 114 

F 

Fehlermeldungen................................... 137 

Fernsteuerung ....................................... 120 

Firmware................................................ 149 

Freeze Funktion..................................... 111 

Freeze input........................................... 102 

Funktionstasten ..................................... 104 

H 

Haltefunktion.......................................... 102 

Headspace Druck .................................. 109 

HPLC Kapillaranschlüsse........................ 97 

I 

I/O Steueranschlüsse ............................ 101 

Injection 

AS 3900, prep....................................148 

Injekionsprogramm ................................112 

Injektion..................................................133 

Injektionen je Vial...................................113 

Injektionsabbruch...................................102 

Injektionsmarkierung..............................111 

Injektionsprinzip ....................................... 88 

µl Pick-up Injektion ........................92–94 

Partielle Schleifenfüllung ...............91–92 

Vollschleifeninjektion .....................89–90 

Injektionsprogramm ...............................113 

Injektionsventil (Valco) ...........................121 

Injektionsvolumen ..................................113 

Input edge next injection ........................111 

Installation..................................79, 94–103 

AS 3900, prep....................................148 


Explosionsbild des AS 3900 ................ 87 

Rückansicht des AS 3900 ................... 88 

K 

Kapillaranschlüsse ................................... 97 

Keyboard Tasten....................................104 

Kondenswasser........................................ 97 

L 

leere Vialpositionen................................109 

Lekageableitung....................................... 97 

Linearität ................................................142 

Logbuch .................................................108 

Luftnadel ................................................129 

Luftsegment ...........................................109 

M 

Methode 

Kopie..................................................108 

Löschen .............................................108 

Programmierung................................112 

Methodenabbruch ..................................119 

Methodennummer..................................117 

Methodenprogrammierung.....................112 

Mischprogramm .............................112, 116 

Mischtest................................................144 

Multi Link Anschlüsse ............................103 

N 

Nadel................................................96, 126 

Nadelarm................................................106 

Netzanschluss.......................................... 95 

Next Injection Signal ..............................102 

O 

Outputreset ............................................111

INDEX(deutsch) 157 

P 

Partielle Schleifenfüllung........................113 

PASA ....................................................85 

Prep Modus ............................................111 

Probennadel 

Eindringtiefe .......................................129 

Probennadel............................................128 

Probenpriorität........................................120 

Probenschleifenvolumen........................109 

Probenteller ....................................101, 110 

Probentellerkühlung ...............................107 

Probenverschleppung ............................141 

Programmierung während des Laufs.....121 

Programming Series 

Destination vials.................................118 

Pufferschlauch........................................128 

Pulslänge................................................111 

R 

Reagenzvials............................................99 

Remote Control ......................................120 

Reproduzierbarkeit.................................134 

Reproduzierbarkeit.................................140 

Rheodyne Ventil 

Modell 7739 .......................................123 

Modell 9740 .......................................125 

RS232 Anschluss ....................................101 

Runsequenz ...........................................117 

S 

Säulenthermostat ...................................107 

Schlauchanschlüsse.................................96 

Schnellstart.........................................79–83 

Schnelltest..............................................132 

Serie .......................................................117 

Serieller Modus ......................................107 

Service ...................................................108 

Sicherungen .............................................95 

Spezifikationstests..................................140 

Spritze ....................................................129 

Spritze ......................................................98 

Spritzenabfall............................................97 

Spritzengeschwindigkeit.........................109 

Spritzenvolumen .............................109, 116 

Standardprobenvial ..................................98 

Start und Stopp ......................................119 

Startprobleme.........................................131 

Statusinformationen ...............................119 

Steueranschlüsse I/O.........................101–2 

Steuerfunktionen ....................................106 

< MAINTENANCE >...........................106 

............................................ 106 

Nadelbewegung ................................ 106 

Serieller Modus ................................. 107 

Temperatur........................................ 107 

Ventilschaltung .................................. 106 

Stop input............................................... 102 


Input edge next injection ................... 111 

Tray type............................................ 110 

Systemeinstellungen.............................. 108 

T 

Tastatur.................................................. 104 

Temperatursteuerung ............................ 107 

Test 

Linearität............................................ 142 

Probenverschleppung ....................... 141 

Report................................................ 146 

Reproduzierbarkeit ............................ 140 

Spezifikations .................................... 140 

Verdünnungstest ............................... 144 

Test Prozeduren .................................... 139 

Testeinheit ............................................. 140 

Timed events program........................... 114 

Transportvials .......................................... 99 

Tray type................................................ 110 

Troubleshooting ............................... 131–34 

TTL Eingangsanschluss ........................ 101 

Typographische Festlegungen .............. 104 

U 

Überprüfungsintervall............................. 139 

V 

Verschließen der Vials........................... 100 

Vials ................................................. 98–101 

Dimensionen........................................ 98 

Vialtyp .................................................... 110 

Vollschleifeninjektion ..................... 113, 126 

W 

Wartung ........................................... 121–30 

Waschlösung ........................................... 97 

Waschprogramm ........................... 112, 114 

Z 

Zifferntasten........................................... 104 

Zubehör............................................ 98, 135

Smartline Autosampler 3900 Manual / Handbuch V 1508 03/2007

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